[发明专利]一种结核分枝杆菌单克隆抗体制备方法在审
| 申请号： | 201910717434.6 | 申请日： | 2019-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN110343176A | 公开（公告）日： | 2019-10-18 |
| 发明（设计）人： | 张静霞 | 申请（专利权）人： | 莆田学院 |
| 主分类号： | C07K16/12 | 分类号： | C07K16/12 |
| 代理公司： | 北京权智天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11638 | 代理人： | 王新爱 |
| 地址： | 351100 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种结核分枝杆菌单克隆抗体制备方法，涉及医学技术领域，包括以下步骤：A：准备小鼠：取8‑10周龄Balb/c雌性小鼠4只、B：抗原处理、C：免疫：皮下注射小鼠、D：取出细胞：通过无菌操作取出小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞、E：细胞融合、F：筛选：对杂交瘤细胞进行检测，筛选出抗体阳性杂交瘤细胞、G：冻存复苏、H：制取单抗。本发明单克隆抗体分泌的抗体为只针对人型菌株，与牛型结核分枝杆菌均不发生反应，从而保证了单抗体能够专门针对人型血清型疾病，本发明制备单克隆抗体特异性高、灵敏度高，帮助医生进行心脏疾病的诊断，增强了检验的特异性，增强了检验结果的准确性，提高了检测速度。 | ||
| 搜索关键词： | 单克隆抗体 结核分枝杆菌 制备 杂交瘤细胞 抗体 小鼠 取出 小鼠脾脏细胞 医学技术领域 筛选 骨髓瘤细胞 雌性小鼠 检验结果 抗体阳性 皮下注射 无菌操作 细胞融合 心脏疾病 灵敏度 血清型 检测 抗原 单抗 冻存 菌株 制取 分泌 复苏 细胞 诊断 疾病 医生 检验 帮助 保证 | ||
【主权项】：
1.一种结核分枝杆菌单克隆抗体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A：准备小鼠：取8‑10周龄Balb/c雌性小鼠4只，免疫前观察一周；B：抗原处理：取结核分枝杆菌菌液作为抗原，将结核分枝杆菌菌液与弗氏完全佐剂乳化；C：免疫：将B中的材料皮下注射小鼠，进行免疫；D：取出细胞：将小鼠放入二氧化碳气体密封室内处死小鼠，通过无菌操作取出小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞，在平皿内挤压研磨，再用离心机离心，弃掉上清，制备细胞悬液；E：细胞融合：将细胞悬液内加入促融合剂聚乙二醇，在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞；F：筛选：对杂交瘤细胞进行检测，筛选出抗体阳性杂交瘤细胞；G：冻存复苏：对阳性杂交瘤细胞进行克隆，将杂交瘤细胞进行冻存和复苏；H：制取单抗：取Balb/c雌性小鼠，首先腹腔注射0.5‑0.9ml液体石蜡，1‑3周后，腹腔内接种杂交瘤细胞，杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体，两周后，小鼠腹部膨大，用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。
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- 本发明提供一种抗破伤风毒素的中和抗体及应用。本发明提供的抗破伤风毒素的中和抗体能够特异性结合破伤风毒素，因而具有极强的中和活性和很高的亲和活性，且用量低。本发明提供的抗破伤风毒素的中和抗体能够用于预防和治疗破伤风毒素感染以及破伤风梭菌介导的疾病或疾病状况的分离的抗体，同时还能够用于诊断和/或监测破伤风毒素感染以及破伤风梭菌感染的分离的抗体。此外，本发明提供的抗破伤风毒素的中和抗体无外源病毒污染，可广泛适用于各种人群。
- 针对艰难梭菌的抗体-201811406032.6
- R·卡桑;D·约翰斯通;L·萨沃德;J·A·乔治;J·贝里 - CNJ控股公司
- 2013-11-29 - 2019-05-21 - C07K16/12
- 提供了用于在受试者中治疗或预防艰难梭菌感染的组合物和方法。所述组合物包含针对艰难梭菌毒素B的抗体。所述方法提供以有效地减少或消除或预防艰难梭菌细菌感染的复发的量向受试者施用抗体。
