[发明专利]一种通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法在审
| 申请号： | 201610984478.1 | 申请日： | 2016-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN106520779A | 公开（公告）日： | 2017-03-22 |
| 发明（设计）人： | 廖明;焦培荣;宋慧 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/26 | 分类号： | C12N15/26;C12N15/85;C12N15/66;C07K14/55 |
| 代理公司： | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法，将鸡的IL‑2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化，得到的优化后的基因optiCKIL‑2；将优化基因optiCKIL‑2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL‑2。所述通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法，根据鸡的密码子偏嗜性进行优化后，提高鸡IL‑2的蛋白表达效率，为鸡IL‑2构建DNA疫苗或作为佐剂奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通过 密码子 优化 il 基因 提高 蛋白 表达 效率 方法 | ||
【主权项】：
一种通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法，其特征在于， 将鸡的IL‑2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化，得到的优化后的基因optiCKIL‑2；将优化基因optiCKIL‑2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL‑2。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南农业大学，未经华南农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610984478.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种优化重组人白细胞介素-2的核苷酸序列及高效可溶性表达方法-201610885752.X
- 刘惠;李冠英;钟京谕;张德宝;李海红;毛明川;吉田昌利 - 上海华新生物高技术有限公司
- 2016-10-10 - 2019-04-09 - C12N15/26
- 本发明公开了一种优化重组人白细胞介素‑2的核苷酸序列，所述核苷酸序列为在不改变氨基酸编码序列的情况下按照大肠杆菌偏爱密码子进行优化，所述核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，或其互补核苷酸序列。更进一步地，构建了所述核苷酸序列的表达载体、工程菌，并在工程菌中表达重组人白细胞介素‑2；表达的重组人白细胞介素‑2总菌体蛋白的10％‑30％，可溶性表达量占总表达量的3％‑15％。本发明降低了重组人白细胞介素‑2包涵体的量，提高了可溶性蛋白的表达量，为大量生产可溶性重组人白细胞介素‑2创造了条件。
- 真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2蛋白的基因及方法-201710150095.9
- 王秀利;孙鹤;李慧;孔德荣;刘海映;仇雪梅 - 大连海洋大学
- 2017-03-14 - 2017-07-07 - C12N15/26
- 本发明公开一种可高效表达且表达产物具有明显生物学活性的真核表达制备重组红鳍东方鲀白介素2的基因及制备方法，依次按照如下步骤进行将SEQ ID NO1所示的基因克隆入原核表达载体pPICZαA上，构建真核表达质粒pPICZαA‑IL‑2；将真核表达质粒电转化转化入毕赤酵母GS115感受态细胞中，筛选阳性克隆；将筛选出的阳性克隆接种到BMGY液体培养基内扩大培养至OD600nm=2~6，离心收集菌体；甲醇诱导表达后提取蛋白，即得重组红鳍东方鲀白介素2蛋白。所得重组蛋白经过MTT验证，证明该重组蛋白具有促进CTLL‑2细胞增值的活性。
- 一种通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法-201610984478.1
- 廖明;焦培荣;宋慧 - 华南农业大学
- 2016-11-09 - 2017-03-22 - C12N15/26
