[发明专利]一种制备子宫内膜干细胞的培养基以及制备方法在审
申请号: | 201811610790.X | 申请日: | 2018-12-27 |
公开(公告)号: | CN109456937A | 公开(公告)日: | 2019-03-12 |
发明(设计)人: | 葛啸虎;陈海佳;张梦晨;王小燕;姜交华 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/074 | 分类号: | C12N5/074 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 刘猛;赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市开发区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 子宫内膜 干细胞 制备 存活率 培养基 硫酸庆大霉素 无血清培养基 组织培养技术 血清替代物 丙酮酸钠 发展应用 谷氨酰胺 胶原酶I 链霉素 消化 配合 | ||
1.一种制备子宫内膜干细胞的培养基,其特征在于,以无血清培养基为基础,含有Pall血清替代物、青/链霉素、硫酸庆大霉素、谷氨酰胺、MEM NEAA、EGF、丙酮酸钠、bEGF和VEGF。
2.根据权利要求1所述培养基,其特征在于,以无血清培养基为基础,含有1%-3%(w/v)Pall血清替代物、0.8%-1.2%(w/v)青/链霉素、0.8%-1.2%(w/v)硫酸庆大霉素、1mM-3mM谷氨酰胺、1mM-3mM MEM NEAA、0.8mM-1.2mM丙酮酸钠、0.5μg/ml-1.5μg/ml EGF、0.8μg/ml-1.2μg/ml bEGF和0.8μg/ml-1.2μg/ml VEGF。
3.根据权利要求2所述培养基,其特征在于,以无血清培养基为基础,含有2%(w/v)Pall血清替代物、1%(w/v)青/链霉素、1%(w/v)硫酸庆大霉素、2mM谷氨酰胺、2mM MEMNEAA、1μg/ml EGF、1mM丙酮酸钠、1μg/ml bEGF和1μg/mlVEGF。
4.根据权利要求1-3任意一项所述培养基,其特征在于,所述无血清培养基为Lonza无血清培养基。
5.权利要求1-4任意一项所述培养基在制备子宫内膜干细胞和/或制备子宫内膜干细胞的试剂产品中的应用。
6.一种制备子宫内膜干细胞的试剂产品,其特征在于,包括权利要求1-4任意一项所述培养基。
7.根据权利要求6所述试剂产品,其特征在于,还包括胶原酶I和Dispase II。
8.一种制备子宫内膜干细胞的方法,其特征在于,清洗子宫内膜组织,酶解消化后过滤,采用权利要求1-4任意一项所述培养基培养,获得所述子宫内膜干细胞。
9.根据权利要求8所述方法,其特征在于,所述酶解消化为采用含4mg/ml胶原酶I和2mg/ml Dispase II的高糖DMEM基础培养基在37℃消化30-90min。
10.根据权利要求8所述方法,其特征在于,所述培养为在37℃、5%CO2环境下培养。
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