本发明公开了脂肪酶协同凹土稳定的Pickering乳液及以此Pickering乳液为模板聚合含酶微球的制备方法,将凹土分散于磷酸盐缓冲液中形成分散液,分散液再与脂肪酶酶液混合,得水相;以引发剂2,2‑偶氮二异丁腈(AIBN)、甲基丙烯酸甲酯(MMA)及乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)溶解于甲苯中,得油相;油相和水相混合后,高速打浆,即形成酶与凹土协同稳定的水包油型(O/W) Pickering乳液;Pickering乳液通氮除氧后,移至恒温装置聚合;反应结束后,冷却至室温,用磷酸盐缓冲液洗涤产物多次,得含酶微球。本发明将酶的固化过程与乳液聚合过程同步进行,生物催化剂脂肪酶不仅起固有的催化作用,而且在乳液形成中起乳化剂作用,赋予了所得微球催化性能,给酶的固定化提供了一条新的途径。
1.脂肪酶协同凹土稳定的Pickering乳液,其特征是该Pickering乳液的制备方法包括以下步骤:(1)将凹土分散于磷酸盐缓冲液中形成分散液,分散液再与脂肪酶酶液混合,得水相, 又称为凹土分散液;所述脂肪酶酶液是指脂肪酶另溶解于磷酸盐缓冲液中形成的溶液,简称酶液;(2)以引发剂2,2‑偶氮二异丁腈AIBN、甲基丙烯酸甲酯MMA及乙二醇二甲基丙烯酸酯EGDMA溶解于甲苯中,得油相;(3)步骤(2)的油相和步骤(1)的水相混合后,高速打浆,即形成酶与凹土协同稳定的水包油型Pickering乳液。
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