[发明专利]用于转染的脂质纳米粒子和相关方法在审
| 申请号： | 201480022785.0 | 申请日： | 2014-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN105143456A | 公开（公告）日： | 2015-12-09 |
| 发明（设计）人： | E·拉姆齐;R·J·泰勒;N·M·贝利沃;P·R·卡利斯;C·沃尔什 | 申请（专利权）人： | 不列颠哥伦比亚大学 |
| 主分类号： | C12N15/88 | 分类号： | C12N15/88 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 韩威威 |
| 地址： | 加拿大不列*** | 国省代码： | 加拿大;CA |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 转染试剂组合物、从转染试剂组合物制备的脂质纳米粒子、包含转染试剂组合物的试剂盒，和用于产生和使用从转染试剂组合物制备的脂质纳米粒子的方法。在含水介质中分散时，脂质容易地形成脂质体，如单层小泡和多层小泡。脂质体已经成功地用于包封并向细胞递送广泛类型的化学物质，包括核酸、蛋白质和小分子药物。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 转染 纳米 粒子 相关 方法 | ||
【主权项】：
一种转染试剂组合物，其包含：(a)一种或多种阳离子脂质或其可药用盐；(b)一种或多种中性脂质；(c)一种或多种固醇；和(d)一种或多种表面活性剂。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于不列颠哥伦比亚大学，未经不列颠哥伦比亚大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201480022785.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：用于可倾侧的冶金处理容器的固定系统
- 下一篇：RNA制备方法
- 同类专利
- 一种靶向基因载体及其制备方法和应用-201610339273.8
- 赵晓丽;郑楚萍 - 中国科学院深圳先进技术研究院
- 2016-05-20 - 2019-08-23 - C12N15/88
- 本发明提供了一种骨靶向基因载体，所述骨靶向基因载体为阿仑膦酸钠改性的脂质体，所述阿仑膦酸钠改性的脂质体包括阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇以及阿仑膦酸钠改性的磷脂，所述阳离子类脂、中性辅助类脂、胆固醇构成磷脂层，所述阿仑膦酸钠改性的磷脂穿插于所述磷脂层中并与所述磷脂层形成囊泡结构，所述阿仑膦酸钠暴露在所述磷脂层之外。该骨靶向基因载体对骨组织有较高的靶向性和转染效率，可以负载基因物质在骨组织附近高效表达。本发明还提供了该骨靶向基因载体的制备方法及应用。
- 用于抑制LGALS12基因表达的物质在抑制脂肪细胞分化中的应用-201811087229.8
- 张瑾;毋文静;彭永佳;尹亚军 - 嘉兴学院
- 2018-09-18 - 2019-01-11 - C12N15/88
- 本发明公开了用于抑制LGALS12基因表达的物质在抑制脂肪细胞分化中的应用。本发明要求保护用于抑制LGALS12基因表达的物质或用于抑制LGALS12蛋白活性的物质在抑制脂肪细胞分化中的应用、在抑制前体脂肪细胞分化中的应用、在抑制前体脂肪细胞向脂肪细胞分化中的应用、在猪的育种中的应用。本发明的发明人发现降低LGALS12蛋白水平可以抑制脂肪细胞分化。本发明对于瘦肉型猪的育种具有重大价值。
- 一种细胞接种及挑选细胞单克隆的方法、应用-201810064570.5
- 吴华彰;赵云利;乔凤昌;汤必奎;吴守伟;吴涛;胡明洁 - 蚌埠医学院
- 2018-01-23 - 2018-09-28 - C12N15/88
- 本发明属于细胞克隆技术领域，具体涉及一种细胞接种及挑选细胞单克隆的方法、应用。细胞接种时在超净工作台中水平静置20‑30min，然后直接水平移入二氧化碳培养箱培养，这样可以达到细胞种板均匀，成功率可接近100％；在挑选细胞单克隆时，不适用玻璃克隆环，而是使牛津杯环状的底部沾满一层封闭液，将牛津杯放在选定的克隆之上，不会导致漏液的发生。
- 改善的细胞系以及在胶囊化细胞生物递送中的用途-201711449477.8
- 菲利普·库斯克;拉尔斯·U·沃尔伯格 - 格罗丽亚娜疗法有限责任公司
- 2010-01-21 - 2018-08-10 - C12N15/88
