本发明提供了一种茄子花药诱导培养基及配制方法。培养基的成分由大量元素、微量元素、铁盐及络合剂、有机成分、无机添加物、植物生长调节剂、生理活性物质、碳源、凝固剂及其它添加物所组成。培养基的配制方法包括配制母液、制备生理活性物质、配制培养液、培养液加热溶解与分装、培养基高压蒸汽灭菌、培养基加入IAA等步骤。本发明所述的培养基具有高效率地诱导茄子花药产生花粉愈伤、培养基褐化轻的优点,可以显著提高茄子花药培养效率,加快茄子花培育种进程。
一种茄子花药诱导培养方法,其特征在于:所采用的茄子花药诱导培养基由以下组分制成:大量元素:KNO3 1900mg/L,NH4NO3 1650mg/L,KH2PO4 700mg/L,MgSO4∙7H2O 375mg/L,CaCl2∙2H2O 440mg/L;微量元素:MnSO4∙4H2O 22.5mg/L,ZnSO4∙7H2O 8.5mg/L,H3BO3 12mg/L,KI0.8mg/L,CuSO4∙5H2O 0.025mg/L,CoCl2∙6H2O 0.025mg/L,Na2MoO4∙2H2O 0.25mg/L;铁盐及络合剂:FeSO4∙7H2O 55mg/L,Na2‑EDTA∙2H2O 75mg/L;有机成分:肌醇250mg/L,维生素B1 0.5mg/L,维生素B6 0.5mg/L,维生素C 8mg/L,烟酸0.5mg/L,叶酸0.3mg/L,丝氨酸60mg/L,丙氨酸16mg/L;无机添加物:AgNO3 8mg/L,活性炭1.8g/L;植物生长调节剂:2,4‑D 0.5mg/L,IAA 0.4mg/L,ZT 0.4mg/L;生理活性物质:马铃薯提取液50g/L,椰乳25g/L;碳源:葡萄糖50g/L,纤维二糖20g/L;凝固剂及其它添加物:植物凝胶5g/L,甘露醇40g/L,水解蛋白1g/L;茄子花药诱导培养方法包括:选择茄子品种绿罐茄和博杂一号作为花药培养供体,田间植株进入花期后,于晴天上午9:00‑11:00取盛花期花蕾,将花蕾用洗衣粉洗净,以清洗附着在外植体上的灰尘和细菌,再用流动的自来水冲洗,4℃低温预处理;2天后取出花蕾,把花蕾用75%的酒精浸30S,再用滴加1滴吐温‑20的0.1%的氯化汞溶液浸8min,取出后用无菌蒸馏水冲洗5次,然后在无菌条件下剥出花药接种于茄子花药诱导培养基,暗培养4周,得到白色或淡绿色愈伤。
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