[发明专利]霍山石斛微卫星DNA分子标记无效

专利信息
申请号: 201110103370.4 申请日: 2011-04-25
公开(公告)号: CN102168084A 公开(公告)日: 2011-08-31
发明(设计)人: 朱国萍;郑基阳;陈乃富;王晖;高鹏;靳明明;王文才;李雪 申请(专利权)人: 安徽师范大学
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11
代理公司: 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 代理人: 方南
地址: 241000 安徽省*** 国省代码: 安徽;34
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种霍山石斛微卫星DNA分子标记,包括霍山石斛微卫星(CT)n富集文库的构建,微卫星序列阳性克隆的筛选及测序,得到36个含有微卫星重复序列的克隆,筛选得到了12个高多态性的微卫星分子标记Hs1、Hs2、Hs3、Hs4、Hs5、Hs6、Hs7、Hs8、Hs9、Hs10、Hs11、Hs12。本发明可用于研究霍山石斛的遗传多样性,石斛属植物种间和居群间的变异和进化关系,具有重复性好,是一种可靠有效的分子标记。
搜索关键词: 霍山 石斛 卫星 dna 分子 标记
【主权项】:
一种霍山石斛微卫星DNA分子标记,其特征在于:所述微卫星标记的标号分别为:Hs1、Hs2、Hs3、Hs4、Hs5、Hs6、Hs7、Hs8、Hs9、Hs10、Hs11、Hs12;其核苷酸序列分别为:Hs1:gatcaattga ggtggcaagt tcggataatt aggaatatgg ccttcaacct ccttattagt     60ggaagccacg accttaagaa caaagctaag atgcttcaat gaaagagata aggaaccctt    120caagcgtaaa aattaacatt tcaaagctct gaattttacc tgctcgctgt ggccctgtgg    180aaagtagaca acacgggttc cgacattggg cagacacact agaggaccag cacaagcatg    240ccaaagctcg gagttcaagc atctcttgtc ccccccttcc ataatgtcca cgagaccata    300aatatcaaaa caactatata caatagagag agtgcgaaat agagatagag agagagatag    360agagagagag agagagagag agagagagag agagagagag aaccttcctc atcctgctga    420ccagaactcc aaccgtcgag agcttcatcg cagcactcta aaaagctccg taaacactca    480acaagtaaga gaaacctaca gggcacatat ccaacttcac cgcgtt                   526Hs2:gatcaaaatg ttgtaacttc cgaacccgca ggaagggaac gtcgccgaac gaacgaagcc     60gaccagcatg aagaagctga agaagctagg aggcgacggg ataatggagg aaagattgtt    120gcctctccct ctccctctcc ctatccctct ccccccctct ctctctctct ctctctctct    180ctctctctct ctctctctct ctctctctct gaacgaagga atcaggaggt agaggtggag    240ttcggacgag gttacgtgga tggtcggcct gatgtggctt cggtctaggt aaggttatgg    300cgtgttaagt tcgagcttta gggttctagc gtcggcttga gaagatggag gtcggaaggt    360ttgcggctgg ttggagacga atcggaacta gggcagagga ttcgaagggg tgatcggcag    420tggcttgaag tcgagagcgg gagagagtcg tcgcgaatgg aggtctcttc atctcctatt    480taacgacgcg aaaagtacga ttcagcggaa ctcttgcagg aataaccagc ggcgccgaac    540agtcaggtaa cgggatttat gggatttttg tttagcgttt ttttctctct ttttgttctt    600ttaaacatag gtcaacaaga actctggctt agatggcatt cggaccagcg gcgtccgtag    660gctgccggct gaaattccag agtggtggta gaggaggttt ttattttctt ccttattttc    720ttctgttcct gctt                                                      734Hs3:gatctagttc tccttttaaa tatccctatt ctacccacat