[发明专利]KIR3DL1基因分型试剂盒和分型方法在审
| 申请号： | 202110199577.X | 申请日： | 2021-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN112725421A | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 郑仲征;杜可明;廖宽镇;贺青青;李岱阳 | 申请（专利权）人： | 深圳荻硕贝肯精准医学有限公司;上海荻硕贝肯医学检验所有限公司;上海荻硕贝肯生物科技有限公司;上海荻硕贝肯基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市恒程创新知识产权代理有限公司 44542 | 代理人： | 张小容 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市大*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | kir3dl1 基因 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种KIR3DL1基因分型试剂盒，其特征在于，包括：
扩增引物一，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；
扩增引物二，核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；
扩增引物三，核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；
扩增引物四，核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；
测序引物一，核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；
测序引物二，核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；
测序引物三，核苷酸序列如SEQ ID No.7所示；
测序引物四，核苷酸序列如SEQ ID No.8所示；
测序引物五，核苷酸序列如SEQ ID No.9所示；
测序引物六，核苷酸序列如SEQ ID No.10所示；
测序引物七，核苷酸序列如SEQ ID No.11所示；
测序引物八，核苷酸序列如SEQ ID No.12所示；
测序引物九，核苷酸序列如SEQ ID No.13所示；
测序引物十，核苷酸序列如SEQ ID No.14所示；
测序引物十一，核苷酸序列如SEQ ID No.15所示；
测序引物十二，核苷酸序列如SEQ ID No.16所示；
测序引物十三，核苷酸序列如SEQ ID No.17所示；
测序引物十四，核苷酸序列如SEQ ID No.18所示；
测序引物十五，核苷酸序列如SEQ ID No.19所示；以及
测序引物十六，核苷酸序列如SEQ ID No.20所示。
2.一种KIR3DL1基因分型方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)利用扩增引物一、扩增引物二、扩增引物三和扩增引物四，分别以基因组DNA为模板，进行PCR扩增，获得相应的扩增产物；
(2)利用测序引物一、测序引物二、测序引物三、测序引物四、测序引物五、测序引物六、测序引物七、测序引物八、测序引物九、测序引物十、测序引物十一、测序引物十二、测序引物十三、测序引物十四、测序引物十五和测序引物十六，分别对相应的所述扩增产物进行扩增，获得相应的测序扩增产物；
(3)对所述测序扩增产物测序，分析核苷酸序列中的SNP位点信息，将所述SNP位点信息与公共数据库比对，获得KIR3DL1的基因分型；
其中，所述扩增引物一的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述扩增引物二的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，所述扩增引物三的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述扩增引物四的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，所述测序引物一的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述测序引物二的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示，所述测序引物三的核苷酸序列如SEQID No.7所示，所述测序引物四的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示，所述测序引物五的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示，所述测序引物六的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示，所述测序引物七的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，所述测序引物八的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示，所述测序引物九的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示，所述测序引物十的核苷酸序列如SEQ ID No.14所示，所述测序引物十一的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示，所述测序引物十二的核苷酸序列如SEQ ID No.16所示，所述测序引物十三的核苷酸序列如SEQ IDNo.17所示，所述测序引物十四的核苷酸序列如SEQ ID No.18所示，所述测序引物十五的核苷酸序列如SEQ ID No.19所示，所述测序引物十六的核苷酸序列如SEQ ID No.20所示。
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- 2023-04-17 - 2023-09-08 - C12Q1/6858
- 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种间插Gibson组装的OE‑PCR扩增方法，在获取各基因片段后，将基因片段等比例混合进行Gibson组装，再直接以组装混合物作为模板进行第二轮PCR扩增；在前后两轮PCR之间插入一次Gibson组装过程，使得DNA片段在较为温和的条件下形成融合基因模板，以便在第二轮PCR中指数扩增。以克隆视网膜母细胞瘤基因定点突变为例验证了本发明的可行性。在三片段融合检测过程中，本发明组装物中出现完整的融合基因，作为PCR的良好模板，保证第二轮PCR扩增的顺利实现；将重叠延伸PCR与Gibson组装有机结合，能实现长基因或多基因片段的有效融合，以利于基因融合或定点突变。
- 一种基于荧光探针法检测基因突变的方法-202210780264.8
- 陈佳蕊;王转丽;王彦军 - 北京翔东智能科技有限公司
- 2022-07-04 - 2023-09-08 - C12Q1/6858
- 本发明涉及一种基于荧光探针法检测基因突变的方法，包括，步骤S1，将5μLPCR反应液，4μL检测液以及1μL样本配制待反应体系；步骤S2，将待反应体系加入荧光定量PCR仪按照预设参数进行扩增；步骤S3，中控单元获取的待反应体系在扩增第一阶段待反应体系的荧光强度不符合预设标准时，所述中控单元对第一复眼透镜和第二复眼透镜的间距进行调节；步骤S4，所述中控单元根据设置于待反应体系上的阵列透镜的质优度与预设质优度相比较，对第一复眼透镜和第二复眼透镜的间距和角度进行调节，以使光学检测单元各机构设置符合标准；步骤S5，中控单元根据待反应体系经过扩增第二阶段后的荧光信号判定其检测结果。
- 一种SMN1基因突变的检测方法及试剂盒-202010194634.0
- 丁春明;金胜男;金伟江 - 浙江中创生物医药有限公司
- 2020-03-19 - 2023-09-08 - C12Q1/6858
- 本发明提供了一种SMN1基因突变的检测方法及试剂盒，该方案是对当前临床上仅针对SMN1基因缺失型基因检测技术的补充。可有效筛查出携带有方案中涉及点突变位点的SMA患者和SMA点突变携带者。且本发明方案所应用的核酸飞行质谱平台通量高、可实现自动化检测，便于在临床展开大规模人群筛查，对于进一步实现SMA预防有很高的临床应用价值。
- 鉴定鳢的引物组合、微卫星标记组合、多重PCR体系及其方法和应用-202211728879.2
- 欧密;赵建;刘海洋;夏威威;罗青;张新铖;陈昆慈;费树站 - 中国水产科学研究院珠江水产研究所
- 2022-12-30 - 2023-09-05 - C12Q1/6858
- 本申请涉及鳢的微卫星标记及多重PCR体系的技术领域，具体涉及鉴定鳢的引物组合、微卫星标记组合、多重PCR体系及其方法和应用。该方法包括：利用来自乌鳢和斑鳢的候选微卫星标记得到候选卫星标记的微卫星引物，并利用乌鳢和斑鳢杂交子代的基因组DNA对引物进行筛选，依次得到第一引物组和第二引物组，根据第二引物组组建多重PCR反应体系。根据这些引物组合、微卫星组合或多重荧光反应体系，能够准确扩增出微卫星标记，节省了检测成本，并且能够为鳢亲子鉴定、个体鉴定、传多样性分析、亲缘关系鉴定、遗传图谱构建和种质资源保护的效果评估提供了技术手段，应用前景广阔。
- 一种用于指导癫痫药物使用的多重HLA分型检测方法-202310563362.0
- 邵炳;何群燕;陈志君 - 杭州盾恩医学检验实验室有限公司
- 2023-05-18 - 2023-08-29 - C12Q1/6858
- 本发明公开了一种用于指导癫痫药物使用的多重HLA分型检测方法，涉及基因工程技术领域，该多重HLA分型检测的具体步骤包括：步骤一、核酸提取；步骤二、HLA分型检测；步骤三、毛细管电泳测序；步骤四、检测结果分析；步骤五、检测结果判读。本发明为一种用于指导癫痫药物使用的多重HLA分型检测方法，其采用多重ARMS‑PCR检测，其特异性和灵敏度与qPCR相近，但可进行多个分型检测，与测序分型有相似的准确性，但通量高，且操作简单；降低了试剂检测成本，也为患者在进行癫痫药物选择中提供了强有力的判断依据。
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