[发明专利]一种临床血液样品中病原菌DNA的制备方法和试剂盒无效
| 申请号： | 201110148921.9 | 申请日： | 2011-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN102250879A | 公开（公告）日： | 2011-11-23 |
| 发明（设计）人： | 周立庆 | 申请（专利权）人： | 广州英诺生物医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;余炳和 |
| 地址： | 510000 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种临床血液样品病原菌DNA的制备方法和试剂盒。它是将临床血液样品与牛胆汁或牛胆粉混合，使牛胆汁或牛胆粉裂解非病原菌细胞；在裂解非病原菌细胞的同时或裂解后，加入脱氧核糖核酸酶降解非病原菌细胞裂解后释放出的DNA；将上一步骤获得的混合物离心，收集沉淀物；按常规方法从沉淀物中制备病原菌DNA。本发明利用临床样品中的致病细菌和真菌对牛胆汁和牛胆粉具有耐受性的特点，利用牛胆汁或牛胆粉将临床血液样品中的非病原菌细胞裂解，使非病原菌细胞DNA释放出来，再用脱氧核糖核酸酶降解，选择性去除非病原菌DNA，使病原菌DNA富集。利用该DNA进行PCR反应，能避免占绝大多数的非病原菌DNA对病原菌PCR检测的干扰，提高PCR反应的专一性和灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 临床 血液 样品 病原菌 dna 制备 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种临床血液样品中病原菌DNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)将临床血液样品与牛胆汁或牛胆粉混合，使牛胆汁或牛胆粉裂解非病原菌细胞；(b)在裂解非病原菌细胞的同时或裂解后，加入脱氧核糖核酸酶降解非病原菌细胞经裂解后释放出的游离DNA；(c)将步骤(b)获得的混合物经离心分离，收集含有病原菌细胞的沉淀物；(d)按照常规方法从沉淀物中分离制备病原菌DNA。
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