[发明专利]CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-2基因的方法及用于特异性靶向SLA-2基因的sgRNA在审
申请号: | 201580000473.4 | 申请日: | 2015-06-11 |
公开(公告)号: | CN105518134A | 公开(公告)日: | 2016-04-20 |
发明(设计)人: | 蔡志明;牟丽莎;陆赢;谢崇伟;高汉超;刘璐;陈鹏飞;张军方 | 申请(专利权)人: | 深圳市第二人民医院 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/867 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 孙银行;彭愿洁 |
地址: | 518037 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种运用CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-2基因的方法及用于特异性靶向SLA-2基因的sgRNA。本发明的特异性靶向SLA-2基因的sgRNA在SLA-2基因上的靶序列符合5’-N(20)NGG-3’的序列排列规则,其中N(20)表示20个连续的碱基,其中每个N表示A或T或C或G;在SLA-2基因上的靶序列位于SLA-2基因的N端的5个外显子编码区或与相邻内含子的交界处;在SLA-2基因上的靶序列是唯一的。本发明的sgRNA用于CRISPR-Cas9特异性敲除猪SLA-2基因的方法中,能够快速、精确、高效、特异性地敲除猪SLA-2基因,有效地解决构建SLA-2基因敲除猪周期长和成本高的问题。 | ||
搜索关键词: | crispr cas9 特异性 sla 基因 方法 用于 靶向 sgrna | ||
【主权项】:
在CRISPR‑Cas9特异性敲除猪SLA‑2基因中用于特异性靶向SLA‑2基因的sgRNA,其特征在于:(1)所述sgRNA在SLA‑2基因上的靶序列符合5’‑N(20)NGG‑3’的序列排列规则,其中N(20)表示20个连续的碱基,其中每个N表示A或T或C或G,符合规则的靶序列可以位于正义链或反义链;(2)所述sgRNA在SLA‑2基因上的靶序列位于SLA‑2基因的N端的5个外显子编码区,或序列的主要部分位于SLA‑2基因的N端的5个外显子,其余部分跨越与相邻内含子的交界,位于相邻内含子;(3)所述sgRNA在SLA‑2基因上的靶序列是唯一的。
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