[发明专利]具有RNA酶活性的多肽在审
申请号: | 201880023359.7 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN110651039A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | F.巴里恩托斯;M.杰曼森;K.戈里;H.德拉博格;M.A.斯特林格;D.R.塞古拉;M.D.莫兰特 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C11D3/386;C12N15/55 |
代理公司: | 11105 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明涉及具有RNA酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用这些多肽的方法。 | ||
搜索关键词: | 多肽 多核苷酸 核酸构建体 宿主细胞 | ||
【主权项】:
1.一种进化枝EYTV、EAD或YPH的多肽,该多肽具有RNA酶活性、选自由以下组成的组:/n(a)与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(b)与SEQ ID NO:6的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(c)与SEQ ID NO:9的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(d)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(e)与SEQ ID NO:15的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(f)与SEQ ID NO:57的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(g)与SEQ ID NO:58的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(h)与SEQ ID NO:59的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(i)与SEQ ID NO:60的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(j)与SEQ ID NO:61的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(k)与SEQ ID NO:62的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(l)与SEQ ID NO:63的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(m)与SEQ ID NO:64的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(n)与SEQ ID NO:65的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(o)与SEQ ID NO:66的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(p)与SEQ ID NO:67的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(q)与SEQ ID NO:72的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(r)与SEQ ID NO:73的多肽具有至少80%序列同一性的多肽;/n(s)多肽的变体,该多肽选自由以下组成的组:SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ IDNO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73,其中该变体具有RNA酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个位置中的一个或多个氨基酸取代、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或其任何组合;/n(t)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)或(s)的多肽以及N-末端和/或C-末端His-标签和/或HQ-标签的多肽;/n(u)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)或(s)的多肽以及1与10个氨基酸之间的N-末端和/或C-末端延伸的多肽;/n(v)(a)、(b)、(c)、(d)、((e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)或(s)的多肽的片段,该片段具有RNA酶活性并且具有成熟多肽的至少90%的长度;/n(w)多肽,该多肽包含基序EYTV(SEQ ID NO:28)、[YRF]E[AYFWC]D(SEQ ID NO:29)、IGGD(SEQ ID NO:30)、YPH(SEQ ID NO:31)、HTGA(SEQ ID NO:32)或DRV(SEQ ID NO:33)中的一个或多个;和/n(x)多肽,该多肽包含基序YXEYTVXTPXXXXRGXRR(SEQ ID NO:78)、[WY][YRF]E[AYFWC]D[IV](SEQ ID NO:79)、GXXIGGDXFXN(SEQ ID NO:80)、YPHX[YFA]X[ND]XE(SEQ ID NO:81)、PGXDRV(SEQ ID NO:82)或THTGA[SR]G(SEQ ID NO:83)中的一个或多个。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于诺维信公司,未经诺维信公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201880023359.7/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:包含脂肪酶和亚硫酸盐的组合物
- 下一篇:具有DNA酶活性的多肽
- 同类专利
- 一种新型的结核分枝杆菌胞外核酸酶及其用途-201510953549.7
- 刘思国;陈利苹;宋宁宁 - 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
- 2015-12-15 - 2020-02-14 - C12N9/22
- 本发明公开了一种新型的结核分枝杆菌胞外核酸酶及其用途。本发明证实了Rv0888是结核分枝杆菌的一个胞外核酸酶。基于序列分析,Rv0888核酸酶与已知的胞外核酸酶没有同源性,表明Rv0888是一个新型的胞外核酸酶。Rv0888蛋白的活性发挥需要二价离子的辅助,其最佳的温度和pH分别为41℃和6.5。本发明还提出了橄榄苦苷,6‑姜酚,补骨脂乙素以及类叶升麻苷这四种中药单体在抑制该核酸酶中的用途。定点突变研究显示H353,D387和D438残基对Rv0888的活性起着催化作用。体内感染试验证实了重组耻垢构分枝杆菌Rv0888NS/MS和Rv0888S/MS在小鼠肺中的持留能力明显高于pMV262/MS,并且Rv0888NS/MS和Rv0888S/MS在小鼠的肺中能产生明显的病理变化,表明Rv0888是分枝杆菌感染和致病性所必须的。
- 新型VI型CRISPR直系同源物和系统-201880038907.3
- F·张;D·B·T·科克斯 - 博德研究所;麻省理工学院
- 2018-04-11 - 2020-02-14 - C12N9/22
- 本发明提供了用于靶向核酸的系统、方法和组合物。具体地,本发明提供了包含新型RNA靶向CRISPR效应蛋白和至少一种靶向核酸组分如向导RNA的非天然存在的或工程化的RNA靶向系统。
- 用于切割靶DNA 的组合物及其用途-201910950859.1
- 金进秀;曹承于;金素贞;J·M·金;金爽中 - 基因工具股份有限公司
- 2013-10-23 - 2020-01-10 - C12N9/22
- 本发明涉及真核细胞或生物体中的靶向基因组编辑。更具体地,本发明涉及用于在真核细胞或生物体中切割靶DNA的组合物及其用途,所述组合物包含特异于靶DNA的向导RNA和Cas蛋白质编码核酸或Cas蛋白质。
- 具有RNA酶活性的多肽-201880023359.7
- F.巴里恩托斯;M.杰曼森;K.戈里;H.德拉博格;M.A.斯特林格;D.R.塞古拉;M.D.莫兰特 - 诺维信公司
- 2018-03-27 - 2020-01-03 - C12N9/22
- 本发明涉及具有RNA酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用这些多肽的方法。
- 具有DNA酶活性的多肽-201880023402.X
- 孙天齐;K.戈里;M.A.斯特林格;J.萨洛蒙;K.M.施诺尔 - 诺维信公司
- 2018-03-23 - 2020-01-03 - C12N9/22
- 本发明提供了具有DNA酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还提供了包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用这些多肽的方法。
- 具有DNA酶活性的多肽-201880023404.9
- M.A.斯特林格;J.萨洛蒙;K.戈里;J.C.F.克努特泽尔 - 诺维信公司
- 2018-03-23 - 2020-01-03 - C12N9/22
- 本发明涉及具有DNA酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用这些多肽的方法。
- 洗涤剂组合物及其用途-201880028898.X
- D.R.塞古拉;J.所罗门;J.M.詹森;R.M.维杰博格 - 诺维信公司
- 2018-03-23 - 2020-01-03 - C12N9/22
- 本发明涉及组合物,如包含酶的混合的清洁组合物。本发明进一步涉及包含此类酶的组合物在清洁过程中的用途。
