[发明专利]一种木聚糖酶的固定方法

摘要

本发明所属酶工程研究开发技术领域。本发明涉及木聚糖酶载体的制备和木聚糖酶的固定化方法研究。取对苯二酚30-40g、福尔马林水溶液80-90mL、盐酸20-30mL，搅拌混匀；混合液搅拌加热至形成凝胶；凝胶用去离子水洗涤至中性，干燥，研磨，过筛，取直径大约0.05～0.2mm的颗粒，经水溶涨即得固定化载体；取凝胶载体1g，加入3～4％的戊二醛溶液5-8mL，室温下搅拌0.5h，室温交联5-6h，离心去上清，水洗除去残余戊二醛，留沉淀；沉淀载体加入10-15mL稀释的木聚糖酶，搅拌均匀，4℃固定5～6h，离心，留沉淀；沉淀用0.1mol/L HAc-NaAc缓冲液洗涤，除去多余酶液；抽真空得到固定化木聚糖酶。本发明载体和固定化酶的制备方法，载体原料廉价易得，工艺简单，条件温和，对酶活性损失小，酶活回收率可达到80.5％。

主权项

本发明涉及木聚糖酶固定化载体的制备和木聚糖酶的固定化方法，其特征在木聚糖酶载体的制备和木聚糖酶的固定化方法，包括以下过程：步骤(一)：取对苯二酚30‑40g、福尔马林水溶液80‑90mL、盐酸20‑30mL，搅拌混匀；步骤(二)：将步骤(一)的混合液搅拌加热至形成凝胶；步骤(三)：将步骤(二)的凝胶用去离子水洗涤至中性，干燥，研磨，过筛，取直径大约0.05～0.2mm的颗粒，经水溶涨即得固定化载体；步骤(四)：取步骤(三)的凝胶载体1克，加入3～4％的戊二醛溶液5‑8mL，室温下搅拌0.5小时，室温交联5‑6小时，离心去上清，水洗除去残余戊二醛，留沉淀；步骤(五)：步骤(四)中的沉淀载体加入10‑15mL稀释的木聚糖酶，搅拌均匀，4℃固定5～6小时，离心，留沉淀；步骤(六)：步骤(五)中的沉淀用0.1mol/L HAc‑NaAc缓冲液洗涤，除去多余酶液；步骤(七)：将步骤(六)中的固定化酶抽真空得到固定化木聚糖酶。