[发明专利]一种高保真CRISPR/AsCpf1突变体的构建及其应用有效
| 申请号： | 201910766124.3 | 申请日： | 2019-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN110452893B | 公开（公告）日： | 2021-09-07 |
| 发明（设计）人： | 荣知立;林瑛;黄洪新;单琳 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 范盈 |
| 地址： | 510515 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高保真CRISPR/AsCpf1突变体的构建及其应用。所述AsCpf1突变体为对AsCpf1蛋白氨基酸序列的第951位精氨酸和/或第955位精氨酸进行突变，替换成不与靶位点DNA之间形成氢键的氨基酸，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1‑3所示。所述的AsCpf1突变体的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。所述的编码基因在构建CRISPR/AsCpf1基因编辑系统中的应用。一种CRISPR/AsCpf1基因编辑系统，含有编码AsCpf1蛋白的基因，所述AsCpf1蛋白为上述所述的AsCpf1突变体。CRISPR/AsCpf1基因编辑系统在基因编辑中降低脱靶效应中的应用。本发明构建的新型AsCpf1突变体既保留野生型AsCpf1的基因编辑效率，同时比野生型AsCpf1具有较高的特异性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高保真 crispr ascpf1 突变体 构建 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种AsCpf1突变体，其特征在于，所述AsCpf1突变体为对AsCpf1蛋白氨基酸序列的第951位精氨酸进行突变，替换成不与靶位点DNA之间形成氢键的氨基酸；/n或所述AsCpf1突变体为对AsCpf1蛋白氨基酸序列的第955位精氨酸进行突变，替换成不与靶位点DNA之间形成氢键的氨基酸；/n或所述AsCpf1突变体为对AsCpf1蛋白氨基酸序列的第951位精氨酸和第955位精氨酸进行突变，替换成不与靶位点DNA之间形成氢键的氨基酸。/n
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