[发明专利]一种肿瘤细胞球三维可控图案化的方法

摘要

一种肿瘤细胞球在三维基质中可控图案化的方法，首先利用负性光刻胶的热塑性制得半球弧形凹槽模板，经过聚二甲基硅氧烷两次复制翻转成型及特殊抗细胞贴附修饰，得到可用于细胞接种‑沉降‑聚集成球的聚二甲基硅氧烷微坑芯片；所得细胞球经胶原胞外基质的包埋，实现细胞球三维基质中的图案化排列。值得注意的是，通过芯片模板设计，可以调控细胞球图案化排列，包括细胞球间距、相对位置等参数。

主权项

一种肿瘤细胞球在三维基质中可控图案化的方法，其特征在于：首先利用负性光刻胶的热塑性制得特定图案化的SU‑8半球弧形凹槽模板，经过聚二甲基硅氧烷两次复制翻转成型及特殊抗细胞贴附修饰，得到聚二甲基硅氧烷微坑芯片；将细胞悬液均匀平铺在该芯片表面，经过两天沉降及细胞间相互作用的过程，微坑中的细胞成球样；原位平铺胶原液并于37℃固化，胶原块与芯片模板一起反转后将芯片剥离；由于此时的细胞球为半包埋于胶原块中，需要再加一层胶原液并固化，最终得到全方位包埋于胶原胞外基质中的细胞球三维可控图案；或者基于同样原理，得到全方位包埋于Matrigel胞外基质的细胞球三维可控图案，所述特殊抗细胞贴附修饰过程为：SU‑8半球弧形凹槽模板经过聚二甲基硅氧烷两次复制翻转成型后，用表面活性剂泊洛沙姆Pluronic F‑127浸泡，经此修饰，固态聚二甲基硅氧烷表面修饰的疏水基团具有抗细胞贴附的作用，从而可促使细胞成球生长。