[发明专利]貉细小病毒株及其应用、貉细小病毒灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种貉细小病毒株，其特征在于，为貉细小病毒RDPV-HeB17毒株，保藏编号为：CGMCCNO.15483。

2.权利要求1所述的貉细小病毒株在制备貉细小病毒灭活疫苗中的应用。

3.一种貉细小病毒灭活疫苗,其特征在于，所述疫苗含有灭活后的貉细小病毒RDPV-HeB17毒株；所述貉细小病毒RDPV-HeB17毒株的保藏编号为CGMCC NO.15483。

4.一种权利要求3所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:

1)F81细胞按正常传代后，接种RDPV-HeB17毒株，培养72-96h收获细胞培养液，冻融即成病毒液；

2)将病毒液经二乙烯亚胺BEI灭活后，加入氢氧化铝胶制成貉细小病毒灭活疫苗。

5.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1)所述F81细胞培养于MEM培养基中，在37℃条件下培养3天后进行传代培养。

6.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1)所述RDPV-HeB17毒株是按照MOI为0.1～0.3的比例接种至F81细胞上，然后在37℃条件下培养。

7.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1)所述病毒液病毒含量≥10^6.0TCID₅₀/ml。

8.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤2)所述二乙烯亚胺在病毒液中的终浓度为0.003mol/L。

9.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤2)所述的灭活，灭活温度为35℃，时间为24h。

10.根据权利要求4所述的貉细小病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤2)所述氢氧化铝在貉细小病毒灭活疫苗中的终浓度为5％，所述浓度为质量分数。