一种水塔花的离体快速繁殖方法,包括如下步骤:获取外植体并消毒,将消毒外植体接入初代培养基中培养获得不定芽,初代培养基为:在改良White培养基基础上,先调整硫酸铁和硫酸钠的浓度,再添加天冬氨酸和吲哚乙酸;将不定芽转移至继代培养基中培养获得继代培养苗,继代培养基为:在改良White培养基基础上,调整氧化钼和硼酸的浓度,另外再添加维生素K1、吲哚乙酸和萘乙酸;将继代培养苗转移至生根培养基中培养得到水塔花幼苗,生根培养基为:在B5培养基基础上,另外再添加钼酸铵和赤霉素;最后炼苗和移栽。本发明有效地提高水塔花的繁殖系数,为水塔花商业化生产提供充足的种苗源,与播种繁殖相比组织培养法能有效缩短育苗周期。
1.一种水塔花的离体快速繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)获取外植体并消毒选取健壮植株新生的幼嫩枝芽,自来水洗涤枝芽表面污垢尘土,先酒精浸泡,再升汞消毒,最后无菌水冲洗干净后得到消毒外植体,(2)初代培养将消毒外植体分割成0.6~1.0cm的带芽茎段,然后接入初代培养基中培养32~36天获得不定芽,初代培养条件为:温度为28±2℃,湿度为55~60%,光照时间为8~10小时/天,光照强度为1800~20001x,初代培养第1~7天,每天施加超声场3~4小时,超声场功率为10~15W/cm2,超声场频率为25~28KHz,初代培养第8~15天,每天施加超声场4~6小时,超声场功率为20~22W/cm2,超声场频率为30~35KHz;初代培养基为:在改良White培养基基础上,先将硫酸铁的浓度调整为3.0~3.2mg/L,将硫酸钠的浓度调整为160~180mg/L,再添加天冬氨酸6~8mg/L,添加吲哚乙酸2~3mg/L;(3)继代培养将不定芽转移至继代培养基中培养40~45天获得继代培养苗,继代培养条件为:温度为30±2℃,湿度为65~70%,光照时间为12~15小时/天,光照强度为3000~35001x,继代培养基为:在改良White培养基基础上,先将硼酸的浓度调整为2.0~2.2mg/L,将氧化钼的浓度调整为0.0003~0.0005mg/L,另外再添加维生素K1 0.5~0.8mg/L,添加吲哚乙酸1~1.2mg/L,添加萘乙酸1.2~1.5mg/L;(4)生根培养将继代培养苗转移至生根培养基中培养20~25天得到水塔花幼苗,生根培养条件为:温度为30±2℃,湿度为40~50%,光照时间为12~15小时/天,光照强度为5000~60001x,生根培养基为:在B5培养基基础上,另外再添加钼酸铵0.01~0.02mg/L,添加赤霉素2~3mg/L,用石灰水调节pH为6.5;(5)炼苗和移栽生根培养结束后,打开培养瓶盖,在自然光下进行开瓶练苗5~7天,然后将水塔花幼苗用清水多次冲洗去除残留培养基,用质量分数3%的多菌灵浸泡根部30min后再清水清洗后移入塑料小盆中,塑料小盆放置在遮光率60%~70%的大棚中2~3周,大棚中温度25~28℃,喷雾洒水保持湿度为75~85%,大棚炼苗一个月后移栽至定植地中。
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