ttgtttagct gggttggtgg     60acagagtatg gttaggaact ctcaactcat gctcgattcc tcttaagtgg gctccaatca    120aatgcacgtc agaaagtttc tggggtgggt gccgcttcta agtcagtcga gaattagtca    180ctacattaag cgtcctttcg gggatgacaa cgaatgaata cccagtttcc aaaaataaaa    240aaatccctat tatacaattt ataccttcct caaagcaaga gtgaaccagt tttctgtgtt    300ctgaacccat cattttatgt tttcttcact tatatctaaa ggagagagag agagagagag    360agagagagag agagagagag agagagagag agagagagag agagattctc tatggcaaaa    420atggcaggaa gtaacaacag gaagaggcca tatgggttgc ttctgctgct tgctcttggc    480atggcagtta tgtgcgcagt ggtgcttcac cagcttaggg agggcagagt tcttagcctc    540ctaatccagg aaagagacca gcagcttgac acccttcaaa tcctcttgca ggttctgaat    600aagcttttca ttattttttc taactattta agccttcttt tatcatattc gatgcaaatt    660catcaaaata gatttttttt taatgcctca accaatttta gttgggatg                709Hs4:gatcatcaac gacaagccat caaatagaat gtgattggtg atgaatgact tttgtgctag     60gtcgctggac ttggtggaga ggtgtcgacg atgtttgtat gttggtggct aggaagttga    120agtgaggtgg ctgctggtta aggtcaatag tgagcaacgg tttgagagag agagagagag    180agagagagag agagagagag agagagagct cagtggtggt aatgaagtga gtgagaaggg    240aagtgagatt catcggcaaa gagtttgatt agttgagagt ggcggcctga gataagttag    300tgtggatagt tcatcattgg agaaggtgca tatggttggc acttggcagt taacttaatg    360agacagagaa gtgcagagga aggagtcata atcaaaagga gaggattaaa atcctctact    420ccacatgaat ggttttgttg atgctgtcat cagcaagctt ttgctatgcc ttcttgcctc    480tctatcatct agggttttaa tagtttaggc aaaagcgaaa ggggaaaggt               530Hs5:gatcatgcac tatgttccta cgccatggat gatgcgctct gttacaacac cattgatgac     60gcgttctgtt cctacgccac ggatgatgcg ctctatccat acgccacaaa gaatgcgctc    120tgtttcgaat ccctctcatc gtcgccgtta cggtgtgcac atcgtttctt ttcttctctt    180aatttctaca ttctctctct ctctctctct ctctctctct ctctctctct ctctctcaca    240cacacacaca cacacattcc cactttttgt gctcattttt tcgattaacg attcagagta    300tgaagtacta tctcgtttgc cctcacaaca tacaaatcat ataagggtgc agtctgcagc    360cattgatact aatgagatgg aaccagagca acaggtaatt aatcttaaga acgatcatga    420ttttttacat acgagt                                                    436Hs6:gaacatcctg ctgacagaag cggacagaac aaagcccgct ctgcccctac tcgacaaagc     60gctatcttcc aaattccagc aagaagaatg tcttcccagt tcctcctcct ataaaaccct    120ccccatttct ctgcccatta cgaaactaaa tcctccaaaa aatctctctc tctctctctc    180tctctctctc tctctctctc tctctctctc tctctctctc tcgtccttcc