[发明专利]基于双分子荧光互补的新型信使RNA和环状RNA标记方法在审

专利信息
申请号: 201810171519.4 申请日: 2018-03-01
公开(公告)号: CN108486107A 公开(公告)日: 2018-09-04
发明(设计)人: 邵世鹏;孙超英;孙育杰 申请(专利权)人: 北京大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C09K11/06;G01N21/64
代理公司: 北京万象新悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11360 代理人: 苏爱华
地址: 100871*** 国省代码: 北京;11
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摘要: RNA分子是细胞内遗传信息传递系统中重要的一员。现存的标记RNA的方法无法同时具备活细胞、无侵入、高时空分辨率、单分子等特点,需要开发新的标记和追踪RNA的方法。本发明公开一种基于自连接标签双分子荧光互补的新型信使RNA和环状RNA的标记方法。结合RNA适配子系统,在RNA的合适位置插入适配子,将自连接标签的两个部分分别融合RNA适配子的结合蛋白。融合蛋白不结合RNA时,RNA分子不发荧光;当且仅当融合蛋白结合RNA时,RNA分子发出荧光,这样可以降低细胞内RNA标记的荧光背景。新型自连接标签双分子荧光互补的RNA标记方法可以用于活细胞和固定细胞的信使RNA和环状RNA的长时程无干扰单分子成像观测和追踪,在细胞生物学中具有非常广阔的应用前景。
搜索关键词: 分子荧光 环状RNA 信使RNA 融合蛋白 标签 单分子 活细胞 荧光 细胞生物学 追踪 高时空分辨率 细胞 成像观测 传递系统 固定细胞 合适位置 结合蛋白 遗传信息 荧光背景 标记RNA 适配子 无干扰 长时 侵入 融合 应用 开发
【主权项】:
1.一种基于自连接标签的双分子荧光互补的新型细胞内信使RNA和环形RNA标记方法,其特征在于,在待标记的信使RNA或环形RNA的合适位置插入相应的适配子序列,利用分裂的自连接标签融合适配子结合蛋白,从而实现活细胞内无荧光背景的信使RNA和环形RNA的单分子标记和成像。
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