本发明公开一种金花茶的组培方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)外植体的消毒;(2)愈伤组织培养;(3)愈伤组织分化芽;(4)芽生根。本发明提供一种金花茶的组培方法,能降低繁殖的成本,生长周期短、繁殖率高、方便管理、利于工业化生产和自动化监控大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。
一种金花茶的组培方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)外植体的消毒:采摘5~7月份的金花茶叶,使用20~40%乐果乳剂稀释400~600倍液浸泡5~10min,取出后,放入超净工作台使用4%维生素C水溶液浸泡30min后,再用0.15%的HgCl2进行消毒20~30min,然后用无菌水冲洗3~5次,再用0.25%的HgCl2进行消毒20~30min,最后使用灭菌滤纸吸干金花茶叶表面的无菌水;(2)愈伤组织培养:使用解剖刀沿着金花茶叶的茎干位置横切出长15~18cm,宽10~15cm的叶条片,将叶条片放入已经装入愈伤组织培养基的培养皿中,轻压叶条片,在29~31℃下暗培养8~15天,而后转入26~28℃下进行8~15天的暗培养,获得金花茶愈伤组织;(3)愈伤组织分化芽:将上述得到的愈伤组织移置芽诱导培养基中,其中,芽诱导培养基的配方为MS+6~8g/L琼脂+25~29 g/L蔗糖+ 0.3~0.8mg/L 6~苄基嘌呤+0.8~1.5mg/L 萘乙酸,调节培养基的pH值为6.0~6.5,于25~28℃条件下,光暗培养30~45天后愈伤组织分化出芽;(4)芽生根:待步骤(3)中芽长至5~6cm时,将芽移置根诱导培养基中,其中,根诱导培养基的配方为MS+6~8g/L琼脂+25~29g/L蔗糖+0.8~2.5mg/L吲哚乙酸+0.5~1.5mg/L萘乙酸+0.8~1.5mg/L活性炭+0.8~1.5mg/L的硫酸亚铁,于25~28℃条件下,光暗培养20~30天,培养出幼苗,组培结束。
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