[发明专利]ASFV-P54蛋白重组方法及利用其制备的夹心ELISA试剂盒在审
| 申请号： | 201911080865.2 | 申请日： | 2019-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN110684085A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 张志;官丽娟;宫枫举;邵钰;韩同福;李翠翠;孙学强 | 申请（专利权）人： | 青岛立见诊断技术发展中心 |
| 主分类号： | C07K14/01 | 分类号： | C07K14/01;C12N15/34;G01N33/569 |
| 代理公司： | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 彭友谊 |
| 地址： | 266114 山东省青岛市城阳区红岛经济区*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及ASFV‑P54蛋白重组方法及利用其制备的夹心ELISA试剂盒，属于病毒检测领域，所述方法利用的PCR扩增引物，引物序列如SEQ NO.1和SEQ NO.2；这对引物只能扩增p54基因截短的CDS区片段，扩增目的基因长度为552bp。利用所述方法制备的蛋白p54制备的非洲猪瘟病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒，包括含有以下组份，ASFV P54抗原包被板、ASFV阳性血清、ASFV阴性血清、20×洗涤液、酶标记的P54抗原、底物溶液A、底物溶液B和终止液。检测过程抗逆性强，检测时无需对血清样品进行稀释，检测时只需要直接加入待测血清样本50μL即可，大大节省了操作步骤。整个检测时间缩短为1个小时以内，提高了检测效率。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 制备 夹心ELISA 底物溶液 扩增 抗体检测试剂盒 非洲猪瘟病毒 抗原包被板 病毒检测 蛋白重组 目的基因 时间缩短 血清样本 血清样品 阳性血清 阴性血清 引物序列 对引物 抗逆性 酶标记 试剂盒 洗涤液 终止液 抗原 截短 稀释 组份 蛋白 基因 | ||
【主权项】：
1.ASFV-P54蛋白重组方法，其特征在于所述方法利用的PCR扩增引物，上游引物为：5'-CATATGATGGATTCTGAATTTTTTCA-3'；下游引物为：5'-AAGCTTTTACAAGGAGTTTTCTAGGT-3'，这对引物只能扩增p54基因截短的CDS区片段，扩增目的基因长度为552bp。/n
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