tacttgtgct    240ttaaaagtta acagaactaa cagtaaccat gtgtcaatca aataatccag agaccaactt    300caaagacagc catccccata cagacgcaga cgcagtcttc gctgcaccac ttatcgccaa    360gacccagagc aacgatgaaa cccccaacat caaatcccca ccgccggcgc ctgctcgcca    420gcttgcgagg tccttcatcg aaataaaatc aattttttcc atatcacttc ccatgattct    480gaccggcctt ctcctctact cccgctctat                                     510Hs7:gatcatactg gatttatagt ggttcgttca aaagtgacta tccttttgct cccacaataa     60ggtagagaag ccctcacaaa aactccttta tgccaacccc gatgaggtag agaacccaac    120tccttttgct tcctcctgaa gaagacagag aacccaaatc tttttgcttt ctcctgaagc    180aggcagagaa ccttgaccaa ttactgaagc ttatctccct tgaaccccta aggacaaagg    240acgaagactg gagaaaatgc catggaacct tgcttggagc aacctttgtg aatccctctc    300acaaactccc tctcacaagt tcctccttct ctctccctct ctctctttct cctcttggct    360ctctcaggtt aagacaacag ctaaagttct ctttgcatga gaaaattcgg gtcctttaaa    420tataatttca agaaccgaca ttatcattca ggatgatagg aatatcgtcc tggccgatca    480gtataaaata ggctcaatca gtcgggatga tttgggacga tcagaaaaaa attggttaca    540tcgtccagat                                                           550Hs8:gatcaaagca caaaactaaa actaaaatac ttcaccataa tgagtaacat atgaggaaat     60taaatacaga aataaaataa agaaagagca aaccaaattt ataatgattc ggtcaaacct    120tgacctatgt ccactcctca gaggcaccct atgagtattg cactatgtaa gtgtctctcc    180tttatctccc atagctaggc ggagaagcct ttacaataga ctccatttca ccaacaccag    240tgagacaaag aactaactcc ttttgcttcc tcctgaaatg ggcagagaac tcaaactgtt    300tgctgaagca aacctcccaa gaataaaaaa tgaagaatag agaagatgac ttggaacctt    360acttggagca accattatga atcatctcac aaactcctcc tcacaagttc ctctctctct    420ctctctctct ctctctctcc ttctccctag gctctctcag gtcaagatag tagactcaag    480gtgttatgca tgagaaaatt tgggtccttt aaatagaatt taaagaattg atattatcat    540ccaggatgat atttctattg tcctgtacga tcagtacaaa ttaatctcaa tcagcctgga    600tgacatggga t                                                         611Hs9:gatcacatgt atctgaggag tggccttggt gctcttagca cggagttagt atcatagaac     60gggacaagaa gatatatccc ttcctctggt tgtggcagac cctgcaaaat ctctctctct    120ctctctctct ctctctctct ctctctctct ctctcagagc gattctccag cataatttgc    180caaagtctta ccgagacggt gcagaaataa aagaaatctg cccacgtcgt cgcttctcca    240tcgacgttga agatgacggg cagcttttct gccgttgaag aggactcatc gcagtcgaag    300ctcgtcgctg accgttatct caagcgggag ctactcggcg aaggcacgta tggtgtcgtc    360ttcaaggcca