[发明专利]基于镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的啶虫脒检测方法

摘要

本发明涉及一种基于镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的啶虫脒检测方法，解决现有的啶虫脒检测方法成本高、选择性差以及以往的啶虫脒电化学适配体传感器的构建中需对适配体进行电活性基团标记或向测试体系加入电活性物质所造成的操作繁琐、价格昂贵、耗时等的技术问题，本发明通过将镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针原位沉积在电极表面，将高灵敏的电化学分析方法与具有高亲和力的核适配体有效结合，构筑啶虫脒的电化学适配体传感器；该分析方法既能对啶虫脒高灵敏分析，又能在复杂的环境介质中获得高的选择性，同时，该方法具有仪器设备简单、分析成本低、响应迅速快等优点，可为食物和环境中农药啶虫脒残留成分评估提供一种新的检测方法。

主权项

1.基于镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的啶虫脒检测方法，其特征在于，包括以下步骤：一、制备以镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的电化学适配体传感器：(1)将裸玻碳电极用Al₂O₃粉末抛光后，用高纯水超声清洗，然后在N₂气氛下吹干；(2)将吹干后的裸玻碳电极置于0.5M的H₂SO₄溶液中进行循环伏安扫描，扫描电压为‑0.2～1.2V，扫描速率为50～100mV/s，直至循环伏安曲线达到稳定；(3)将步骤(2)处理后的裸玻碳电极置于含有30～50mM NiCl₂·6H₂O和5～10mM NH₄Cl的水溶液中，在恒电位‑0.8V下进行Ni富集，使Ni膜沉积于裸玻碳电极表面，然后分别用浓度0.1M、pH 7.41的PBS溶液和高纯水冲洗数次，并干燥；然后将沉积Ni膜的裸玻碳电极转移至含有3mM K₃[Fe(CN)₆]以及0.1M NaNO₃的水溶液中，在恒电位0.7～1.0V下进行恒电位扫描，直至电流趋近于零，即制得镍铁氰配合物纳米颗粒指示探针；(4)将步骤(3)制得的镍铁氰配合物纳米颗粒指示探针置于2.5～5.0mM的HAuCl₄溶液中，在N₂气氛下，扫描电压为0～0.6V，扫描速率为50mV/s，循环伏安扫描5～10圈后，使金纳米粒子沉积在镍铁氰配合物纳米颗粒指示探针的表面；(5)将步骤(4)处理后的镍铁氰配合物纳米颗粒指示探针用高纯水冲洗并用N₂吹干，培育在2.0～4.0μM的啶虫脒适配体溶液中，并在4℃下自组装12h以上，然后将组装后的指示探针置于巯基正己醇溶液中进行培养，即制得以镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的电化学适配体传感器；二、啶虫脒的检测：(1)配制若干个浓度的啶虫脒标准溶液；(2)以步骤一制得的以镍铁氰配合物纳米颗粒为指示探针的电化学适配体传感器作为工作电极、饱和甘汞电极为参比电极、铂片电极为对电极、浓度0.1M、pH 7.41的PBS溶液为电解质溶液构成三电极体系；向三电极体系中加入配制的第一个浓度的啶虫脒标准溶液，并培育30～40min，采用差分脉冲伏安法记录该浓度啶虫脒对应的峰电流，采用上述方法依次记录其余浓度啶虫脒对应的峰电流，通过峰电流的变化与啶虫脒的标准溶液浓度的线性关系绘制标准曲线；(3)将啶虫脒浓度未知的待测样品加入到三电极体系中，采用差分脉冲伏安法记录待测样品对应的峰电流，带入步骤(2)制得的标准曲线中，即可得到待测样品中啶虫咪的浓度；(4)将使用过的电化学适配体传感器电极置于浓度0.5％、pH 1.9的SDS溶液中浸泡3～5min，去除键合在电极表面的啶虫脒，使电极再生，以便后续重复使用。