- 本发明涉及用于向受试者递送分泌性生物活性化合物的胶囊；表达重组蛋白的细胞系；以及所述细胞系的产生，所述细胞系用于分泌性治疗分子的裸细胞生物递送和胶囊化细胞生物递送。本发明还涉及利用所述细胞系产生重组蛋白的方法。在一个实施方案中，细胞系是人的细胞系。在本发明的另一方面中，转座子系统用于产生用于生物活性多肽分泌的细胞系。
- GLP-1和其在用于治疗代谢疾病的组合物中的用途-201680058565.2
- C.欣德勒;J.M.威尔逊;M.威尔逊 - 宾夕法尼亚州大学信托人
- 2016-08-05 - 2018-08-03 - C12N15/88
- 本文提供了用于治疗受试者的II型糖尿病的组合物和方法。本文提供了一种病毒载体，所述载体包括包含编码前肽和GLP‑1活性部分的序列的核酸分子，其中，在表达时，GLP‑1的N末端氨基酸紧接在所述前肽的C末端氨基酸之后。在所需实施方案中，所述受试者是猫或狗。
- 用于高通量单细胞遗传操作的方法和系统-201680062376.2
- 郑新颖 - 10X基因组学有限公司
- 2016-10-17 - 2018-08-03 - C12N15/88
- 本文提供用于将核酸操作剂引入到单细胞中的方法和系统。核酸操作试剂到单细胞中的这种高通量递送和随后对此类细胞的遗传操作允许大规模遗传分析，所述大规模遗传分析可用于例如研究生物途径和药物靶标发现。
- 一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法-201510209184.7
- 贡成良;曹广力;薛仁宇;胡小龙;郭睿 - 苏州大学
- 2015-04-28 - 2018-06-19 - C12N15/88
- 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，获得重组质粒；6）将重组质粒pT‑S1至pT‑S9进行酶切，体外转录获得对应的RNA；7）构建带有红色荧光蛋白基因的重组质粒pT‑S10‑DsRed并获得S10‑DsRed RNA；以及8）将上述RNA等摩尔混合，包裹并转染宿主，进而获得病毒。利用本发明建立的方法可以在家蚕细胞中表达红色荧光蛋白，进而有可能获得人们所需的重组质型多角体病毒生物杀虫剂。 1
- 一种新型双重靶向基因载体-201610867498.0
- 马昆;富铎;于冬丽 - 大连理工大学
- 2016-09-30 - 2018-04-06 - C12N15/88
- 本发明提供一种新型双重靶向基因载体，该双重靶向基因载体具有肿瘤细胞靶向性与细胞核靶向性，其内部包载大量目的基因片段，能够高效的传递基因；表面为负电性。制备方法具体为将eggPC、DOPE、FA‑PEG2000‑DSPE和地塞米松在室温下溶于氯仿后，置于茄型瓶中，氮气吹干，制备脂质薄膜，然后加入PCR组分液，涡旋震荡水化，将PCR组分液包裹在脂质囊泡中，最后采用PCR方法扩增目的基因片段，得到包载大量目的基因片段的新型双重靶向基因载体。本发明的同时具有细胞与细胞核靶向性，基因转染效率显著提高；制备载体采用中性磷脂，无正电荷成分，毒性明显降低；设计合理，制备工艺简单，具有广阔的应用前景。
- 一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法-201510209183.2
- 贡成良;薛仁宇;曹广力;胡小龙;郭睿 - 苏州大学
- 2015-04-28 - 2018-03-30 - C12N15/88
- 本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。
- MicroRNA26b‑3p抑制剂在制备人脐带来源间充质干细胞中的应用-201510107949.6
- 刘厚奇;王巧玲;徐辰;王越;仵敏娟 - 中国人民解放军第二军医大学
- 2015-03-12 - 2017-09-12 - C12N15/88
- 本发明涉及生物技术领域，本发明提供了MicroRNA26b‑3p抑制剂在制备促进人脐带来源间充质干细胞增殖的试剂中的应用，所述试剂包括但不限于1)MicroRNA26b‑3p抑制剂；2)含有MicroRNA26b‑3p抑制剂编码基因的重组载体；3)含有MicroRNA26b‑3p抑制剂编码基因的重组病毒；4)含有MicroRNA26b‑3p抑制剂编码基因的重组病毒载体。本发明实验证明，MicroRNA26b‑3p抑制剂可以增加雌激素受体的表达，显著提高人脐带来源间充质干细胞的增殖速度。本发明为人脐带来源间充质干细胞快速增殖以及更快获得再生医学中间充质干细胞的临床应用的细胞提供了新的思路和方式。
