[发明专利]雌三醇半抗原和抗体及其快速传感器在检测游离雌三醇的方法中的应用

摘要

本发明涉及生物传感器技术领域，公开了雌三醇半抗原和抗体及其在检测游离雌三醇的快速传感器方法中的应用。本发明科学设计半抗原结构，提高抗原‑抗体的灵敏度和特异性，在电极表面电沉积普鲁士蓝‑壳聚糖‑纳米金复合膜，并将雌三醇抗原固定在膜表面，待封闭未结合位点后加入新型辣根过氧化物酶标记雌三醇抗体与待测样品，样品与固定抗原竞争游离酶标抗体，洗涤后加入过氧化氢，测定电流信号，获得循环伏安法的雌三醇标准曲线，成功提供检测雌三醇的快速传感器方法，检测范围为0.001～100 ng/mL，检测限为0.001 ng/mL。本发明方法具有操作简单、灵敏度高、快速方便等优势，可很好地应用于样品中雌三醇的超灵敏快速检测。

主权项

1.一种使用免疫传感器快速检测雌三醇的方法，其特征在于，是在电极表面电沉积普鲁士蓝‑壳聚糖‑纳米金复合膜，将雌三醇抗原固定在复合膜表面，待封闭未结合位点后，加入雌三醇游离酶标抗体与待测样品，待测样品与固定的雌三醇抗原竞争游离酶标抗体；洗涤后加入过氧化氢，测定电流信号，样品中的游离雌三醇含量与电信号成反比线性关系，经由雌三醇标准曲线，计算检测雌三醇；所述雌三醇抗原是以雌三醇竞争半抗原与载体蛋白偶联得到的产物，所述雌三醇竞争半抗原的结构式如式（Ⅱ）所示：        （Ⅱ）；所述雌三醇游离酶标抗体是将雌三醇单克隆抗体与多聚辣根过氧化物酶通过过碘酸钠法合成；所述雌三醇单克隆抗体是采用雌三醇免疫半抗原偶联蛋白后经免疫制备得到，所述免疫半抗原的结构式如式（Ⅰ）所示：                （Ⅰ）；所述复合膜中，纳米金与普鲁士蓝的摩尔浓度比为1:1000，壳聚糖的质量体积含量为0.02%；所述雌三醇游离酶标抗体的稀释比为1:100；所述过氧化氢的浓度为2.4M。