[发明专利]一种银杏叶中高纯度黄酮组分的高效提取分离制备方法

摘要

本发明提供了一种银杏叶中高纯度黄酮组分的高效提取分离制备方法，其主要的成分是山奈酚-3-O-2”,6”-二鼠李糖基葡萄糖苷，芦丁，槲皮素葡萄糖基鼠李糖苷，山奈酚-3-O-芸香糖苷，异鼠李素-3-O-芸香糖苷，槲皮素对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷以及山奈酚对香豆酰基葡萄糖鼠李糖苷。其制备方法为将银杏叶药材粉碎后醇水溶液提取，浓缩后滤液经非极性大孔吸附树脂柱层析，再经新型硅胶基质键合材料进行二维分离，用甲醇溶液洗脱，收集洗脱液并浓缩干燥，获得银杏黄酮组分。本发明提高了目标成分含量，黄酮组分含量确定。提取分离工艺过程重复性高、可操作性好，适用于自银杏叶大规模分离制备黄酮组分，并可作为舒血宁注射液原料。

主权项

一种银杏叶中高纯度黄酮组分的高效提取分离制备方法，其特征在于：步骤如下：1）提取：称取含水量为1%‑10%的银杏叶，加入其重量8‑12倍，浓度为10%‑50%乙醇，20‑50℃浸泡提取2‑5次，每次1‑5天，合并提取液，将提取液浓缩得到相对密度为1.15‑1.25的浸膏；2）醇沉：将浸膏中加入乙醇使乙醇体积浓度达到50‑70%，并充分搅拌，0‑4℃冷藏静置12‑36小时，过滤，将滤液浓缩至相对密度为1.10‑1.25的浸膏；再加入乙醇使乙醇体积浓度达到70‑90%，并充分搅拌，0‑4℃冷藏静置12‑48小时过滤，将滤液浓缩挥发除去乙醇，浓缩得到相对密度为1.15‑1.25的浸膏；3）水沉：将醇沉完的浸膏中按照1:5‑1:10的体积比加入水，充分搅拌，0‑4℃冷藏静置24‑240小时，过滤，样品溶液经过10000‑25000转/分钟的高速离心机离心，样品浓缩至相对密度为1.05‑1.10的浸膏；4）大孔树脂分离：将水沉完的浸膏上样于非极性大孔树脂柱，上样量与分离材料体积比为1：5‑1：50，分别采用不同体积浓度的乙醇水溶液作为洗脱液，分别采用水、体积浓度10‑30%乙醇、体积浓度30‑60%乙醇和60‑90%乙醇洗脱，每次洗脱的体积为3‑6个柱体积，流速为1‑3个柱体积/小时；收集10‑30%乙醇和60‑90%乙醇洗脱组分，合并洗脱液并浓缩至相对密度为1.10‑1.20的浸膏；5)新型硅胶基质键合材料的二维液相色谱制备：以粒径10‑100微米的新型硅胶基质键合材料为填料，以不同体积浓度的甲醇水溶液作为洗脱液，收集目标洗脱组分为一维组分，再以粒径为5‑80微米的新型硅胶基质键合材料为填料，以不同体积浓度的甲醇水溶液作为洗脱液，收集目标洗脱组分为二维组分，干燥处理即为银杏黄酮组分化合物。