[发明专利]检测Zika病毒NS1抗原的试纸条和试剂盒及方法

说明书

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测Zika病毒NS1抗原的试纸条和试剂盒及方法。所述试纸条包括垫板，所述垫板上设置有第一吸水垫、检测层和第二吸水垫，所述第一吸水垫、检测层和第二吸水垫顺次搭接，且所述第一吸水垫和所述检测层之间的搭接处设置有AIE标记层析垫，所述检测层上设置有检测区和质控区；其中，所述AIE标记层析垫含有AIE材料标记的第一抗Zika病毒NS1单克隆抗体，所述检测区含有第二抗Zika病毒NS1单克隆抗体。该试纸条可简便快速、结果直观地检测NS1抗原，而且具有敏感性高、特异性强、稳定性好、重复性好、无需专门设备、不受环境条件的干扰、易于在广大群众中推广等优点。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测Zika病毒NS1抗原的试纸条和试剂盒及方法。

背景技术

寨卡病毒(Zika Virus，ZIKV)是属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)的一类蚊媒传染性病毒，为不分片段的单股正链RNA病毒。病毒颗粒直径约40-60nm，呈球状。病毒基因组全长为10749个核苷酸，含2个非编码区和1条单一的开放读码框架，编码3个非结构蛋白(C、prM、E)以及7个非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5)，其中分泌型NS1蛋白作为黄病毒感染早期检测的生物学标志物而具备极大的诊断性价值。对Zika病毒开放读码框架的分子生物学分析表明，寨卡病毒主要存在2个亚型：非洲型和亚洲型。

Zika病毒最初是1947年科学家于乌干达寨卡森林黄热病研究检测网络中的恒河猴(动物编号766)体内发现，并以其血清接种于小鼠颅内而得以分离。1952年，乌干达和坦桑尼亚联合共和国确认了首例人源性Zika病毒感染报道，截止2007年前，据文献记录全球范围内仅见14例人类感染Zika病例，集中在非洲和亚洲国家。2007年，位于太平洋西部的密克罗尼西亚联邦地区(Federated States of Micronesia)的雅浦岛(Yap Island)上发生了Zika病毒的暴发流行，波及该岛上将近3/4的人口，此次暴发流行首次标志着Zika病毒在亚非大陆以外地区的传播。自2013年始，国家输入性传播病例时有报道。鉴于我国和美洲地区有持续的经贸和旅游等往来，目前我国已检出输入性病例12例(包括深圳4例)，其中南方省份为我国出现寨卡病毒传播的高风险省份。综上所述，Zika病毒感染及其引起的寨卡病毒病业已成为我国乃至国际上一项亟需引起重视的公共卫生问题。

寨卡病毒病，也称寨卡热(Zika Fever)，主要是感染了Zika病毒的伊蚊类(其中埃及伊蚊为主要者)等蚊媒通过叮咬传播所致。有关孕母感染与新生儿出生缺陷(如小头畸形)间关联的研究发现愈加引起卫生部门对母婴传播的重视。此外，不安全性行为、血液传播等途径尚待进一步证实。感染了Zika病毒的灵长类动物(含患者、隐性感染者)为可能传染源，而人群对该病毒普遍易感。Zika病毒的潜伏期尚不明确，有文献指出多在3-10天，且大多感染者呈隐性感染。出现症状的寨卡病毒病患者大多病情轻微，表现为皮疹、发热、头痛、关节痛、肌痛等，多无出血倾向，病死率相较登革热、基孔肯雅热低。但少数病例可出现中枢神经系统并发症，如格林-巴利综合征(Guillain-Barré syndrome，GBS)。寨卡病毒病暂无疫苗、相应抗病毒药物治疗，现以防治蚊虫叮咬、对症治疗处理措施为主。由于寨卡病毒病初期症状与登革热、基孔肯雅热等相似，因此有效的诊断措施对该病的早期处理意义重大。

世卫组织于2016年3月发布的临时指导文件中建议，对有暴露风险的疑似病例，据发病时间长短而采取核酸检测和(或)血清学检测策略，其中血清学检测方法包括酶免疫分析法(EIAs)和免疫荧光检测法(IFA)以检测IgM抗体。而我国卫生部于2016年发布的第1版《寨卡病毒病诊疗指南》中则建议以ELISA、免疫荧光法、空斑减少中和试验(PRNT)、荧光定量RT-PCR、免疫组化、病毒分离培养等方法行实验室检测。然而，此上检测方法均存在费时、高昂、检测流程复杂、需配备专业试验人员器材等限制，无法满足大人群初筛时快速、简便等需求要点。因此，建立一种即时、可靠的实验室诊断Zika感染的早期检测试剂势在必行。