[发明专利]用于LAMP扩增以检测HPV和分型的引物组合、试剂盒和方法有效
| 申请号： | 201910892226.X | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110607399B | 公开（公告）日： | 2022-11-01 |
| 发明（设计）人： | 聂泳忠;许万里;余桂荣;丘国富;马福军;李霜;孙齐 | 申请（专利权）人： | 西人马大周（深圳）医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12M1/34;G16B20/20;G16B30/10;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人： | 王鑫 |
| 地址： | 518052 广东省深圳市南山区招商街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于LAMP扩增以检测HPV和分型的引物组合、试剂盒和方法，其中，引物组合包括用于检测HPV感染的第一通用引物组和/或第二通用引物组，以及任意一组或者几组用于检测HPV亚型的特异性引物组HPV16E6、HPV18E6、HPV31E6、HPV33E7、HPV35E6、HPV39E6、HPV45E7、HPV51E6E7、HPV52E6E7、HPV56E6、HPV58E6、HPV59E6、HPV66E6、HPV68E6、HPV73E6E7，采用上述引物组合检测HPV的亚型，检测结果准确、稳定、可靠、灵敏度高，能够在短时间内对大量待测样品中HPV的亚型进行快速检测，效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 lamp 扩增 检测 hpv 引物 组合 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
1.用于LAMP扩增以检测HPV和分型的引物组合，其特征在于，包括用于检测HPV感染的第一通用引物组和/或第二通用引物组，以及任意一组或者几组用于检测HPV亚型的特异性引物组HPV16E6、特异性引物组HPV18E6、特异性引物组HPV31E6、特异性引物组HPV33E7、特异性引物组HPV35E6、特异性引物组HPV39E6、特异性引物组HPV45E7、特异性引物组HPV51E6E7、特异性引物组HPV52E6E7、特异性引物组HPV56E6、特异性引物组HPV58E6、特异性引物组HPV59E6、特异性引物组HPV66E6、特异性引物组HPV68E6、特异性引物组HPV73E6E7；/n所述第一通用引物组的正向外引物序列如SEQ ID No：1所示；反向外引物序列如SEQID No：2所示；正向内引物序列如SEQ ID No：3所示；反向内引物序列如SEQ ID No：4所示；/n所述第二通用引物组的正向外引物序列如SEQ ID No：5所示；反向外引物序列如SEQID No：6所示；正向内引物序列如SEQ ID No：7所示；反向内引物序列如SEQ ID No：8所示；/n所述特异性引物组HPV16E6的正向外引物序列如SEQ ID No：9所示；反向外引物序列如SEQ ID No：10所示；正向内引物序列如SEQ ID No：11所示；反向内引物序列如SEQ ID No：12所示；/n所述特异性引物组HPV18E6的正向外引物序列如SEQ ID No：13所示；反向外引物序列如SEQ ID No：14所示；正向内引物序列如SEQ ID No：15所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：16所示；/n所述特异性引物组HPV31E6的正向外引物序列如SEQ ID No：17所示；反向外引物序列如SEQ ID No：18所示；正向内引物序列如SEQ ID No：19所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：20所示；/n所述特异性引物组HPV33E7的正向外引物序列如SEQ ID No：21所示；反向外引物序列如SEQ ID No：22所示；正向内引物序列如SEQ ID No：23所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：24所示；/n所述特异性引物组HPV35E6的正向外引物序列如SEQ ID No：25所示；反向外引物序列如SEQ ID No：26所示；正向内引物序列如SEQ ID No：27所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：28所示；/n所述特异性引物组HPV39E6的正向外引物序列如SEQ ID No：29所示；反向外引物序列如SEQ ID No：30所示；正向内引物序列如SEQ ID No：31所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：32所示；/n所述特异性引物组HPV45E7的正向外引物序列如SEQ ID No：33所示；反向外引物序列如SEQ ID No：34所示；正向内引物序列如SEQ ID No：35所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：36所示；/n所述特异性引物组HPV51E6E7的正向外引物序列如SEQ ID No：37所示；反向外引物序列如SEQ ID No：38所示；正向内引物序列如SEQ ID