[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及用于龙胆低聚糖的制备无效

专利信息
申请号: 200910029055.4 申请日: 2009-01-16
公开(公告)号: CN101492661A 公开(公告)日: 2009-07-29
发明(设计)人: 吴敬;陈坚;刘玲玲 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/24 分类号: C12N9/24;C12N15/56;C12P19/34;C12N15/81;C12P19/00;C12R1/685;C12R1/84
代理公司: 无锡市大为专利商标事务所 代理人: 时旭丹;刘品超
地址: 214122江苏省无锡市蠡湖大道*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种β-葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及用于龙胆低聚糖的制备,属于酶基因工程和酶工程领域。本发明由黑曲霉WX-07总RNA逆转录合成β-葡萄糖苷酶基因(bgl)SEQ ID NO:1,bgl的cDNA以质粒pPIC9K为表达载体,以毕赤酵母(P.pastoris)为表达宿主,实现bgl基因在胞外的可溶性表达;bgl的cDNA全长2523个核苷酸,编码841个氨基酸,构建的bgl/pPIC9K转化P.pastoris KM71可表达BGL酶。BGL酶具有转糖苷活性,能将葡萄糖转糖苷生成龙胆低聚糖。优化酶法制备龙胆低聚糖的工艺,并利用阳离子树脂进行分离精制,达到较好效果。制得的龙胆低聚糖产品作为功能性食品配料,具有低热量,低龋齿,整肠等生理功能。本发明为龙胆低聚糖的制备提供了具有商业化价值的新途径。
搜索关键词: 一种 葡萄 糖苷酶 基因 克隆 表达 用于 龙胆 聚糖 制备
【主权项】:
1、一种β-葡萄糖苷酶,缩写为BGL酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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