tcgacactaa ggtctatttc ttttcggtct ctctacgttt ggattattta    420tgctctgaat attattaggg ttttcagttt tctcctttaa ctaatagatt gcacggtcta    480gtaggttatt caactgtata tattctcaca ttcagataga aagttgagta tatgaaactc    540tagttgaagc tagggtgatg atttccaatg ctgctatttg cctgtttgtg gaag          594Hs10:gatcaatata gtaatttgca aataattctc tcttataatg gtatgactaa acacttctgt     60tacaccatcc tctctctctc tctctctctc tctctctctc tctctctctc tctctcacac    120acctttagat tgcttctaaa ttatgctcaa ttcatacctt cccttgtgtc aatcaagcta    180ttcagtcaca agcatcttgt catctcgtat caaacttgaa tcatttcgtt gtgattgtgc    240caagtcataa atgttttttc tcattgtcaa aggattcatg caattgattc cacatattgg    300gataaagtct tattattgat ataaaagtca tttgtcttct tcgatttttt tgtgttacca    360tagatgaatt tcggacttgt ctttttactt tttttttagt ttgaaaataa ctctatattt    420taaaataggc attatggtct tataccacct aatcctcaaa ggagggtgag atggttaaaa    480gtaagcaaaa gggacgaaaa aagtgaacaa atttataata atgagagcga gagaagataa    540tactcgaaaa atttcatccc tacaaatcct ctataccata ttcttcacca ttccccattt    600agttattttt ggaattgtcc atacttaatt agcccaagcc aattcaatcc ataactaggc    660aagcat                                                               666Hs11:gatcatactt gagtatcgtg gcacttgaca gggtggcatt gcggctgtgg aatatgaact     60agcacctcag cgttgtaatg ttggctccac tacagtgctg ggtgacgtga gatagttata    120gccaaaatcg ttgtgattat taagtcggcg tggctcatag aagttataca gtttatcttc    180acacacacac acacacacac tctctctctc tctctctctc tctctctctc tctctctctc    240tctctctctc tctctcacac acacacacac acacacacac acacacacac acacacacac    300acacacacac acacacacac acacacacac acacacatac acatacaagc gaagaaatgt    360aaagactcct atccatcaga gtctggattc tcattatcat cattacggcc tttcccttga    420ggatgccaaa taaagggttc ataaaaaagt gcaaaaggaa attgaagttg gtttaggtgc    480tcaacaaatg gactactcct gaacatccca acatgagctt tatttatatc ggctatatat    540ctataattct tctcttgct                                                 559Hs12:gatcgggtgc agctttcatt cactccatca agagcatgga ttaaaaagga atctgagata     60cacacctcaa ggctcacctc acaatgcagt gcccagaagc tgcctcaagg cttgcacttt    120ttttttcgag actatgcctc agatttatgc cataaggaat ttgaggcaaa accttaaatc    180aatactaaat aaattttttt tttaattcgt ttgttaatgt tatacctaat ataactcata    240gcccagttaa aaattttaag ttagacttac gagaattgag tacgagaaga gagagagaga    300gagagagaga gagagagaga gagaggctgt ggttcaaaaa aaagcaacaa gaaatgcaat    360gcaacggggg tgtcaagttc cctttagata aatatttaag atggagattc gctttcattt    420tcttaaactg tgattttata ctttatgatg atgaacaaag ttaataggtt gatgatttat    480gacatattta tgaattattt ttttattatt agagtcttag gtctcttatc tcactaagga    540aaaacacctc agttcatgtt tcacctattt aaatctt                             577。