[发明专利]一种构建脑心肌炎病毒感染性克隆的方法无效
| 申请号： | 200810225311.2 | 申请日： | 2008-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN101386860A | 公开（公告）日： | 2009-03-18 |
| 发明（设计）人： | 杨汉春;盖新娜;郭鑫;张国庆;朱书 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/41 | 分类号： | C12N15/41;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王朋飞 |
| 地址： | 100083*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种构建脑心肌炎病毒的感染性克隆的方法，该方法包括以下步骤：提取脑心肌炎病毒总RNA；RT-PCR方法分段扩增其全长cDNA，并分别建立亚克隆；用双酶切的方法将各段cDNA依次定向克隆至低拷贝质粒载体中，即得脑心肌炎病毒感染性克隆。本发明方法的操作难度较小，可控性强，能够获得稳定的脑心肌炎病毒感染性克隆，因而，为脑心肌炎病毒的分子病毒学研究和疫苗的研制提供了有效的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 脑心肌炎病毒 感染性 克隆 方法 | ||
【主权项】：
1、一种构建脑心肌炎病毒的感染性克隆的方法，其包括步骤：(1)改造低拷贝质粒载体，使其只含有构建感染性克隆所需的酶切位点；(2)提取脑心肌炎病毒的总RNA；(3)用RT-PCR方法分三个片段扩增脑心肌炎病毒的全长cDNA，获得的三个片段的cDNA两端分别含有不同的酶切位点；(4)将三个片段的cDNA分别建立亚克隆；(5)用双酶切的方法将三个片段的cDNA依次定向克隆至改造的低拷贝质粒载体中，得到含有脑心肌炎病毒全长cDNA的脑心肌炎病毒感染性克隆。
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