- miR‑134及靶基因FOXM1在制备基于间充质干细胞的胰腺癌靶向载体中的应用-201710045992.3
- 袁春丽;高云雷 - 南京千年健干细胞基因工程有限公司
- 2017-01-20 - 2017-06-16 - C12N15/88
- 本发明公开了miR‑134及靶基因FOXM1在制备基于间充质干细胞的胰腺癌靶向载体中的应用。本发明发现对间充质干细胞的miR‑134低表达后，间充质干细胞对胰腺癌PC‑3、胰腺癌PANC‑1、胰腺癌SW1990的趋向性全部增强，靶向性增加；miR‑134低表达后，FOXM1基因表达上调，FOXM1蛋白含量明显升高，证明miR‑134是通过调节其靶基因FOXM1来提高间充质干细胞对胰腺癌PC‑3、胰腺癌PANC‑1、胰腺癌SW1990趋向性的。抑制miR‑134、上调FOXM1基因和蛋白表达的药物可以用于提高间充质干细胞对胰腺癌的靶向性，且该修饰的BMSC对胰腺癌细胞的生长无促进作用，可以制成基于间充质干细胞的胰腺癌靶向载体。
- 用于递送治疗分子的包含阳离子两亲物和辅脂质的组合物-201080031986.9
- 崔坤元;梁东;大卫·斯威德勒 - 崔坤元;梁东;大卫·斯威德勒
- 2010-05-16 - 2016-10-26 - C12N15/88
- 本公开内容提供组合物，所述组合物可用于与治疗剂相联合，并可用于疾病和病症的诊断和治疗中。所述组合物可用于将药剂(例如，核酸治疗剂)递送至细胞、组织、器官和对象。
- 一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA活性的方法-201610342716.9
- 林玉玲;赖瑞联;赖钟雄;程春振;刘生财;陈裕坤;张梓浩 - 福建农林大学
- 2016-05-23 - 2016-09-28 - C12N15/88
- 本发明提供了一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA的方法。本发明根据miRNA成熟体经化学修饰和特殊标记设计的miRNA模拟物agomir和高效阻断剂antagomir，采用细胞转染剂Lipofectamine 2000 reagent将二者导入龙眼胚性愈伤组织细胞，实现在龙眼活体中特异性增强或抑制目标miRNA活性，同时进行miRNA表达体系优化和作用效果持续时间鉴定。该方法具有操作简单快速、干扰效果显著、稳定持久等优点，避免了现有方法依赖转基因技术因而实验周期长、费时费力等缺点，本发明为龙眼愈伤组织miRNA研究提供了一种高效便捷的方法，对miRNA表达调控和功能鉴定具有重要意义。
- MRNA的CNS递送及其用途-201480057659.9
- F·德罗莎;M·哈特莱因;S·卡夫 - 夏尔人类遗传性治疗公司
- 2014-10-22 - 2016-06-08 - C12N15/88
- 本发明除其它方面以外提供了将信使RNA(mRNA)有效递送至中枢神经系统(CNS)的方法和组合物。具体地讲，本发明提供了给需要递送的受试者鞘内施用包含包封在脂质体内的编码蛋白的mRNA的组合物的方法和组合物，使得施用所述组合物导致mRNA在脑和/或脊髓中的神经元中的细胞内递送。本发明对治疗诸如脊髓性肌肉萎缩症的CNS疾病、障碍或病症特别有用。
- 线粒体靶向的基因编辑系统及方法-201610035146.9
- 程田林;田子仇 - 上海赛墨生物技术有限公司
- 2016-01-19 - 2016-05-25 - C12N15/88
- 本发明涉及一种线粒体靶向的基因编辑系统及方法，线粒体靶向的基因编辑系统包括：a.线粒体靶向的DNA核酸酶，b.线粒体靶向的sgRNA，c.线粒体靶向的RNA修复模板。基因编辑方法为：采用上述基因编辑系统，将线粒体靶向的DNA核酸酶、线粒体靶向的sgRNA和线粒体靶向的RNA模板定位至线粒体中。本发明利用序列特异性的核酸酶在靶位点处或附近制造一个DNA双链缺口(DSBs)，通过RNA模板实现了靶位点处的同源重组修复。
- 用于转染的脂质纳米粒子和相关方法-201480022785.0
- E·拉姆齐;R·J·泰勒;N·M·贝利沃;P·R·卡利斯;C·沃尔什 - 不列颠哥伦比亚大学
- 2014-03-14 - 2015-12-09 - C12N15/88
- 转染试剂组合物、从转染试剂组合物制备的脂质纳米粒子、包含转染试剂组合物的试剂盒，和用于产生和使用从转染试剂组合物制备的脂质纳米粒子的方法。在含水介质中分散时，脂质容易地形成脂质体，如单层小泡和多层小泡。脂质体已经成功地用于包封并向细胞递送广泛类型的化学物质，包括核酸、蛋白质和小分子药物。
- 一种高效转染HaCaT细胞的方法-201510279140.1