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽师范大学,未经安徽师范大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201110103370.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 接头、接头文库及其应用-201810414797.8
  • 邵迪;叶明芝;宋炎 - 深圳华大临床检验中心;广州华大基因医学检验所有限公司;深圳华大基因股份有限公司
  • 2018-05-03 - 2019-11-12 - C12N15/11
  • 本发明提供了一种接头。该接头包括:单链核酸段,所述单链核酸段由单链核酸形成,所述单链核酸段包括样本标签序列、随机序列、引物结合序列;以及双链核酸段,所述双链核酸段由双链核酸形成。该接头随机引物设置在接头的单链区,有利于接头上下游引物的退火,接头的连接效率以及建库模板DNA的利用率显著更高,接头处引入随机序列作为分子标签序列,可用于建库模板的DNA分子的特异性的标记,从而在测序序列中区分真实变异和建库或测序中引入的碱基错误,可用于对突变丰度低到1‰的基因进行检测。
  • 一种快速检测爪哇根结线虫的LAMP引物及其应用、检测方法-201910864455.0
  • 宋志强;梅时勇;杨喜爱;张晓伟;肖清明;肖爱平;冷娟 - 中国农业科学院麻类研究所
  • 2019-09-12 - 2019-11-08 - C12N15/11
  • 本发明涉及植物病原检测技术领域,特别涉及一种快速检测爪哇根结线虫的LAMP引物及其应用和检测方法。所述引物包括正向外引物Mj‑F3、反向外引物Mj‑B3、正向内引物Mj‑FIP和反向内引物Mj‑BIP;引物核苷酸序列依次如SEQ ID NO.2~5所示。基于该引物建立了LAMP检测方法,可应用于线虫样品、植物根组织样品和土壤样品中爪哇根结线虫的快速检测和鉴定,具有特异性强、灵敏度高、仪器设备简单、操作简便、快速高效、结果判定可视化等优点,在爪哇根结线虫现场快速检测和爪哇根结线虫病的早期诊断及指导科学用药等方面具有很高的推广应用价值。
  • 猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用-201910110764.9
  • 陈振海;王敏敏;孙怀昌;张鑫宇;周晓慧;牟春晓 - 扬州大学
  • 2019-02-12 - 2019-11-05 - C12N15/11
  • 本发明涉及猪塞内卡病毒全长感染性克隆的制备方法及应用,包括如下步骤:(1)SVV/GD05株基因组全序列的扩增;(2)pSVV‑GD05病毒感染性克隆质粒的构建;(3)pSVV‑GD05‑iLOV重组质粒的构建;(4)亲本病毒(SVV‑GD05)与重组病毒(SVV‑GD05‑iLOV)拯救。本发明利用一株分离自中国猪群的SVV毒株,构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pSVV‑GD05,并能成功拯救出病毒。同时,将报告基因iLOV插入SVV感染性克隆病毒基因组中,成功拯救出能表达该报告基因的重组SVV病毒。本发明为深入开展SVV的基础和应用研究提供了有效的平台,具有重要的科学应用价值。
  • 一种适用于超微量DNA测序的接头及其应用-201780009071.X
  • 张晓妮;刘明;钟果林;许明炎 - 深圳市海普洛斯生物科技有限公司
  • 2017-05-27 - 2019-11-01 - C12N15/11
  • 本申请公开了一种适用于超微量DNA测序的接头及其应用。本申请的接头从5’端到3’端依序包括Tag序列、PolyN序列、第一发夹互补序列、第一发夹结构序列、dUTP、第二发夹结构序列和第二发夹互补序列;第二发夹互补序列为第一发夹互补序列的反向互补序列;并且,接头的5’端具有磷酸化标记。本申请的接头,在其中设计发夹结构,使用时,接头自身形成发夹结构,然后与待测DNA进行连接,这样有效的避免了接头在与待测DNA连接时的自连,从而避免了由此造成的连接效率低的问题。本申请的接头特别适用于超微量DNA的文库构建和测序,为ctDNA的准确检测奠定了基础。
  • 一种新的胃癌标志物circ-EIF4G3的应用-201910403455.0
  • 康宁;朱桂芳;曹秀峰 - 江苏万成生物医学研究院有限公司
  • 2019-05-15 - 2019-10-25 - C12N15/11
  • 本发明公开了一种新的胃癌标志物circ‑EIF4G3的应用,涉及circ‑EIF4G3分子标志物的检测、应用,设计并合成出特异性用于实时定量PCR的检测引物。针对目标人群对胃癌内镜筛查依从性差,以及临床上确诊的胃癌患者绝大多数都是中晚期的现状提出,在胃癌癌变进程中找到理想的分子预警信号,有针对性的进行内镜检查,病理确诊,以减轻病人痛苦,避免过度医疗,节省医疗资源。本发明发现circ‑EIF4G3分子标志物可作为胃癌患者检测和监测预后的标志物。
