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基于微阵列检测芯片的农兽药多残留的检测方法

专利号(申请号):201310338039.X

专利类型:发明专利

所属行业:农林牧业

交费状态:交费已下证

更新日期:2020-09-14 14:14:38

参考价:50000 元 (含:手续费及平台服务费)

专利详情:

【摘要】:

基于微阵列检测芯片的农兽药多残留的检测方法。本专利网">发明是以小分子的农兽药半抗原与牛血清白蛋白偶联制备成免疫抗原,用免疫抗原免疫小鼠制备得到相应的农兽药单克隆抗体,捕获单抗探针用生物芯片点样仪点样到琼脂糖修饰的玻片固相载体上,制备成多重复的“捕获单抗探针”微阵列。将农兽药半抗原与卵清白蛋白偶联制备成“半抗原-OVA”偶联体,然后用荧光分子Cy3标记。将待检样品液与“标记检测抗原”按一定浓度混合后,与芯片孵育,样品中的待测抗原和相应“标记检测抗原”与固定在芯片上的相应的“捕获单抗探针”直接竞争性结合,在一定的条件下洗脱。用生物芯片扫描仪检测结果。该方法能同时检测农副产品样品中多种农兽药残留,适用于种植、养殖生产中药物残留高通量、快速、准确检测。

【主权项】:

基于微阵列检测芯片的农兽药多残留的检测方法,包括如下步骤:第1步、将琼脂糖溶液涂覆于玻片,干燥后,用NaIO4溶液活化,用纯水冲洗后,干燥,得到琼脂糖修饰的玻片;第2步、将农药或者兽药的单克隆抗体用含40~60%(w/w)甘油的磷酸盐缓冲溶液稀释后,点样于第1步所得的琼脂糖修饰的玻片上,得到带有捕获单抗探针的微阵列芯片;第3步、将农药或者兽药的半抗原与卵清白蛋白偶联制备成半抗原‑OVA偶联体,再用Cy3标记,得到检测抗原;第4步、对第2步所得的带有捕获单抗探针的微阵列芯片进行温孵、封闭、洗涤,将检测抗原与不同浓度的农药或者兽药的对照品混合后,加入到微阵列芯片上的阵列中,孵育、洗脱,再用生物芯片扫描仪检测,绘制标准曲线;第5步、对第2步所得的带有捕获单抗探针的微阵列芯片进行温孵、封闭、洗涤,将待测样品与检测抗原混合后,加入到微阵列芯片上的阵列中,孵育、洗脱,再用生物芯片扫描仪检测,通过第4步所得的标准曲线计算得到待测样品中农药或兽药的浓度。