[发明专利]一种使流感病毒适应Vero细胞的方法在审
| 申请号： | 201880086578.X | 申请日： | 2018-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN111615399A | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 张译;Y·严;X·张;T·A·库顿 | 申请（专利权）人： | 依生生物制药（新加坡）私人有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61K39/145;C12N7/00;A61P31/16 |
| 代理公司： | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人： | 程伟;刘彬娜 |
| 地址： | 新加坡，*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 流感病毒 适应 vero 细胞 方法 | ||
【说明书】：
本公开提供一种使流感病毒适应Vero细胞的方法。所述方法包括用流感病毒感染Vero细胞，培养感染的Vero细胞，收获各代的流感病毒，其中一代流感病毒的感染剂量大于或等于上一代流感病毒的感染剂量。本公开还涉及一种组合物。所述组合物包含聚肌苷酸‑聚胞苷酸、至少一种抗生素或聚酰胺化合物、至少一种正离子、流感病毒和/或流感病毒抗原，其中所述流感病毒和/或流感病毒抗原通过Vero细胞适应的流感病毒产生。
技术领域
本申请涉及医疗领域，更特别地，涉及一种使流感病毒适应Vero细胞的方法。所述方法用于产生对Vero细胞适应的流感病毒。本申请还涉及一种组合物，所述组合物包含聚肌苷酸-聚胞苷酸(polyriboinosinic acid-polyribocytidylic acid,PIC)、至少一种抗生素或聚酰胺化合物、至少一种正离子、流感病毒和/或流感病毒抗原，其中所述流感病毒和/或流感病毒抗原通过Vero细胞适应的流感病毒产生。
背景技术
流感病毒感染是一种重大全球性呼吸道感染，导致大量的生命丧失。流感病毒包括甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒和丁型流感病毒。甲型流感病毒是引起重症呼吸道疾病和大流行死亡的主要毒性病原体。流感病毒感染的流行病学特征是快速爆发、迅速蔓延、宽宿主范围，以及任何年龄组的人群均易感。因此，需要提高流感疫苗的生产。
世界卫生组织(WHO)或疾病控制和预防中心(CDC)每年会提供鸡胚来源(ECE-来源)的流感病毒种子用于流感疫苗的生产。因此目前大多数流感疫苗是使用鸡胚生产的。这种传统的制备疫苗的方法费时且成本高。而且，鸡胚中的病原体易于造成交叉感染。
流感病毒的主要抗原血凝素(HA)，显现出高频的病毒变异性和重配。季节性流行的流感病毒在各季节可能彼此有所不同，需要流感病毒种子的定期替换。
由于WHO可以每年替换流感病毒种子，因此每年用于疫苗生产的流感病毒也可不同。在短时间内用鸡胚生产足够量的季节性疫苗是困难的。因此，解决疫苗的供应与需求的矛盾，开发抗原量需求低、施用途径简单、快速诱发强烈免疫应答的疫苗是极为紧迫的公共卫生课题。
Vero细胞系是WHO推荐用于人疫苗生产的唯一细胞系。Vero细胞用于人疫苗的生产已有数十年，已经成功的用于开发脊髓灰质炎疫苗和狂犬病疫苗。但ECE-来源的流感病毒在Vero细胞上不能生长至高的滴度。现有技术也没有提供可以使得ECE-来源的流感病毒快速适应Vero细胞的方法，更特别地，现有技术没有提供使ECE-来源的流感病毒传代5-10代即适应Vero细胞的方法。因此急需开发一种使流感病毒快速适应Vero细胞的方法。