  • 用于多重核酸测序的Index和引物-201610645107.0
  • 王绪敏;刘贵明;赵倍伦;王国良;于军 - 中国科学院北京基因组研究所
  • 2016-08-08 - 2019-10-11 - C12N15/11
  • 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及用于多重核酸测序的Index和构建16SrRNA多重核酸测序文库的PCR引物。本发明提供的Index充分考虑到索引标签之间的序列差异程度、碱基识别率以及测序反应对不同Index序列的数据产出偏好性,将其包含于测序或建库引物后,混合测序反应得到的测序数据平衡性相对较好。本发明提供的PCR引物非常适用于土壤样品,特异性强,目的扩增条带清晰、无弥散现象,使得土壤样品中细菌多样性研究更加高效便捷准确。本发明提供的PCR引物中含有本发明提供的Index,获得的扩增产物中含有两个Index标签,将该Index用于混合样品测序,能够实现对不同测序文库的区分。
  • 一种提高黑色素产率的基因及其应用-201710915508.8
  • 梁玉玲;卢振;刘振 - 河北大学
  • 2017-09-30 - 2019-10-11 - C12N15/11
  • 本发明公开了一种提高黑色素产率的基因,该基因是将基因Cjhppd的编码蛋白的氨基酸序列的第280位的Tyr突变成Phe,命名为Cjhppd Y280F,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;同时公开了该基因在生产黑色素中的应用。本发明提供的基因Cjhppd Y280F能够显著提高脓黑素的产量,将其用于生产脓黑素具有方法简单、生产成本低,生产周期短、产量高、可以控制等优点,且生产的脓黑素为天然黑色素,不需要动、植物原材料,其与人工合成黑色素相比具有安全、无毒等优势。本发明生产的黑色素可以作为原料用于制备保健食品、日用化妆品、防晒膏、防晒霜、黑发剂以及生物菌肥的菌体保护和酶制剂等。
  • 一种荧光共振探针及其应用和试剂盒-201611174024.4
  • 金宗文;罗擎颖;刘琳 - 深圳先进技术研究院
  • 2016-12-16 - 2019-09-27 - C12N15/11
  • 本发明提供了一种荧光共振探针及其应用和试剂盒,属于生物化学领域。本发明提供的荧光共振探针,适用于检测靶核酸片段,其包括能够与靶核酸片段形成T型结构的第一荧光探针和第二荧光探针,该T型结构可以确保第一荧光探针上的第一荧光基因和第二荧光探针上的第二荧光基因发生荧光共振能量转移。通过检测荧光共振能量转移效率实现对靶核酸片的定性或定量检测,该荧光共振探针具有较高的特异性和灵敏度,能够将碱基序列差异程度低至一个碱基的靶核酸片段检测出。
  • 一种组织特异性基因转录调控元件的构建方法-201810029811.2
  • 左永春;李涛;郭树春 - 内蒙古大学
  • 2018-01-12 - 2019-09-20 - C12N15/11
  • 本发明公开了一种组织特异性基因转录调控元件的构建方法,包括以下步骤:步骤1、目标基因序列的筛选;步骤2、多物种直系同源基因启动子序列提取;步骤3、MEME和XXmotif识别DNA结合模体;步骤4、序列一致性核心序列截取;步骤5、序列DNA甲基化,染色质开放状态功能位点优化;步骤6、增强子和第一外显子拼接。本发明的组织特异性基因转录调控元件的构建方法设计合理,能较为精准的优化出组织特异性高效调控下游基因的最优调控启动子元件,有效提高目标基因的组织特异性表达效率。
  • 一种双引物及其应用-201910472273.9
  • 汪雪;金柳;王孟强 - 汪雪;上海索境生物科技有限公司
  • 2019-05-31 - 2019-09-03 - C12N15/11
  • 本发明属于生物技术领域,涉及一种双引物及其应用,具体涉及一种用于滚环扩增/鉴定环形核酸的双引物,其组成的反应体系,其组成的试剂盒及其应用,所述双引物为分散型引物,所述双引物中的第一引物和第二引物的3’端的距离为0‑1000bp,所述双引物能够对环形DNA/RNA进行分子鉴定,所述鉴定方法准确、快速、便捷、直观,为新型环形DNA/RNA的发现提供有效手段。
  • 一种校对活性酶抑制剂及其降低抑制作用的方法-201510937671.5
  • 戴忠敏;朱晓静;孙淑慧;谢冰花;邱猛生 - 杭州师范大学
  • 2015-12-15 - 2019-09-03 - C12N15/11
  • 本发明公开了一种校对活性酶抑制剂及降低所述校对活性酶抑制剂在聚合酶链式反应中对校对活性酶活性抑制的方法,所述抑制剂为含有连续或不完全连续的n个G的寡核苷酸,n为大于4的正整数;所述不完全连续为n个G中间含有1个A、T或C;本发明提供一种校对活性酶抑制剂,富含G碱基的寡核苷酸能够抑制具有校对活性的DNA聚合酶的活性,使PCR扩增失败;通过将降低含有所述抑制剂的寡核苷酸浓度(降低至不大于0.1μM),或者将富含C碱基的寡核苷酸与富含G碱基的寡核苷酸互补配对后能够降低其抑制作用。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top