[发明专利]使用不需要钙黏着蛋白受体的毒素遏制昆虫对苏云金芽孢杆菌CRY毒素的抗性

摘要

本发明涉及用于获得编码具有3个缺少α-1螺旋的结构域的Cry毒素(也称为Cry毒素、Bt毒素或δ-内毒素)的DNA构建体的方法。所述DNA构建体被修饰以编码可杀死对相应的未修饰的Cry毒素具有抗性的昆虫的蛋白质。本发明涉及修饰的3-结构域Cry毒素的基因的DNA构建体和修饰的3-结构域Cry蛋白质，以及方法、含有所述构建体的分子载体和宿主细胞，以及产生修饰的3-结构域Cry毒素的重组方法。此外，本发明涉及含有修饰的3-结构域Cry毒素的制剂。昆虫对未修饰的Cry毒素的抗性是由于毒素与昆虫肠中的受体的结合降低。更具体地，本发明涉及修饰的3-结构域Cry毒素的表达、表达所述修饰的3-结构域Cry毒素的方法、具有表达所述修饰的3-结构域Cry毒素的构建体的转化微生物和转基因植物以及遏制害虫对未修饰的Cry毒素的抗性的方法。

主权项

一种用于获得编码缺少α-1螺旋的修饰的3-结构域Cry毒素的DNA构建体的方法，其中所述编码的修饰的3-结构域Cry毒素能够杀死合格的抗性昆虫、遏制它们的抗性，所述方法由下列步骤组成：a)选择3-结构域Cry毒素的编码基因作为靶标；b)鉴定启动子区，分别的未修饰毒素的从α-2螺旋至β-23折叠的蛋白质片段的修饰区域、α-1螺旋的编码区和原毒素的C-末端编码区，如果其存在于所选择的3-结构域Cry毒素中的话；c)扩增不包括α-1螺旋编码区的基因构建体。