[发明专利]一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-A117C及构建方法有效
| 申请号： | 201910551569.X | 申请日： | 2019-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN110283834B | 公开（公告）日： | 2021-07-06 |
| 发明（设计）人： | 程安春;文兴建;汪铭书 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/41 | 分类号： | C12N15/41;C12N7/01;A61K39/125;A61P31/14;A61P1/16 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 张鹏 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C及构建方法，该突变基因基因组的第3403位核苷酸的G突变为T，作为感染性克隆的遗传标记，可用来区分拯救株与亲本株以及野毒株；5'UTR的第117核苷酸由A突变为C。该突变基因病毒株与亲本株具有相同的抗原性，而在鸭胚上比亲本株具有更高的增殖效率和病毒滴度且能够在鸡胚上增殖，免疫原性和遗传稳定性良好。突变基因病毒株对雏鸭致病力已明显下降，能够在雏鸭体内复制但对雏鸭不致病，这为该病毒致病机制及疫苗研制奠定了重要基础。综上所述，3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C病毒株可作为一株疫苗候选或培育毒株并可用于3型鸭甲肝病毒宿主嗜性与致弱机理研究，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 甲肝 病毒 突变 基因 isa a117c 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C，其特征在于，所述的突变基因ISA‑A117C以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组5'UTR的第117位核苷酸由A突变为C。
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- 2020-05-15 - 2020-09-22 - C12N15/41
- 本发明属于生物技术领域，通过实验研究首次发现，SVA 3C基因编码的蛋白能够作为病毒复制增强剂，显著促进包括弱毒疫苗株、灭活疫苗病毒株在内的猪源病毒的复制。这很好的解决了目前在生产和实践中遇到的病毒产量低、疫苗免疫原性低的问题。本发明不仅为揭示病毒混合感染机制提供新方向，还可将SVA 3C蛋白应用于提高生产实践中病毒的产量，更有助于优化相关基因工程活疫苗以及活病毒疫苗载体的构建策略，提高载体疫苗免疫活性。
- 表达人肠道病毒71型衣壳蛋白的重组腺病毒、由其制备的疫苗和应用-201510391127.5
- 于力;杨德成;梁争论;毛群颖 - 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;中国食品药品检定研究院
- 2015-07-06 - 2020-08-14 - C12N15/41
- 本发明公开了表达人肠道病毒71型衣壳蛋白的重组腺病毒、由其制备的疫苗和应用。本发明分别以融合有碱性蛋白酶裂解位点的口蹄疫病毒2A基因、口蹄疫病毒IRES元件为Linker构建得到两组含有EV71病毒衣壳蛋白P1基因和3CD基因的EV71亚基因组；本发明进一步将所述亚基因组重组至腺病毒表达载体中，经筛选分别获得一株复制能力好、遗传稳定且蛋白表达量高的重组腺病毒，其在感染的细胞中能够高效表达P1和3CD蛋白，同时3CD能够对P1进行正确切割；在小鼠体内能诱导高水平的EV71特异性广谱中和抗体，其诱导抗EV71特异性细胞免疫应答的能力显著优于灭活全病毒抗原，可应用于防治由EV71引起的人手足口病。
- 一种表达荧光素酶的重组A型塞尼卡病毒-202010077897.3
- 刘拂晓;王迁迁;黄漪岚;单虎 - 青岛农业大学
- 2020-02-01 - 2020-05-08 - C12N15/41
- 本发明提供了一种拯救表达荧光素酶(NLuc)的重组A型塞尼卡病毒(rSVA‑NLuc)的方法。本发明首先提供了一种用于rSVA‑NLuc拯救的cDNA clone，其5′端和3′端分别包含T7 RNA聚合酶和Not I酶切位点序列，2A和2B序列之间插入NLuc和T2A的融合序列NLuc‑T2A。所述的rSVA‑NLuc cDNA clone经Not I线性化后可直接转染BSR‑T7/5细胞，以拯救rSVA‑NLuc。rSVA‑NLuc经鉴定后进行病毒特性分析，包括间接免疫荧光、噬斑形态、生长动力曲线及外源蛋白表达等。
- 一种基于密码子同义突变的基因序列改造方法及其在疫苗制备中的应用-201910491828.4
- 安子琛 - 安子琛
- 2019-06-06 - 2019-10-08 - C12N15/41
- 本发明公开了一种基于密码子同义突变的基因序列改造方法及其在疫苗制备中的应用。该方法通过对序列中同义密码子进行碱基突变，改造成TTA、TTG、TCA或TCG。这样在基因复制过程中，仅需变异一个碱基就可以形成终止密码子(TAA、TGA、TAG)，由基因变异而引起肽链合成终止的概率也会大大增加，从而可以大大提高物种或病毒的遗传稳定性。在病毒的减毒活疫苗的使用过程中，安全性是最主要的问题，减毒活疫苗毒力返强的风险是一直存在的。在减毒活疫苗的设计中，对病毒基因的密码子进行同义突变改造，可以提高疫苗毒序列的保真性，减少疫苗毒在体内毒力返强的几率，从而提高减毒活疫苗的安全性。
- 塞尼卡谷病毒SVV/CH/NM/2016的全基因组序列及其扩增引物-201810030599.1
- 陈君彦;王秀明;魏学峰;刘国英;关平原;陈九连;范秀丽;张燕红;王云凌;张贵刚;王艳杰;张宸;刘建奇;武瑾贤;谢雪岑;杜宇荣 - 金宇保灵生物药品有限公司
- 2018-01-12 - 2019-09-20 - C12N15/41
- 本发明公开了塞尼卡谷病毒SVV/CH/NM/2016的全基因组序列及其扩增引物。本发明先用一步RT‑PCR方法扩增出SVV/CH/NM/2016株的7个核苷酸序列片段(S1、S2、S3、S4、S5、S6和S7)，然后对7个核苷酸序列片段进行克隆测序，再将7个核苷酸序列片段的DNA序列依次进行拼接、编辑及校正，最终得到塞尼卡谷病毒SVV/CH/NM/2016的全基因组序列。本发明获得的塞尼卡谷病毒SVV/CH/NM/2016全基因组序列有利于塞尼卡谷病毒致病机制、分子流行病学、反向遗传学等的进一步研究，从而对塞尼卡谷病毒的诊断试剂开发、疫苗研制等奠定重要的数据支持和理论基础。
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