[发明专利]胚胎多肽粉末的制备方法在审
申请号: | 201910219329.X | 申请日: | 2019-03-21 |
公开(公告)号: | CN109943523A | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 林耕宇 | 申请(专利权)人: | 林耕宇 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 201702 上海市青浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提出了一种胚胎多肽粉末的制备方法,包括(1)选取第3‑5代胚胎干细胞,当细胞汇合度达60%‑80%,加入含有体积分数为10%预处理胎牛血清的DMEM/F12培养基培养48‑72h,收集细胞上清,超速离心得到外泌体;(2)将上述外泌体以2500‑3000转/分的离心速度离心40‑60min,取上清液,得生物活性多肽提取液,得到的生物活性多肽提取液用0.6um的滤膜抽滤,再用截留分子量为6kD的超滤膜超滤,室温搅拌2‑3h后过滤,除去活性炭,再经真空浓缩、喷雾干燥,得到胚胎多肽粉末。本发明选用第3‑5代胚胎干细胞的外泌体制备多肽粉末,更利于人体吸收。 | ||
搜索关键词: | 多肽粉末 生物活性多肽 胚胎 胚胎干细胞 提取液 制备 预处理 超滤膜超滤 截留分子量 活性炭 超速离心 喷雾干燥 取上清液 人体吸收 室温搅拌 胎牛血清 体积分数 细胞汇合 真空浓缩 抽滤 滤膜 过滤 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种胚胎多肽粉末的制备方法,其特征在于,包括:(1)选取第3‑5代胚胎干细胞,当细胞汇合度达60%‑80%,加入含有体积分数为10%预处理胎牛血清的DMEM/F12培养基培养48‑72h,收集细胞上清,超速离心得到外泌体;(2)将上述外泌体以2500‑3000转/分的离心速度离心40‑60min,取上清液,得生物活性多肽提取液,得到的生物活性多肽提取液用0.6um的滤膜抽滤,再用截留分子量为6kD的超滤膜超滤,室温搅拌2‑3h后过滤,除去活性炭,再经真空浓缩、喷雾干燥,得到胚胎多肽粉末。
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