[发明专利]双碱基酶kex2变体及其高效表达方法有效
| 申请号： | 201510418588.7 | 申请日： | 2015-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN106337042B | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 赵致;安少朋 | 申请（专利权）人： | 上海雅心生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/60 | 分类号： | C12N9/60;C12N15/81;C12N15/57;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 201821 上海市嘉定区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及双碱基酶kex2变体及其高效表达方法。本发明人发现，采用毕赤酵母来表达Kex2时，适当地截短可实现蛋白的高表达，且良好地保留蛋白的生物活性，并且在适当位点的突变还能进一步促进其与底物结合效率。本发明人的新发现解决了现有技术中难以高效表达Kex2的技术难题，并为Kex2的生产提供了一种简单而稳健的发酵工艺。 | ||
| 搜索关键词： | 碱基 kex2 变体 及其 高效 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种稳定表达活性双碱基酶kex2的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)提供双碱基酶kex2的变体，所述变体是kex2的第20‑667位截短体，或是kex2的第20‑599位截短体；所述的截短体中，以SEQ ID NO:1所示的全长双碱基酶kex2的氨基酸序列位数计，第225位由K突变为L；(2)将包含(1)的变体的编码序列的重组质粒转化酵母，获得重组酵母；和(3)培养(2)的重组酵母，表达活性双碱基酶kex2。
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