- 一种水稻Bel基因的定点敲除系统及其应用-201410832218.3
- 刘东风;常振仪;王承旭;卢嘉威;唐晓艳;邓兴旺 - 未名兴旺系统作物设计前沿实验室(北京)有限公司;深圳市作物分子设计育种研究院;深圳兴旺生物种业有限公司
- 2014-12-29 - 2019-12-31 - C12N9/22
- 本发明公开了一种水稻Bel基因的定点敲除系统及其应用,属于植物基因工程领域,具体涉及一种水稻苯达松基因的定点敲除方法及其应用。本发明提供了一种偏好于植物基因组DNA的TALEN定点突变系统,所述TALEN定点突变系统包含四个识别模块。本发明与现有的创建苯达松敏感植物的技术相比,其优势在于方便、快速,用此技术可以一位科研人员在一年半的时间内可以得到多个不同突变位点的纯合突变体植株,大大节省人力、物力,而且得到的突变体不带转基因成分,消除人们对转基因的顾虑,对植物基因工程创制新的种质资源有重要意义。
- 一种突变型RNAseA及其在酵母细胞的表达和纯化方法-201810634365.8
- 安海谦;冉波;王鹏 - 金普诺安生物科技(苏州)有限公司
- 2018-06-19 - 2019-12-27 - C12N9/22
- 本发明公开了一种突变型RNAseA及其在酵母细胞的表达和纯化方法,所述表达方法如下:克隆突变型RNase A的基因;突变型RNase A重组质粒转化到毕赤酵母;突变型RNase A在酵母细胞中的表达及检测。所述纯化方法如下:取500毫升RNaseA发酵液即培养基上清,用NaOH+磷酸氢二钠液体调pH8.0沉淀;离心;将澄清液体连续上样平衡好的Ni Sepharose 6FF层析柱;用0.25M咪唑洗脱目的蛋白,按照流出图谱收集峰;将收集的洗脱峰,用截流分子量3.5KDa透析袋透析得到透析好的样品蛋白;将透析好的样品蛋白,进行第二次离子交换柱层析得到纯化蛋白。
- 高保真性CAS9变体及其应用-201880011895.5
- A.切雷塞托;A.卡西尼;G.彼得里斯;A.因加;M.奥利维利 - 特伦托大学
- 2018-02-14 - 2019-11-29 - C12N9/22
- 为了解决源自酿脓链球菌Cas9(SpCas9)的非特异性基因组切割的限制并且为了鉴定具有更高切割保真性的变体,本发明描述了基于酵母的测定法,其允许同时评估针对两个工程化基因组靶物的中靶和脱靶活性。筛选通过Rec1‑II域的随机诱变获得的SpCas9变体允许鉴定具有增加的中/脱比率的命中。通过单一变体内的鉴定突变的组合分离表现最佳的核酸酶evoCas9。用先前报告的经合理设计的变体进行的并排分析证明了本发明的evoCas9的保真性的显著改善。
- 核酸酶蛋白Cas9的表达载体、构建方法及其表达纯化-201810481535.3
- 周敏;陈沐;王德孚;卢颖洪;王坤 - 南京理工大学
- 2018-05-18 - 2019-11-26 - C12N9/22
- 本发明公开了一种核酸酶蛋白Cas9的表达载体、构建方法及其表达纯化。所述的核酸酶蛋白Cas9的表达载体以扩增的硫氧还原蛋白‑组氨酸标签‑烟草蚀纹病毒蛋白酶识别位点的cDNA替代pET32a中原有的硫氧还原蛋白序列,将密码子优化成易于在宿主中表达的、C端融合NLS核定位信号肽和3×FLAG标签序列的Cas9的基因序列整合到硫氧还原蛋白序列中。本发明利用密码子优化和硫氧还原蛋白融合表达获得大量的核酸酶Cas9蛋白,在仅使用LB培养基的情况下,每克大肠杆菌Tuner(DE3)湿菌最后能获得10mg高纯度的活性Cas9蛋白,实现了低成本下,高保真核酸酶蛋白Cas9的高表达。本发明对宿主要求不高,获得的蛋白可以用于大批量的生物体外组装、体内基因编辑实验。
- 一种锌指核酸酶及其应用-201910841509.1
- 肖磊;吴昭;毛丽;刘婧睿 - 上海斯丹赛生物技术有限公司
- 2019-09-06 - 2019-11-22 - C12N9/22
- 本发明公开了一种锌指核酸酶及其应用,属于基因工程技术领域。本公开内容涉及锌指核酸酶(ZFN),包括与T细胞受体(TRAC)基因中的第一靶位点结合的第一锌指蛋白(ZFP)和与TRAC基因中的第二靶位点结合的第二ZFP,能够靶向识别切割特异目的DNA,切割效率高,所以向细胞内引入锌指核苷酸酶切割基因组DNA可以有效地提高重组率。
- 化脓链球菌CAS9突变基因和由其编码的多肽-201780062260.3
- C·A·瓦库斯卡斯;M·A·科林伍德;G·R·雷蒂格;M·A·贝尔克 - 综合DNA技术公司
- 2017-10-10 - 2019-11-15 - C12N9/22
- 本发明涉及用于CRISPR/Cas核酸内切酶系统的突变Cas9核酸和蛋白质,及其使用方法。特别地,本发明涉及一种分离的突变Cas9蛋白,其中所述分离的突变Cas9蛋白质在CRISPR/Cas核酸内切酶系统中有活性,其中所述CRISPR/Cas核酸内切酶系统相对于野生型CRISPR/Cas核酸内切酶系统显示减少的脱靶编辑活性并维持中靶编辑活性。本发明还包括编码突变Cas9蛋白的分离的核酸,核糖核蛋白复合物和具有突变Cas9蛋白的CRSPR/Cas核酸内切酶系统,其相对于野生型CRISPR/Cas核酸内切酶系统显示减少的脱靶编辑活性并维持中靶编辑活性。
- 专利分类