[发明专利]鳜鱼脑细胞系的构建方法有效
申请号: | 201310202902.9 | 申请日: | 2013-05-27 |
公开(公告)号: | CN103275925A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 付小哲;李宁求;吴淑勤;罗霞;赖迎迢;石存斌 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12R1/91 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 张萍 |
地址: | 510380 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了鳜鱼脑细胞系的构建方法,针对鳜鱼脑组织细胞的特征,采用含血清胶原酶消化法分离脑组织细胞,进行原代培养,继而成功构建了鳜鱼脑细胞系,可提供大量的鳜鱼脑来源细胞,且传代细胞能维持良好的生长状态。本发明所构建的脑细胞系的构建方法重复性强,为分子细胞水平上开展鱼类病毒感染途径、感染机理以及研制病毒疫苗等研究提供了便利。 | ||
搜索关键词: | 鳜鱼 脑细胞 构建 方法 | ||
【主权项】:
鳜鱼脑细胞系的构建方法,包括以下步骤:1)脑组织的处理:取鲜活鳜鱼,无菌条件下剖取鳜鱼脑组织,剪成50~100立方毫米的组织块;2)原代培养:将组织块放入含血清的胶原酶消化液中消化4~6小时,离心收集经消化处理的组织细胞悬液,加入鳜鱼脑细胞专用增殖培养液重悬后,于25~28℃培养箱中培养,每3~5天半量更换培养液一次;3)传代培养:原代培养细胞长成单层后,加入胰蛋白酶消化,然后用鳜鱼脑细胞专用增殖培养液悬起细胞,按1瓶传2瓶的方式进行传代培养。
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