[发明专利]一种白喉类毒素疫苗的制备方法有效
申请号: | 201210529455.3 | 申请日: | 2012-12-10 |
公开(公告)号: | CN102961740A | 公开(公告)日: | 2013-03-13 |
发明(设计)人: | 李佩珊;陈亮;白磊;凌霜;杨以梅;杨海燕;薛红刚;李新国 | 申请(专利权)人: | 武汉生物制品研究所有限责任公司 |
主分类号: | A61K39/05 | 分类号: | A61K39/05;A61P31/04;C12P21/02;C07K14/34;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C12R1/16 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 樊戎;徐绍新 |
地址: | 430060 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种白喉类毒素疫苗的制备方法,该方法是以白喉杆菌菌株为原料,经过白喉类毒素的培养、菌液分离、超滤浓缩、两次盐析和超滤脱盐等步骤制备而成的。本发明先将培养液用中空纤维滤膜除去菌体,再进行精制,从而减少后续过滤工艺中菌体和其他杂质碎片堆积引起的孔道堵塞;通过改进盐析方法,有效去除了培养液中的毒素蛋白和其他致敏原;培养液的浓缩和盐析后的脱盐方法采用的均是切向流超滤方法,减少了因对毒素蛋白的剪切造成的抗原破坏,避免了蛋白的沉淀。本发明缩短了白喉类毒素疫苗的制备时间,提高了生产效率。 | ||
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【主权项】:
一种白喉类毒素疫苗的制备方法,其特征在于:将白喉杆菌菌种经传代发酵,甲醛脱毒后,将培养液调节pH至6.9~7.5,然后用孔径为0.22~0.45µm的中空纤维滤膜过滤除去菌体,滤液用孔径为10~40KD中空纤维滤膜进行超滤,直至滤液的体积为原体积的1/8~1/10,然后向滤液中加入质量体积比为25%~27%的硫酸铵盐析,静置24小时后过滤,向滤液中再次加入质量体积比为15%~19%的硫酸铵盐析,静置24小时后离心分离,将离心后的沉淀用注射用水完全溶解后,再次用孔径为10~40KD的中空纤维滤膜进行超滤,直至滤液中硫酸铵的质量百分含量小于0.025%。
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