[发明专利]胰岛素抵抗模型在审
申请号: | 202180061466.0 | 申请日: | 2021-06-22 |
公开(公告)号: | CN116234923A | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 武部贵则;木村昌树 | 申请(专利权)人: | 儿童医院医学中心 |
主分类号: | C12Q1/00 | 分类号: | C12Q1/00 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平 |
地址: | 美国俄*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胰岛素 抵抗 模型 | ||
1.一种肝脏类器官,包括胰岛素抵抗报告物,其中胰岛素抵抗报告物与肝脏类器官的胰岛素依赖性基因可操作地连接。
2.根据权利要求1所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素依赖性基因是糖异生基因或脂肪生成基因。
3.根据权利要求1或2所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素依赖性基因选自由PCK1、G6PC、G6PC2、G6PC3、GSK3A、GSK3B、MTOR、GCK、FOXO1、CREB1、TFE1、TFE3、SREBP1C、FASN、ACLY和ACC组成的组。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素依赖性基因为PCK1。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素依赖性基因的表达导致所述胰岛素抵抗报告物的表达。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素依赖性基因和所述胰岛素抵抗报告物被双顺反子元件分开。
7.根据权利要求6所述的肝脏类器官,其中所述双顺反子元件是自切割肽或IRES。
8.根据权利要求7所述的肝脏类器官,其中所述自切割肽是P2A、T2A、E2A或F2A自切割肽。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素抵抗报告物已经使用CRISPR核酸酶整合到所述胰岛素依赖性基因的基因座。
10.根据权利要求9所述的肝脏类器官,其中所述CRISPR核酸酶是Cas9。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素抵抗报告物包括一个或多个报告基因。
12.根据权利要求11所述的肝脏类器官,其中所述一种或多种报告基因包括编码荧光蛋白的基因或编码发光蛋白的基因,或两者都有。
13.根据权利要求12所述的肝脏类器官,其中所述荧光蛋白包括mScarlet或所述发光蛋白包括荧光素酶。
14.根据权利要求11-13中任一项所述的肝脏类器官,其中所述一种或多种报告基因还包括抵抗标记。
15.根据权利要求1-14所述的肝脏类器官,其中所述胰岛素抵抗报告物包括两个或更多个报告基因,并且所述两个或更多个报告基因被一个或多个双顺反子元件分开。
16.根据权利要求15所述的肝脏类器官,其中所述一种或多种双顺反子元件包括一种或多种自切割肽或IRES。
17.根据权利要求16所述的肝脏类器官,其中所述一种或多种自切割肽包括P2A、T2A、E2A或F2A自切割肽。
18.根据权利要求1-17中任一项所述的肝脏类器官,其中所述肝脏类器官为脂肪肝脏类器官或脂肪性肝炎肝脏类器官。
19.根据权利要求18所述的肝脏类器官,其中与正常肝脏类器官相比,所述脂肪肝脏类器官或脂肪性肝炎肝脏类器官包括大量脂肪滴。
20.根据权利要求18或19所述的肝脏类器官,其中所述脂肪肝脏类器官或脂肪性肝炎肝脏类器官是通过使所述肝脏类器官与脂肪酸接触而产生的。
21.根据权利要求20所述的肝脏类器官,其中所述脂肪酸包括油酸、亚油酸、棕榈酸或硬脂酸,或其任何组合。
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