No：39所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：40所示；/n所述特异性引物组HPV52E6E7的正向外引物序列如SEQ ID No：41所示；反向外引物序列如SEQ ID No：42所示；正向内引物序列如SEQ ID No：43所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：44所示；/n所述特异性引物组HPV56E6的正向外引物序列如SEQ ID No：45所示；反向外引物序列如SEQ ID No：46所示；正向内引物序列如SEQ ID No：47所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：48所示；/n所述特异性引物组HPV58E6的正向外引物序列如SEQ ID No：49所示；反向外引物序列如SEQ ID No：50所示；正向内引物序列如SEQ ID No：51所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：52所示；/n所述特异性引物组HPV59E7的正向外引物序列如SEQ ID No：53所示；反向外引物序列如SEQ ID No：54所示；正向内引物序列如SEQ ID No：55所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：56所示；/n所述特异性引物组HPV66E6的正向外引物序列如SEQ ID No：57所示；反向外引物序列如SEQ ID No：58所示；正向内引物序列如SEQ ID No：59所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：60所示；/n所述特异性引物组HPV68E6的正向外引物序列如SEQ ID No：61所示；反向外引物序列如SEQ ID No：62所示；正向内引物序列如SEQ ID No：63所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：64所示；/n所述特异性引物组HPV73E6E7的正向外引物序列如SEQ ID No：65所示；反向外引物序列如SEQ ID No：66所示；正向内引物序列如SEQ ID No：67所示；反向内引物序列如SEQ IDNo：68所示。/n
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- 本发明公开了一种基于微流体扩增和胶体金试纸条的非洲猪瘟病毒快检试剂盒，包括：试剂盒体，和设置在所述试剂盒体内部的微流体芯片，以及设置在所述试剂盒体内部的试纸条，其特征在于，所述微流体芯片包括：设置在所述试剂盒体顶部进液孔，以及通过连通管道依次连通在所述进液孔一侧的若干稀释腔室。在微流体芯片中，通过上锥筒顶部的直径和下锥筒底部的直径均大于连接筒的直径，上锥筒底部的直径和下锥筒顶部的直径均与连接筒的直径大小相同，进而形成锥形，液体流过时，在流动方向上会产生螺旋线的流动，降低流动时的压降，增大流速，缩短检测时间，并且提升了稀释液和样本液体的混合效率，从而保证了检测时的准确性，提高检测时的效率。
- 一种腹泻病毒多指标同检的嵌合引物、试剂盒及其使用方法-202211608975.3
- 丁小静;张倩;杨扬 - 江苏和创生物科技有限公司
- 2022-12-14 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供了一种用于腹泻病毒多指标同检的嵌合引物、试剂盒及其使用方法。
- 一种靶向检测血液中乙肝病毒前基因组RNA的检测体系和数字PCR检测方法-202310763370.X
- 王琪;费晶晶;余育超 - 苏州玄津生物科技有限公司
- 2023-06-27 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种靶向检测血液中乙肝病毒前基因组RNA的检测体系和数字PCR检测方法。检测体系包括：3对引物序列：HBV基因型B的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.1所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.2所示；HBV基因型C的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.3所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.4所示'；HBV基因型D的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.5所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.6所示。通过靶向富集乙肝治疗患者的血清中游离的乙肝病毒前基因组RNA，设计针对pgRNA的特异性引物和优化扩增反应体系，开发一种更加灵敏和精确定量监测慢乙肝治疗疗效和安全停药的血液pgRNA的检测试剂盒和诊断方法。
- 一种高危型人乳头瘤病毒分型检测的引物探针组及其应用、试剂盒及检测方法-202311031128.X
- 张森;李贵喜;李三华;谢夏;郭琴;王少辉;郭曙光;霍清园;李丹阳;张鑫;齐华 - 河南赛诺特生物技术有限公司
