[发明专利]聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用。它是通过反向悬浮将聚乙烯醇溶液在油相中分散成球形小液粒，通过交联剂对聚乙烯醇进行交联，经过固化、洗涤和筛分步骤得到聚乙烯醇微球；微载体的粒径为60~250μm，微载体的密度为1.02~1.07g/cm3。聚乙烯醇价格低廉，对环境友好，生物相容性好，以其制备的微载体适合哺乳动物细胞贴壁生长。本发明的微载体制备工艺更加简单，可广泛应用哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等生物制品的生产。

主权项

1.一种聚乙烯醇微载体，它是通过反向悬浮将聚乙烯醇溶液在油相中分散成球形小液粒，通过交联剂对聚乙烯醇进行交联，经过固化、洗涤和筛分步骤得到聚乙烯醇微球；所述的交联剂为戊二醛；其特征在于：微载体的粒径为60~250μm，微载体的密度为1.02~1.07g/cm3；具体制备方法经过如下步骤：1）将200 g 10%的聚乙烯醇溶液加入含有2 g span‑80的300 mL液体石蜡中，用盐酸调pH为1～2，40‑65℃下，以200 ‑280 rpm 速度进行搅拌5‑10 min；2）降温至40℃，以280 rpm速度继续搅拌20‑30 min；加入50%的戊二醛3.5 mL，保持温度40℃，以280 rpm速度继续搅拌50‑60 min；升温至60℃，继续搅拌50‑60 min；3）停止反应，滤出微球，用10倍体积的70±10℃热水清洗3‑4次，再用5倍体积的乙醇清洗3‑5次，最后用4‑5倍体积的石油醚清洗2‑3次；经80℃烘干后，去除残留的试剂；4）筛分：将得到的聚乙烯醇微载体放入纯水中清洗，先用100目的不锈钢筛网进行筛分，去除大于100目筛孔的微载体；余下的微载体用180目不锈钢筛子对微球进行筛分，保留大于180目筛孔的微载体，即可；5）将得到的微球样品浸泡于pH=7的磷酸缓冲溶液中备用。