- 本发明提供了一种通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法，将鸡的IL‑2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化，得到的优化后的基因optiCKIL‑2；将优化基因optiCKIL‑2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL‑2。所述通过密码子优化鸡IL‑2基因提高鸡的IL‑2蛋白表达效率的方法，根据鸡的密码子偏嗜性进行优化后，提高鸡IL‑2的蛋白表达效率，为鸡IL‑2构建DNA疫苗或作为佐剂奠定基础。
- 制备重组红鳍东方鲀白介素2蛋白的基因及方法-201611061333.0
- 王秀利;孙鹤;李慧;孔德荣;刘海映;仇雪梅 - 大连海洋大学
- 2016-11-28 - 2017-02-22 - C12N15/26
- 本发明公开一种可高效表达且表达产物具有明显生物学活性的制备重组红鳍东方鲀白介素2的基因及制备方法，方法依次按照如下步骤进行：将SEQ ID NO:1所示的基因克隆入原核表达载体pET‑32a上，构建原核表达质粒；将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，筛选阳性克隆，构建重组大肠杆菌BL21(DE3)；用LB作为基础培养基，扩大培养重组大肠杆菌BL21(DE3)；向扩大培养物中加入IPTG诱导剂诱导培养，离心收集菌体；超声破碎所收集菌体，离心后取上清液，即得重组红鳍东方鲀白介素2蛋白粗品。
- 一种人白介素2的制备工艺及其应用-201310196174.5
- 周正;潘婷琪 - 上海华新生物高技术有限公司
- 2013-05-23 - 2014-12-03 - C12N15/26
- 本发明涉及基因工程法制备蛋白领域，具体涉及一种白介素2的制备工艺及其应用。本发明采用基因工程的方法，人工合成表达人IL-2蛋白的重组基因EK-IL2，将该重组基因序列插入载体，转化宿主细胞，通过发酵工艺的设计，分离、酶切、纯化等步骤的组合，最终获得纯化的人IL-2蛋白。获得的人IL-2蛋白活性好，产量高；人IL-2蛋白的制备工艺简单、安全，成本低，利于人IL-2蛋白的工业大规模生产。
- 高效表达的猪白细胞介素-2基因及其表达蛋白的用途-201310119032.9
- 杜以军;齐静;王金宝;吴家强;黄保华;孙文博;丛晓燕;郭立辉;任素芳;陈蕾;李俊;时建立;吕伟 - 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2013-04-08 - 2013-07-10 - C12N15/26
- 本发明涉及基因表达领域，特别涉及高效表达的猪白细胞介素-2基因，核苷酸序列见序列2。序列2的基因克隆至真核表达载体获得的重组质粒。猪白细胞介素-2基因的表达蛋白对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗具有明显的免疫增强作用。含有序列表中序列2的真核质粒pMVAX1©-pIL-2表达pIL-2蛋白基因，突破了通过pVAX1©载体表达pIL-2过程中遇到的表达量较低和活性较差的局限性，表达量提高了5.7倍；猪体试验证明，序列表中序列2基因的表达蛋白pIL-2表达活性很高，能够显著增强高致病性PRRSV灭活疫苗的体液免疫和细胞免疫应答，专用于对高致病性PRRSV引起的疾病的预防及减少猪场的经济损失。
- 一种白细胞介素-2基因工程人胃癌细胞瘤苗制备工艺-200810036024.7
- 陈诗书;钱关祥 - 上海交通大学医学院;上海新生源医药研究有限公司
- 2008-04-14 - 2009-10-21 - C12N15/26
- 本发明提供了一种灭活的白细胞介素-2基因工程人胃癌细胞瘤苗的制备工艺。用基因工程技术，以逆转录病毒载体介导，将人白细胞介素-2(IL-2)cDNA转导入人胃癌细胞株MKN-45，经60Co照射灭活后制成，简称HG-1/IL-2。能分泌具有生物活性的IL-2，具有增强机体抗肿瘤免疫反应能力，供临床原发性胃癌患者使用。
- 改进的白介素-2突变蛋白-200580014421.9
- K·德尼斯-米泽;C·海斯;D·门尼泽斯;S·E·威尔森 - 诺华疫苗和诊断公司
- 2005-03-04 - 2009-05-06 - C12N15/26
- 本发明提供了新型人白介素-2(IL-2)突变蛋白或其变体、其核酸分子和变体。也公开了制备这些突变蛋白的方法和刺激动物免疫系统的方法。此外，本发明提供含有本发明核酸分子的重组表达载体和已导入了该表达载体的宿主细胞。包括含有治疗有效量的本发明人IL-2突变蛋白和药学上可接受运载体的药物组合物。与天然的IL-2或ProleukinIL-2相比，该IL-2突变蛋白制品毒性较低，同时保持或提高了NK细胞介导的作用，可用于制备治疗癌症和刺激免疫系统的药物组合物。
- 专利分类
