[发明专利]一种来自乳酸菌重组的β-葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法在审
| 申请号： | 201510658194.9 | 申请日： | 2015-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN105255970A | 公开（公告）日： | 2016-01-20 |
| 发明（设计）人： | 全林虎;李东浩;仲飞亮;董微巍 | 申请（专利权）人： | 延边大学 |
| 主分类号： | C12P19/56 | 分类号： | C12P19/56 |
| 代理公司： | 延边科友专利商标代理有限公司 22104 | 代理人： | 柳明哲 |
| 地址： | 133000 吉林省延边朝*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种来自乳酸菌重组的β-葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法，包括下列步骤：构建泡菜乳酸菌基因组Fosmid文库、筛选产β-葡萄糖苷酶阳性克隆子、分离转化成稀有皂苷compound K糖苷酶基因、IPTG诱导过表达、研究重组酶Bgy1的特性、分析gypenoside XVII转化途径。在最适条件下，6 h内可将1.0mg mL−1 gypenoside XVII与0.1mg mL−1 Bgy1生成0.58mg mL−1 compound K，转化率为89%。本发明反应条件温和，时间短，对环境污染少，转化率高，可实现人参皂苷compound K的工业化生产，满足医疗保健等行业对人参皂苷compound K的需要。（图3）。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 来自 乳酸菌 重组 葡萄 糖苷酶 制备 稀有 人参 皂苷 compound 方法 | ||
【主权项】：
一种来自乳酸菌重组的β‑葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法，包括下列步骤：① 构建泡菜乳酸菌基因组Fosmid文库；② 筛选产β‑葡萄糖苷酶阳性克隆子；③ 分离转化成稀有皂苷compound K糖苷酶基因；④ PCR扩增推测的糖苷酶基因bgy1，纯化和限制性内切酶处理，与表达载体pMAL‑c5X连接，转入到大肠杆菌后，经IPTG诱导过表达；⑤ 研究重组酶Bgy1的特性；⑥ 分析gypenoside XVII转化途径，与重组酶Bgy1反应生成稀有人参皂苷compound K。
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