[发明专利]一种临床血液样品中病原菌DNA的制备方法和试剂盒无效
| 申请号： | 201110148921.9 | 申请日： | 2011-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN102250879A | 公开（公告）日： | 2011-11-23 |
| 发明（设计）人： | 周立庆 | 申请（专利权）人： | 广州英诺生物医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;余炳和 |
| 地址： | 510000 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种临床血液样品病原菌DNA的制备方法和试剂盒。它是将临床血液样品与牛胆汁或牛胆粉混合，使牛胆汁或牛胆粉裂解非病原菌细胞；在裂解非病原菌细胞的同时或裂解后，加入脱氧核糖核酸酶降解非病原菌细胞裂解后释放出的DNA；将上一步骤获得的混合物离心，收集沉淀物；按常规方法从沉淀物中制备病原菌DNA。本发明利用临床样品中的致病细菌和真菌对牛胆汁和牛胆粉具有耐受性的特点，利用牛胆汁或牛胆粉将临床血液样品中的非病原菌细胞裂解，使非病原菌细胞DNA释放出来，再用脱氧核糖核酸酶降解，选择性去除非病原菌DNA，使病原菌DNA富集。利用该DNA进行PCR反应，能避免占绝大多数的非病原菌DNA对病原菌PCR检测的干扰，提高PCR反应的专一性和灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 临床 血液 样品 病原菌 dna 制备 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种临床血液样品中病原菌DNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)将临床血液样品与牛胆汁或牛胆粉混合，使牛胆汁或牛胆粉裂解非病原菌细胞；(b)在裂解非病原菌细胞的同时或裂解后，加入脱氧核糖核酸酶降解非病原菌细胞经裂解后释放出的游离DNA；(c)将步骤(b)获得的混合物经离心分离，收集含有病原菌细胞的沉淀物；(d)按照常规方法从沉淀物中分离制备病原菌DNA。
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- 马提亚·克里森;贝亚特·克里森;海因茨·克里森 - 苏黎世联邦理工学院
- 2018-02-20 - 2019-10-22 - C12N15/10
- 本发明涉及将DNA零件装配成数千碱基长的合成DNA构建体的方法。该方法平行地产生多个同义DNA零件，并以组合装配方式选择具有最佳合成和装配可行性的那些序列变体。DNA零件经过序列优化并分配成同义变体设计，所述同义变体设计充当用于高级DNA装配的冗余构建单元。该方法的主要阶段是：DNA设计的计算分配和同义重编码，序列变体池的DNA合成，连续PGR以分离DNA零件组和高级装配。由于高级装配不再依赖于每个DNA零件的成功合成，因此可以快速完成大规模DNA设计以允许合成生物设计的高性价比且高度并行化的装配。
- 一种快速、安全、无毒的RNA提取方法-201910555079.7
- 顾月清;张行;陈红红 - 中国药科大学
- 2019-06-25 - 2019-10-18 - C12N15/10
- 本发明公开了一种快速、安全、无毒的RNA提取方法，先在样本中加入裂解液和蛋白酶K工作液，使样本裂解释放出DNA/RNA，再采用氯仿抽提得到核酸水溶液，然后加入核酸助沉剂，向得到的固体核酸中，加入DNase1消化液去除DNA残留，之后加入DNase1终止液使DNase1失活，即可。本发明的方法可以高效去除样本中的蛋白质、脂类、无机盐等杂质，提取的核酸纯度高，片段完整，提取过程快速安全无毒。
- 一种植物病害菌总DNA提取方法-201910716032.4
- 王琦旻 - 湖州三零科技股份有限公司
- 2019-08-05 - 2019-10-18 - C12N15/10
- 本发明涉及分子生物学实验技术领域，具体而言，涉及一种植物病害菌总DNA提取方法，包括：菌体样本经过液体培养基培养、溶菌酶溶解、CTAB/NaCl溶液分离DNA、氯仿及苯酚‑氯仿多次萃取，得到含有DNA的提取液，除去该提取液中的杂质即得病害菌总DNA。所述的DNA提取方法，细胞破壁效果好，酚氯仿分层萃取率高，尤其适合于水稻、小麦、番茄和黄瓜等果蔬的细菌类病原菌的DNA提取。
- 一种固定板位的AMTK自动化工作站-201920070056.2
- 刘茜;张茹松;吴昊 - 微分（上海）基因科技有限公司
- 2019-01-16 - 2019-10-18 - C12N15/10
- 本实用新型公开了一种固定板位的AMTK自动化工作站，包括板位底盘、凹槽，凹槽内分别盛放有样本板位、96孔磁力架板位和试剂板位，凹槽的相对应的两侧边上均安装有卡夹，卡夹采用倒L形状的角铁设置，卡夹固定安装在板位底盘上，卡夹与板位底盘之间设有滑槽，样本板位、96孔磁力架板位和试剂板位沿其长宽度方向的两侧边上均安装有夹块，夹块与滑槽配合设置。本实用新型结构简单合理，使用快捷方便，将样本板位、96孔磁力架板位和试剂板位两端的夹块均通过滑动的方式滑到滑槽内部，这样卡夹便可以和夹块进行配合，实现对样本板位、96孔磁力架板位和试剂板位的稳定定位，避免实验中机械臂带来的实验不稳定性。
- 使用抗体的靶标核酸浓缩和回收方法-201880014824.0
- 海老沼宏幸;内田桂 - 积水医疗株式会社
- 2018-03-27 - 2019-10-18 - C12N15/10
- 本发明的目的是提供一种有效的核酸回收方法，该方法能够从含有核酸的样品中浓缩核酸，使得所述核酸可用于基因扩增反应。为了解决该问题，本发明人发现了通过靶向与核酸结合的蛋白质(下文中也称为核蛋白或蛋白质‑核酸复合物)而不是靶向核酸本身，或具体地，通过使针对蛋白质的特异性抗体起作用，可以与蛋白质同时捕获核酸，从而完成本发明。此外，本发明人已经发现，如果动物细胞、细菌、病毒等具有与细胞中(在病毒的情况下在包膜中)存在的蛋白质相结合的核酸，则在用表面活性剂处理细胞后，可以通过使用针对核蛋白的特异性抗体捕获并回收结合的核酸，而不将核酸从蛋白质中解离。
- 一种膀胱内尿液细菌基因组DNA的提取方法-201910627000.7
- 柳丰萍;薛育政;朱升龙;孙仁娟;邹叶青 - 江南大学
- 2019-07-12 - 2019-10-15 - C12N15/10
- 本发明公开了一种膀胱内尿液细菌基因组DNA的提取方法，主要包括尿液样品采集、离心提取沉淀物、细菌细胞的溶解、磁珠提取液提取DNA、磁珠提取液的洗脱、PCR扩增及产物的DNA电泳检测等步骤。该方法是针对膀胱尿液中微生物含量低、现有的肠道样品细菌DNA提取试剂盒在提取膀胱尿液DNA时无法提取足够量的DNA以用于后续研究的现状设计的，针对性强，步骤简单易操作，提取效率高。
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