[发明专利]一种基于响应面法优化中亚白及多糖超声辅助提取的方法

说明书

本发明涉及一种基于响应面法优化中亚白及多糖超声波辅助提取的方法，该方法将中亚白及粉碎后，过筛分离杂质，石油醚脱脂，乙醇脱色素，自然风干后用水为溶剂，利用Design Expert 8.0.6软件进行Box‑Behnken设计，以多糖得率为响应值，采用三因素三水平的响应面分析法优化中亚白及多糖的超声辅助提取，提取完毕后，提取液进行离心，浓缩，无水乙醇沉淀，再离心，将多糖沉淀物进行真空冷冻干燥，制备出中亚白及多糖。与传统方法相比，本发明所述方法所需时间显著缩短，温度显著降低，且抗氧化活性更高，易于扩大规模生产，是制备中亚白及多糖的理想方法之一。本研究可为中亚白及多糖在抗氧化和抗衰老功能性食品中的应用开发提供参考。

技术领域

本发明涉及一种基于响应面法优化中亚白及多糖超声辅助提取的方法，通过该方法获得的中亚白及多糖可作为治疗或预防抗氧化疾病相关的药物或保健品的制备原料。

背景技术

中亚白及(TUBER SALEP)，又名欧白及为兰科植物Orchis chusua D.Don的干燥块茎。功能与主治:生湿生热，壮阳生精，养心生血等。中亚白及国内分布于吉林、黑龙江、四川，国外分布于苏联、日本等。中亚白及是一个很好的葡甘聚糖(16-55％)的来源。

多糖又称多聚糖，是由糖苷键结合的糖链，至少要超过十个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，通式为(C₆H₁₀O₅)n。多糖来源非常的广泛，例如大多数高等植物、微生物(细菌和真菌)和动物体内均有多糖的存在。多糖在细胞与细胞信息交流、细胞吸附、以及免疫系统分子识别方面扮演着极其重要的作用。多糖已成为天然药物及保健品研发中的重要组成部分，国外多数制药公司都有从事糖类药物的研发。研究发现多糖具有抗氧化，抗肿瘤，抗凝血及免疫调节等多种功能，在医药、食品、化妆品和环境治理等领域具有广阔的应用前景。目前，有很多种多糖已被发现有体内外的抗氧化作用，多糖能够消除活性氧自由基，对活性氧产生的伤害有明显的改善作用。因此，近年来，关于多糖的抗氧化研究越来越受到人们的关注，已成为当今研究的“热点”。随着社会的发展和生活质量的提高，药品消费也逐渐从以化学药品为主向以天然资源为原料的植物药转变，中药在治疗、康复保健和提高人体免疫能力方面有独特的优势，己成为世界医药产业的重要组成部分。

多糖提取已应用多种先进技术，包括红外辅助提取、H₂O₂辅助提取、酶辅助提取、微波辅助提取和超临界流体萃取等。每种提取方法都有其优缺点。例如，红外及微波辅助提取要求高温，在高温下会导致一些热不稳定性成分损失，活性降低等；超临界流体提取成本较高，难以工业化生产。因此，需要一种新的有效的提取方法来避免这些缺点。近年来，超声辅助提取(UAE)作为一种方便、快速、低损伤、环保的方法，正受到人们的重视。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种基于响应面法优化中亚白及多糖超声辅助提取的方法。该方法将中亚白及粉碎后，机械粉碎，并过筛分离杂质，石油醚脱脂，乙醇脱色素，自然风干后用水为溶剂，超声辅助提取，并用响应面法优化条件，进行离心，浓缩，无水乙醇沉淀，再离心，将多糖沉淀物进行真空冷冻干燥，制备出中亚白及多糖。相对于传统方法相比，该方法所需时间显著缩短，温度显著降低，且生物活性更高，易于扩大规模生产，是制备中亚白及多糖的理想方法之一。

本发明所述的一种基于响应面法优化中亚白及多糖超声辅助提取的方法，按下列步骤进行：

a、将中亚白及块茎干制品用粉粹机粉碎、过40目筛，温度4℃下自封袋保存；

b、将步骤a所得中亚白及粗粉末在温度60℃下用石油醚索氏回流脱脂20h，抽滤，滤渣在流动空气下挥发溶剂；

c、将步骤b所得中亚白及脱脂样品在温度60℃下用乙醇索氏回流20h除去色素以及小分子，抽滤，滤渣在流动空气下挥发溶剂；