- 一种抗内氏放线菌卵黄抗体及其制备方法-201510882988.3
- 刘英杰;李瀚源;陈娟;刘云 - 河南大学
- 2015-12-07 - 2019-05-21 - C07K16/12
- 本发明属于生物制品制备技术领域，具体涉及一种抗内氏放线菌卵黄抗体及其制备方法。抗内氏放线菌卵黄抗体的制备过程，具体包括：制备灭活的内氏放线菌作为抗原、免疫接种蛋鸡、分离纯化卵黄抗体等步骤。经过实际检验，本发明所制备的抗内氏放线菌卵黄抗体能显著抑制内氏放线菌的生长，并能有效清除内氏放线菌单菌生物膜的形成，并对其生物膜产酸有明显抑制作用，制备的抗内氏放线菌卵黄抗体对黏性放线菌具有一定的交叉免疫性。本发明具有容易制备、成本低廉等优点，将其添加到漱口液、牙膏、含片、奶制品、糕点、饮料、保健品等日常洗护用品或食品饮料时，对于内氏放线菌所引起的龋齿、牙龈炎、牙周炎的预防和治疗具有较好地应用效果。
- 一种兔肺炎型金黄色葡萄球菌卵黄抗体的制备方法-201910173878.8
- 王锦祥;谢喜平;桑雷;孙世坤;陈冬金;陈岩锋 - 福建省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2019-03-08 - 2019-04-26 - C07K16/12
- 本发明公开了一种兔肺炎型金黄色葡萄球菌卵黄抗体的制备方法，属于生物技术领域。本发明的方法包括以下步骤：（1）免疫用兔肺炎型金黄色葡萄球菌组织灭活疫苗的制备；（2）蛋鸡免疫；（3）高效价卵黄抗体的提纯。本发明制备的兔肺炎型金黄色葡萄球菌卵黄抗体对兔肺炎型金黄色葡萄球菌的感染具有良好的预防效果。同时，所述的方法操作简便，制备的卵黄抗体效价高、成本低、易于批量生产，具有很好的应用前景。
- 一种巴氏杆菌蛋白的多克隆抗体及单克隆抗体的制备-201910152350.2
- 王凤阳;黄海峰;杜丽 - 海南大学
- 2019-02-28 - 2019-04-23 - C07K16/12
- 本发明公开了一种巴氏杆菌蛋白的多克隆抗体及单克隆抗体的制备，采用BCA蛋白浓度方法构建标准蛋白浓度的标准曲线，通过标准曲线计算待测toxA‑N纯化蛋白的浓度，制备抗原，再进行多杀性巴氏杆菌毒素toxA‑N蛋白多克隆抗体和单克隆抗体的制备。通过生物技术方法将纯化后的toxA‑N蛋白制备成抗原，通过对大白兔的皮下注射及昆明鼠的腹腔注射，刺激机体发生免疫应答，产生对应宿主的抗体。将制备多克隆抗体进行倍比稀释，在1:6400时P/N仍然>2，而单克隆抗体因其特异性高，稀释至1:64000时P/N依旧>2.5，完全符合制备抗体的要求。
- 一种免疫抗体及其制备方法-201910036677.3
- 吴勇刚 - 深圳康体生命细胞技术有限公司
- 2019-01-15 - 2019-04-16 - C07K16/12
- 本发明涉及免疫抗体技术领域，且公开了一种免疫抗体及其制备方法，通过从兔子体内抽取样本血液进行多次免疫所产生的抗体，具体步骤：步骤一：动物的选择，步骤二：抗原的选择，步骤三：佐剂和抗原乳剂的制备，步骤四：免疫，步骤五：抗血清的制备。该免疫抗体及其制备方法，通过对兔子进行三个阶段的免疫，能够制备出高纯度的免疫抗体，特异性强、效价高和亲和力强，通过规范的从兔子的体内取样品血，使得取出的免疫抗体不受到细菌污染，提高了免疫抗体的纯度。
- 专利分类
- 诊断分枝杆菌感染的方法及用于该方法的试剂
- 使用双重聚合酶链式反应对结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌进行检测的方法
- 使用双重实时聚合酶链式反应和解链曲线分析对结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌进行检测的方法
- 通过使用双重实时聚合酶链式反应对结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌进行检测的方法
- 结核分枝杆菌Rv3833基因在制备治疗结核分枝杆菌潜伏感染药物中的用途
- 鉴别结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌感染的检测方法
- 新型小分子化合物、制备方法及在制备抗耐药结核分枝杆菌等分枝杆菌药物方面的用途
- 一种耐药结核分枝杆菌库构建方法
- 用于结核分枝杆菌复合群的CRISPR检测引物组及其用途
- 一种用于快速检测结核分枝杆菌药敏性的试剂盒及方法
