[发明专利]质谱数据的评估方法和质谱法以及MALDI TOF质谱仪

说明书

本发明涉及一种用于分析生物样品中肽的质谱数据评估方法，尤其MALDI‑TOF质谱数据评估方法，具有以下步骤：a)提供期望质量亏损；b)确定测量质量亏损，即由质谱数据得出的质量亏损；c)将测量质量亏损与期望质量亏损相比较。

技术领域

本发明涉及一种用于分析生物样品中肽的、根据权利要求1和8所述的质谱数据评估方法，尤其MALDI-TOF质谱数据评估方法。此外，本发明还涉及一种根据权利要求12所述的、尤其在使用MALDI-TOF质谱仪的条件下用于分析生物样品中肽的质谱法。最后，本发明针对一种根据权利要求13和17所述的、用于分析生物样品中的肽的质谱法，以及一种根据权利要求19所述的MALDI-TOF质谱仪。

背景技术

在所谓的基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)中，在合适的样品制备后，用基质溶液涂覆生物组织样品，并在真空中进行激光轰击。从而从组织中提取生物大分子并离子化，通常仅具有单个正电荷。随后离子在电场中加速并由检测器记录。可以从飞行时间确定m/z值，即分子的质荷比。测得的质谱将记录的离子的相对数量(谱强度)作为其m/z值的函数示出。假设单个正电离，则m/z值等于电离分子的质量m。在下文中,为了简单起见，电离分子的质量m理解为m/z值。

m/z值或分子质量以道尔顿(Da)为单位、作为原子质量单位的倍数(1Da＝1amu,atomic mass unit)给出。近似地，以Da为单位的分子的质量对应于组成分子原子核的质子和中子的总数。该整数标称质量与实际质量之间的差称为质量亏损。分子的质量亏损是各个原子的质量亏损的总和，而每个化学元素或同位素的质量亏损又是不同的。

表述“质量亏损”在文献中没有统一使用。该术语的第一个含义涉及以SI单位kg为单位的质量差。第二个含义同样涉及质量差，但是基于原子质量单位u，其参考碳同位素12C来定义。基于此种规定，碳同位素12C的质量亏损为零。针对此第二个含义，也可使用术语“质量过剩”替代术语“质量亏损”以强调与前述第一个含义的区别。但在生物学和化学中，特别是在质谱法方面，仍然使用术语“质量亏损”，即第二种含义的意义，因此该说明书中也同样如此。

在从生物组织切片中获取MALDI-TOF质谱数据时，获得了关于组织样品的蛋白质组结构的大量信息。同时，测量受到许多潜在的干扰，这可能导致所获信息的失真和错误。数据的高度复杂性意味着通常不可能客观地判断其质量和准确性。目前还不存在广泛接受且易于应用的基准，该基准能够实现针对测量的数据质量如何、或者两个测量是否提供质量相当的数据的结论。

从US 2016/0003842 A1中已知用于分析肽的质谱法。该方法的目的是识别所谓的糖肽。US 2016/0003842 A1的图2a,2b中示出了质量亏损与标称质量m/z的关系。其中区分了一方面的积聚肽的区域与另一方面的积聚糖肽的区域。

经常出现的测量数据失真包括测量质量的系统误差，即使在精心控制的实验条件下，该系统误差也超过了测量技术限定的公差极限。在许多情况下，校正这种质量失真的传统方法要么太不精确、要么太耗费时间。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于质谱数据的质量控制方法(在分析生物样品中的肽的情况下)或一种质谱法，其具有相应的控制，或者一种具有信号校正的质谱法。

为了解决该目的，该方法具有权利要求1的特征。由此，提供一种用于分析生物样品中的肽的质谱数据的评估方法，尤其MALDI-TOF质谱数据的评估方法，具有下列步骤：

a)提供期望质量亏损；

b)确定测量质量亏损，即由质谱数据得出的质量亏损；

c)将测量质量亏损与期望质量亏损相比较。

根据测量质量亏损与期望质量亏损的偏差数值，可以将数据或所基于的测量评价为错误的或者可接受的。也可通过合适的信号源输出对应数据评价的信号，例如在显示屏上的显示。