- 2023-08-15 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明涉及一种高危型人乳头瘤病毒分型检测的引物探针组及其应用、试剂盒及检测方法。本发明提供的试剂盒中包含特异性引物探针组，并对反应体系进行合理优化，保证了对高危型人乳头瘤病毒分型检测的灵敏度和特异性，使其更加贴合对受试者尿液样本的检测。试剂盒中包含的标准品可以辅助完成对人乳头瘤病毒高危型别进行分型定量检测，搭配不受采样手法的不同而影响质量的尿液样本，能保证细胞量维持在一个相对均衡的水平，使定量检测的结果更有意义。同时，本发明提供的检测方法能够对受检者体内HPV病毒进行定量检测，从而观察受检者体内在一定时间段内病毒型别与载量的变化情况，从而给予临床医生更多帮助，有利于医生出具针对性的治疗方案。
- 一种RT-qPCR检测黄瓜花叶病毒的方法-202311143956.2
- 刘艳梅 - 南昌师范学院
- 2023-09-06 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种RT‑qPCR检测黄瓜花叶病毒的方法，涉及生物技术领域。该方法包括以下步骤：(1)提取得到待检样品的总RNA，之后反转录得到cDNA；(2)以所述cDNA为模板，利用特异性引物对进行RT‑qPCR反应，根据Ct值判断所述待检样品中是否含有黄瓜花叶病毒：当15Ct值35时，为阳性，即为含有所述黄瓜花叶病毒；当Ct值≥35时，为阴性，即为不含有所述黄瓜花叶病毒。本发明针对黄瓜花叶病毒基因组编码外壳蛋白的基因保守区域，设计了特异性强的RT‑qPCR检测引物，并建立了一种高效的RT‑qPCR检测方法，可为黄瓜花叶病毒的准确高效监测防控提供了技术支持。
- 适用于15种植物检疫病毒的靶向测序建库及检测方法-202210150996.9
- 毛凌峰;孙凯;尹传林;俞晓平 - 杭州柏熠科技有限公司
- 2022-02-18 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供一种适用于15种植物检疫病毒的靶向测序建库及检测方法，设计针对15种植物检疫病毒的特异引物池，并将特异性多重反转录技术与纳米孔技术相结合，建立针对15种植物检疫病毒的靶向捕获测序方法，具备高灵敏度、高通量、低成本的优点，可实现单次建库测序检测15种植物检疫病毒的目标，可解决目前植物病毒检疫存在的检测通量低、检测目标单一的问题。
- 检测BK病毒的方法和组合物-201910529553.9
- F·陈;L·I·孔;J·陈;M·捷纳提保 - 焦点诊断公司
- 2006-07-25 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供了用于快速、灵敏和高度特异性地基于核酸(例如，基于DNA)检测样品中的BK病毒的方法和组合物。一般地，所述方法涉及检测具有BK病毒基因组保守区域的靶序列的靶核酸。本发明也表征了用于本发明方法的组合物和试剂盒，所述组合物包括引物、探针。
- 猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法及应用-202310790990.2
- 朱旭;郝鹏;张燕红;王艳杰;张海宝;韩冬;李晓燕;孟书丽;赵嘉楠;赵飞飞;高晓宇;吴孟楠;李培艳;燕成义;杨晶;乌恩宝音;海丽丽;段可欣 - 金宇保灵生物药品有限公司;金宇共立动物保健有限公司
- 2023-06-29 - 2023-10-20 - C12Q1/70
- 本发明涉及微生物检测技术领域，尤其涉及一种猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法及应用。所述猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法包括如下步骤：使用灭活剂处理猫杯状病毒液，得到灭活抗原液；使用透析袋去除所述灭活抗原液中的灭活剂，得到纯化灭活抗原；所述透析袋的规格为80‑200kd；所述透析袋的透析时间为5‑12h；测定所述纯化灭活抗原的毒价。所述方法通过透析袋透析灭活剂处理后的灭活抗原，能精准的控制灭活剂的处理时间，进而缩短灭活周期。且使用透析袋可以去除灭活剂残留，在进行灭活检验时，不会因为灭活剂残留而影响灭活结果的判定。本发明所述方法无需多次抗原传代，即可获得抗原的灭活检验结果。
- 引物组和探针、试剂盒、检测猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的方法-202311144718.3
- 刘志成;勾红潮;沈海燕;张春红;乌日尼乐;聂晶晶;瞿云芝;张建峰 - 广东省农业科学院动物卫生研究所
- 2023-09-06 - 2023-10-20 - C12Q1/70
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种引物组和探针，包含核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1‑6所示的FIP、BIP、F3、B3、LoopF和LoopB组成的引物组以及如SEQ ID NO：7‑8所示的荧光探针probe和淬灭探针Quencher，该引物组能够对猪流行性腹泻病毒野毒株、疫苗株均进行扩增，对于野毒株的ORF3基因保守区域开发出荧光引物，用于进行荧光的特征性反应，实现了对猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的高特异性、敏感性的快速定量检测。同时，本发明还提供了一种试剂盒、检测猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的方法。
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