- 李志远;李彩月;马文波 - 中国科学院广州生物医药与健康研究院
- 2015-05-27 - 2015-09-16 - C12N15/88
- 本发明公开了一种高效转染HaCaT细胞的方法。它是在用脂质体法转染质粒进入HaCaT细胞的过程中，在HaCaT细胞的转染体系中加入TX-10。本发明在转染过程中加入了TX-10，它能提高真核细胞膜的通透性，从而促进脂质体-DNA复合物有效的进入细胞，对细胞膜比较厚，难以用传统脂质体法进行转染的HaCaT细胞，这种方法很有效，使得转染效率提高了几倍，它对一些别的细胞膜厚难转染的细胞也有适用性，只是要注意聚乙二醇辛基苯基醚的用量，因为它用量高了对细胞有毒性，用量低了效果不明显。对于HaCaT细胞来说，TX-10的最适用量是0.005％，在该用量下，HaCaT细胞的细胞死亡率最低，转染效率最高。
- 靶向PCSK9基因的脂质配制的DSRNA-201510020286.4
- K·菲吉拉德;G·辛克尔;A·阿金克;S·米尔斯泰恩 - 阿尔尼拉姆医药品有限公司
- 2010-06-15 - 2015-05-27 - C12N15/88
- 本发明涉及使用靶向PCSK9基因的脂质配制的siRNA的组合物和方法。
- 一种非病毒基因载体的制备方法-201410513142.8
- 马昆;张嘉宁 - 大连理工大学
- 2014-09-29 - 2015-01-07 - C12N15/88
- 本发明提供一种非病毒基因载体的制备方法，该方法是利用原生细胞模型protocell的技术与方法，用中性脂质囊泡包裹PCR组分液(pDNA模板、聚合酶、引物、dNTPs)，然后进行PCR扩增，得到内部包裹大量DNA片段的protocell液。本发明的在脂质囊泡中扩增DNA片段，使载体中包载的基因拷贝数大大增加，基因转染效率也显著提高；制备脂质载体采用中性磷脂，无正电荷成分，使其毒性明显降低。本发明方法设计合理，制备工艺简单，具有广阔的应用前景。
- 悬浮细胞脂质体转染用细胞培养板预处理方法-201210233623.4
- 李墨林;李传刚;舒晓宏 - 大连医科大学
- 2012-07-08 - 2012-10-10 - C12N15/88
- 本发明公开一种悬浮细胞脂质体转染用细胞培养板预处理方法，按如下步骤进行：将多聚赖氨酸用无菌三蒸水溶解至1mg/ml；将a步骤所得溶液均匀覆盖在细胞培养板的培养孔表面；静置5分钟后，弃溶液，用无菌三蒸水洗培养孔表面，晾干；紫外线照射30分钟。本发明对细胞培养板预处理后，无需离心，既可使悬浮细胞“粘附”于细胞培养板上（类似悬浮细胞贴壁），加大了脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会，有效提高了悬浮细胞的转染效率（至少可达70%），可对悬浮细胞高效转染外源性基因（miR或siRNA），操作简单、省时省力。
- 通过在体内递送的胰岛转录因子基因再生胰岛和逆转糖尿病-200980154476.8
- P·A·格雷布恩;S·陈;J·丁 - 贝勒研究院
- 2009-11-13 - 2011-12-14 - C12N15/88
- 本发明包括用于在胰腺中通过超声靶向破坏微泡，从而再生葡萄糖反应细胞的组合物和方法，其中所述组合物包含与微泡在内部和附近接触的预装配的脂质体-核酸复合物，其中所述预装配的脂质体-核酸复合物包含在启动子控制下的NeuroD基因，其中在胰腺的靶位点微泡的破坏将核酸递送到位于超声破坏位置的胰腺细胞中，其中掺入核酸的细胞对高血糖水平作出反应表达胰岛素。
- 用于核酸递送系统的支化阳离子脂质-200980145887.0
- 赵洪;彦魏丽;史连军;乌德春 - 安龙制药公司
- 2009-07-31 - 2011-10-12 - C12N15/88
- 本发明涉及用于寡核苷酸递送的阳离子脂质和使用纳米颗粒组合物调控靶基因表达的方法。特别地，本发明涉及通过支化间隔基而具有多个带正电荷的部分的胆固醇及其衍生物，以及包封在阳离子脂质、促融合脂质和PEG脂质的混合物中的寡核苷酸的纳米颗粒组合物。
- 用于核酸递送的新型制剂-200980122413.4
- 伊恩·麦克拉克伦;爱德华·亚沃尔斯基;基尤·拉姆;劳埃德·B·杰夫斯;洛恩·R·帕默尔 - 普洛体维生物治疗公司
- 2009-04-15 - 2011-07-06 - C12N15/88
- 本发明提供包含一种或多种活性剂或治疗剂的新型稳定的脂质颗粒，制备所述脂质颗粒的方法，和递送和/或施用所述脂质颗粒的方法。更具体地，本发明提供包含核酸(诸如一种或多种干扰RNA)的稳定核酸-脂质颗粒(SNALP)，制备SNALP的方法，和递送和/或施用SNALP的方法。
- 专利分类