美国专利申请US 20080187546 A1提供一种选择在组织培养细胞上生长的流感病毒以产生组织培养物适应的病毒分离株的方法。该方法包括首先将流感病毒连续稀释为多个流感病毒亚群，用所述流感病毒亚群感染组织培养细胞，选择产生细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)的具有低感染复数(multiplicity of infection,MOI)的亚群，从被具有低MOI的亚群感染的细胞收获流感病毒，用收获的流感病毒感染组织培养细胞，和重复步骤。该方法公开了在每次传代前对流感病毒进行连续稀释，以获取低MOI(小于0.01)，并通过观察CPE来确定下一代感染的剂量。这表示当确定下一代的感染剂量时，具有非常大的可变性。该方法也没有探索其中下一代的感染剂量大于或等于这一代的感染剂量的方法。同时，该方法使用流感病毒接触单层细胞，这仅产生少量流感病毒量(不足以用于大规模生产)。另外，该申请并未公开为获得对组织培养细胞适应的病毒的传代次数，或者没有公开该方法可以在5-10代内获得对组织培养细胞适应的病毒。美国专利申请US20080187546 A1的全部内容并入本文作为参考。
发明内容
根据本公开的一方面，提供一种使流感病毒适应Vero细胞的方法，所述方法包括：
-用第一感染剂量的流感病毒感染Vero细胞；
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- 本发明公开了一种全病毒纳米疫苗及其制备方法和应用，所述全病毒纳米疫苗包括壳聚糖‑苯二酚修饰的全病毒抗原。本发明的全病毒纳米疫苗粒径均匀(500nm)，分散性良好(PDI0.5)且结合稳定，在黏膜局部具有长效黏附性。所述全病毒纳米疫苗制备过程中不需要额外加入交联剂或其他化学试剂，最大程度的保证抗原的活性。本发明全病毒纳米疫苗滴鼻小鼠后显著提高了诱导的黏膜免疫sIgA抗体和诱导的血清IgG抗体水平，表明本发明的全病毒纳米疫苗可以诱导局部黏膜免疫与全身系统性免疫应答。
- 犬特应性皮炎的治疗-202310179224.2
- K·塔斯 - 礼蓝美国公司
- 2017-04-26 - 2023-09-05 - A61K39/12
- 本发明涉及犬特应性皮炎的治疗。本发明涉及用于预防或治疗犬特应性皮炎(CAD)的组合物、免疫原性或疫苗组合物和药物组合物。此外，本发明提供了用于预防或治疗CAD的方法。本发明的组合物在狗中诱导有效的免疫应答，特别是抗体应答，并因此可用于治疗和/或预防CAD。
- 编码嵌合冠状病毒刺突蛋白的重组载体及其用途-202180076316.7
- M·A·朗格雷斯;A·德格罗夫;P·维尔梅吉;B·J·博世 - 英特维特国际股份有限公司
- 2021-11-11 - 2023-09-01 - A61K39/12
- 本发明提供了编码嵌合冠状病毒刺突蛋白的重组载体。本发明进一步提供了包含这些重组载体的新的免疫原性组合物和疫苗。还包括将这些免疫原性组合物和疫苗施用于动物受试者(包括人、猫科动物和禽类)来保护它们对抗冠状病毒的方法。也提供了单独或与其他保护剂组合制备免疫原性组合物和疫苗的方法。
- 生产RSV F蛋白的细胞培养方法-202180078331.5
- S·H·布林;C·A·哈林顿;M·E·雅各布斯;J·A·洛特文;B·C·穆卢库特拉;D·斯特德;M·苏米特 - 辉瑞大药厂
- 2021-09-30 - 2023-08-25 - A61K39/12
- 本发明涉及在补料分批细胞培养中生产RSV F蛋白三聚体的方法。
- 含有含生育酚的角鲨烯乳剂佐剂的COVID-19疫苗-202180051942.0
- N·阿诺索娃;S·F·奥萨尔;C·贝瑞;F·布德特;T·布罗伊尔;D·卡西米罗;R·M·奇契;G·达亚安;G·德布鲁因;C·迪亚兹格拉纳多斯;傅东明;M·加里诺;L·格雷迪;S·古鲁纳坦;K·卡尔宁;N·赫拉姆佐夫;V·勒库蒂里耶;N·拉曼;S·鲁伊斯;S·萨瓦里诺;S·斯里达尔;I·K·斯里瓦斯塔瓦;J·塔尔塔利亚;T·蒂比茨 - 圣诺菲·帕斯图尔公司;葛兰素史密斯克莱生物股份有限公司
- 2021-08-23 - 2023-08-25 - A61K39/12
- 提供了用于预防性治疗SARS‑CoV‑2感染和COVID‑19的新型疫苗以及制造所述疫苗的方法，其中所述疫苗含有包含生育酚和角鲨烯的水包油乳剂。
- 专利分类
