[发明专利]一种呋虫胺半抗原、胶体金标记呋虫胺单克隆抗体以及呋虫胺胶体金检测装置

说明书

本发明属于生物检测的技术领域，具体涉及一种呋虫胺半抗原以及呋虫胺胶体金检测装置及其制备方法。所述呋虫胺半抗原可应用于免疫层析方面的检测，为呋虫胺的快速检测提供了基础；所述呋虫胺胶体金检测装置，应用胶体金免疫层析原理，胶体金试纸中检测线与质控线线比色来半定量检测样品中的呋虫胺残留量，在短时间内快速准确地检测出样品是否含有呋虫胺，能够满足监管部门、检测机构对呋虫胺的现场快速检测需求，与现有技术相比，具有使用方便、经济快捷、制作容易、成本低廉的特点。

技术领域

本发明属于生物检测的技术领域，具体涉及一种呋虫胺半抗原、胶体金标记呋虫胺单克隆抗体以及呋虫胺胶体金检测装置。

背景技术

呋虫胺(dinoterfuran)是一种新型烟碱类杀虫成分，具有高效、光谱、良好的根部内吸性等的特点，在水稻、小麦、蔬菜、果树、茶叶、棉花、烟草等作物上大量使用，主要用于防止害虫如蚜虫、烟粉虱、蓟马、叶蝉、斑潜蝇、叶蜂、蝼蛄、网蝽、谷象、甲虫、水蜡虫、蟑螂等，主要作用于昆虫神经系统，通过与乙酰胆碱受体结合使昆虫异常兴奋，最后全身痉挛、麻痹致死。

中国、美国、日本等多个国家对农产品中呋虫胺残留做了严格的限量规定，因此，提供一种快速检测呋虫胺残留的方法对保障食品安全、确保我国农产品顺利出口具有重要的意义。而目前，国内外呋虫胺的检测方法主要有气相色谱-质谱联用(GC-MS)、液相色谱-质谱联用(LC-MS)等，虽然能够得到较为准确的检测结果，但是上述方法所用的仪器设备操作复杂、成本较高、对操作人员的技术要求较高，且不能够立即显示结果，不适用于基层管理部门对怀疑对象进行快速的检测和监控。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种呋虫胺半抗原、胶体金标记呋虫胺单克隆抗体以及呋虫胺胶体金检测装置。

本发明的技术内容如下：

本发明提供了一种呋虫胺半抗原，所述呋虫胺半抗原的结构如下所示：

所述呋虫胺半抗原的制备方法包括如下步骤：

1)将邻苯二甲酰亚胺在混合溶剂中反应，得到中间体1，所述混合溶剂中包括氢氧化钾和乙醇；

2)将中间体1溶于有机溶剂中，加入6-溴-1-己烯以及加入催化剂碘化钾反应，将得到的反应产物调节至中性并萃取、合并有机相、纯化得到中间体2；

3)将中间体2置于混合溶剂体系中反应，将反应产物洗涤、酸化、过滤得到中间体3，所述混合溶剂中包括乙醇、水合肼和盐酸；

4)将中间体3溶解后，加入硝基胍反应，将反应产物调节至中性并萃取、合并有机相、纯化得到中间体4；

5)将中间体4与甲胺、甲醛反应，将得到的反应产物调节至中性并萃取、合并有机相、纯化得到中间体5；

6)将3-四氢呋喃甲醇与甲基磺酰氯反应得到中间体6，将中间体5与中间体6反应，将反应产物调节至弱酸性并萃取、合并有机相、纯化得到中间体7；

7)将中间体7置于混合溶剂体系中继续反应，所述混合溶剂包括乙腈、水、高碘酸钠、三氯化钌以及四氯化碳，反应结束后除去溶剂、溶解过滤、纯化即得到最终产物呋虫胺半抗原。

本发明提供了一种胶体金标记呋虫胺单克隆抗体，所述胶体金标记呋虫胺单克隆抗体为胶体金与呋虫胺单克隆抗体偶联制得；

所述呋虫胺单克隆抗体由呋虫胺抗原通过动物免疫制得；

所述呋虫胺抗原由呋虫胺半抗原与载体蛋白偶联制得，所述载体蛋白包括牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)以及血蓝蛋白(KLH)的一种或以上。