本发明属于光合细菌培养技术领域,具体的说是一种光合细菌筛选培养方法,该细菌筛选培养方法包括如下步骤:取样、开启培养系统、富集液配制、富集、分离、纯化培养基配制、分离纯化和批量生产;本发明为光合细菌制造一个适宜的培养环境,有利于光合细菌的大量富集,可缩短光合细菌的筛选时长,提高光合细菌的筛选精度,有利于光合细菌的筛选和规模培养。
1.一种光合细菌筛选培养方法,其特征在于:该细菌筛选培养方法采用如下培养系统,该培养系统包括光照模块(1)、培养箱(2)、控制器一(3)、搅拌模块(4)、环境调节模块(5)、营养箱(6)和气体交换模块(7),所述培养箱(2)用于培养光合细菌;所述光照模块(1)位于培养箱(2)一侧,光照模块(1)用于光合细菌光合作用;所述光照模块(1)中设置有循环管(11)且循环管(11)的两端均与培养箱(2)接通;所述循环管(11)上设置有输液泵一(111),输液泵一(111)用于输送循环管(11)内的液体;所述搅拌模块(4)安装于培养箱(2)上端,搅拌模块(4)用于将培养箱(2)内的光合细菌与营养液搅拌均匀;所述控制器一(3)位于搅拌模块(4)上端,控制器一(3)用于调节和控制搅拌模块(4)、气体交换模块(7)、环境调节模块(5)和营养箱(6);所述环境调节模块(5)布置于培养箱(2)上,环境调节模块(5)用于调节培养箱(2)内的环境;所述营养箱(6)位于搅拌模块(4)旁侧,且营养箱(6)与培养箱(2)接通,营养箱(6)用于暂存营养液和向培养箱(2)内输送培养液;所述气体交换模块(7)位于培养箱(2)旁侧且气体交换模块(7)与培养箱(2)接通,气体交换模块(7)用于更换培养箱(2)内气体以及除去气体中的氧气;所述培养箱(2)的上端设置有菌液进入口(21),培养箱(2)的下端设置有菌液出液口(22);该细菌筛选培养方法包括如下步骤:a.取样:从水库底泥中取泥水,低温带回;b.开启培养系统:取样过后,对培养系统进行灭菌处理,并利用控制器一(3)的控制,通过环境调节模块(5)调节培养箱(2)内的温度为28℃±1℃,通过气体交换模块(7)更新培养箱(2)内的气体,并将培养箱(2)内的氧气除去;c.富集液配制:完成步骤b后,取含有2%盐的盐水,并加入:NH4Cl、CH3COONa、MgSO4·7H2O、酵母膏和蛋白胨,调pH到7.0,121℃灭菌30分钟;灭菌后加入NaHCO3溶液和KH2PO4溶液后得到富集液;并将富集液投入营养箱(6)中;d.富集:取步骤a中的泥水从菌液进入口(21)投入到培养箱(2)中,利用控制器一(3)的控制,将营养箱(6)内的富集液引入培养箱(2)内;通过搅拌模块(4)将富集液与泥水搅拌均匀得到混合菌液,通过环境调节模块(5)调节培养箱(2)内的混合菌液的PH为7.0,通过循环管(11)通过输送泵一输送混合菌液进入光照模块(1)中;调节光照模块(1),使光照模块(1)对混合菌液进行光照,使光照强度不低于34μE·m‑2·s‑1的标准,光暗比为15h:9h;培养7天后,从菌液取出口(22)取出培养后的富集菌液;e.分离纯化培养基配制:待完成步骤d后,取含有2%盐的盐水并加入:NH4Cl、CH3COONa、MgSO4·7H2O、酵母膏和琼脂,调节pH值为7.0,在121℃灭菌30分钟;灭菌后加入NaHCO3和K2HPO4;f.分离纯化:在无菌环境下,移取d步骤中的富集菌液于无菌培养皿中,倾注冷却至50‑55℃的步骤d所述培养基,缓慢摇匀,静置凝固,并用薄膜进行密封,于28℃±1℃静置培养,光照强度36μE·m‑2·s‑1,36小时保温箱内光照培养,通过观察,挑取红色单菌落,重复在d所述培养基中进行划线分离,获得红假单胞菌属光合细菌;g.批量生产:取f中获得的红假单胞菌属光合细菌,重复步骤b、c的操作,将d步骤中的泥水更换为获得的红假单胞菌属光合细菌再重复d步骤,即可量产红假单胞菌属光合细菌。
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