[发明专利]一种基于白蛋白的CRISPR/Cas9靶向递送系统的制备方法有效
申请号: | 202211630907.7 | 申请日: | 2022-12-19 |
公开(公告)号: | CN115844831B | 公开(公告)日: | 2023-09-26 |
发明(设计)人: | 江育虹;付秀娟;吴月;卓馨 | 申请(专利权)人: | 西南交通大学 |
主分类号: | A61K9/14 | 分类号: | A61K9/14;C12N15/85;C12N15/55;C12N15/65;A61K47/42;A61K47/62;A61K48/00;A61K38/46 |
代理公司: | 成都其知创新专利代理事务所(普通合伙) 51326 | 代理人: | 范忠华 |
地址: | 610000*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于白蛋白的CRISPR/Cas9靶向递送系统的制备方法,主要步骤是:首先构建CRISPR‑Cas9质粒;然后将人血清白蛋白水溶液、聚乙烯亚胺溶液、pCas9/PAR2混合,控制聚乙烯亚胺的氮与质粒的磷酸盐的氮磷比为16:1,涡旋数十秒,静置数十分钟;在搅拌条件下,向混合溶液中加入乙醇溶液,继续搅拌30分钟,再加入戊二醛溶液,搅拌30分钟;再向溶液中加入炎症靶向肽CBP,4℃搅拌过夜,使得CBP与白蛋白纳米粒充分的偶联;最后采用超滤管超滤纳米粒溶液,除去未结合的白蛋白、戊二醛、乙醇残留,得到TAP/pCas9‑PAR2。本发明的方法不需要将白蛋白HSA修饰成阳离子材料,仍能将外源基因转染进入细胞;具有靶向递送的作用,达到高效、安全地敲除目的基因。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 白蛋白 crispr cas9 靶向 递送 系统 制备 方法 | ||
【主权项】:
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