[发明专利]核酸释放剂及其核酸释放方法在审
申请号: | 202111196322.4 | 申请日: | 2021-10-14 |
公开(公告)号: | CN113930418A | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
发明(设计)人: | 焦明超;董伟斌;倪晓龙 | 申请(专利权)人: | 杭州迪安生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人: | 倪杨 |
地址: | 311121 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 释放 及其 方法 | ||
1.核酸释放剂,其特征在于,包括0.5-1.5M Tris-HCl、30-70mM EDTA、0.5-1.5M半胱氨酸、10-30U/μL RRI、DEPC水以及体积百分比浓度为15-30%的NP-40、体积百分比浓度为3-7%的Poly A,其中RRI为RNA酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的核酸释放剂,其特征在于,由1M Tris-HCl、50mM EDTA、1M半胱氨酸、20U/μL RRI、DEPC水以及体积百分比浓度为25%的NP-40、体积百分比浓度为5%的Poly A组成。
3.根据权利要求1所述的核酸释放剂,其特征在于,PolyA作为核酸助沉剂,半胱氨酸与NP-40作为非离子活性剂来配合PolyA来释放核酸。
4.核酸释放方法,其特征在于,采用权利要求1到3任一所述的核酸释放剂,具体包括以下步骤:
将所述核酸释放剂平衡至室温后摇匀;
取摇匀后的所述核酸释放剂加入至PCR反应管;
再加入待测样本并吹打混匀得到目的核酸,其中所述核酸释放剂与所述待测样本的体积比为1:3。
5.根据权利要求4所述的核酸释放方法,其特征在于,所述待测样本包括全血、血清、血浆或分泌物。
6.根据权利要求4所述的核酸释放方法,其特征在于,所述目的核酸为DNA或RNA。
7.根据权利要求4所述的核酸释放方法,其特征在于,所述核酸释放剂的配制方法如下:
分别取1μL的1M Tris-HCl、0.4μL的50mM EDTA、0.2μL的半胱氨酸、0.2μL的体积百分比浓度为25%的NP-40、0.2μL的体积百分比浓度为5%的Poly A、0.04μL的20U/μL RRI及7.96μL的DEPC水充分混匀制成。
8.根据权利要求4所述的核酸释放方法,其特征在于,应用于核酸的PCR检测。
9.根据权利要求4所述的核酸释放方法,其特征在于,核酸释放剂释放的时间为1-3分钟。
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