[发明专利]从富硒植物中提取硒代氨基酸的方法在审
申请号: | 202111671232.6 | 申请日: | 2021-12-31 |
公开(公告)号: | CN116411036A | 公开(公告)日: | 2023-07-11 |
发明(设计)人: | 王发松;向家桂 | 申请(专利权)人: | 恩施市鸿汲康润生物医药科技有限责任公司 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04;C12P13/12;C07C391/00 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 刘伊南 |
地址: | 445000 湖北省恩施土家族苗族*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 提取 氨基酸 方法 | ||
1.一种从富硒植物中提取硒代氨基酸的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(a)采用蛋白酶处理富硒植物;
(b)用大孔吸附树脂、离子交换树脂依次处理蛋白酶处理后的产物,得到硒代氨基酸粗品;
(c)任选地,将硒代氨基酸粗品进行色谱分离。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(a)中,采用不同的蛋白酶处理富硒植物,且采用不同的蛋白酶处理富硒植物的方式为:
(S1)在pH为3.0-3.5、温度为48-52℃的条件下,将酸性蛋白酶与所述富硒植物接触,进行第一酶解,得到第一酶解产物;
(S2)在pH为6.8-7.2、温度为43-46℃的条件下,将中性蛋白酶与所述第一酶解产物接触,进行第二酶解,得到第二酶解产物;
(S3)在pH为9.5-10.5、温度为42-45℃的条件下,将碱性蛋白酶与所述第二酶解产物接触,进行第三酶解,得到第三酶解产物;
和/或,前一蛋白酶处理的产物直接全部进行下一步的蛋白酶处理操作。
3.根据权利2所述的方法,其中,所述第一酶解的条件还包括:温度为30-70℃,时间为24-48h;
和/或,相对于每千克以干重计的富硒植物,所述酸性蛋白酶的用量为40万-200万U;
和/或,所述第二酶解的条件还包括:温度为30-55℃,时间为24-48h;
和/或,相对于每千克以干重计的富硒植物,所述中性蛋白酶的用量为90万-300万U;
和/或,所述第三酶解的条件还包括:温度为30-60℃,时间为24-48h;
和/或,相对于每千克以干重计的富硒植物,所述碱性蛋白酶的用量为400万-2000万U;
和/或,所述第一酶解、第二酶解和第三酶解在溶剂的存在下进行,所述溶剂优选为水;
优选地,相对于每千克以干重计的富硒植物,所述第一酶解、第二酶解和第三酶解过程中溶剂的用量各自独立地为15-50kg。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其中,所述酸性蛋白酶选自由第一微生物产生的酸性蛋白酶和/或动物产生的胃蛋白酶;
优选地,所述第一微生物选自黑曲霉、米曲霉、根霉、青霉、毛霉和芽孢杆菌中的至少一种;
和/或,所述中性蛋白酶选自由第二微生物产生的中性蛋白酶和/或植物产生的木瓜蛋白酶;
优选地,所述第二微生物选自芽孢杆菌、米曲霉、毛霉、栗疫霉和栖木曲霉中的至少一种;
和/或,所述碱性蛋白酶选自由第三微生物产生的碱性蛋白酶和/或动物产生的胰蛋白酶;
优选地,所述第三微生物选自地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜碱性芽孢杆菌、灰色链霉菌、费氏链霉菌、米曲霉、栖木曲霉和冠状耳霉中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(b)中包括按照以下方式处理蛋白酶处理后的产物的步骤:
(1)采用大孔吸附树脂将蛋白酶处理后的产物进行脱色;
(2)采用所述阴离子交换树脂处理脱色后的产物,得到交换饱和后的阴离子交换树脂,并用酸性溶液对交换饱和后的阴离子交换树脂进行第一梯度洗脱,得到第一洗脱液;
(3)采用所述阳离子交换树脂处理所述第一洗脱液,并用碱性溶液对交换饱和后的阳离子交换树脂进行第二梯度洗脱,得到第二洗脱液;
(4)对所述第二洗脱液进行色谱分离。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,步骤(2)中,所述阴离子交换树脂为强碱性阴离子交换树脂;所述强碱性阴离子交换树脂选自大孔型和/或凝胶型离子交换树脂,优选大孔型离子交换树脂;
和/或,所述阳离子交换树脂为强酸性阳离子交换树脂;所述强酸性阳离子交换树脂选自大孔型和/或凝胶型离子交换树脂,优选大孔型离子交换树脂。
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