[发明专利]从酶制剂废水中提取维生素B12的方法有效

专利信息
申请号: 201810103222.4 申请日: 2018-02-01
公开(公告)号: CN108251476B 公开(公告)日: 2021-09-07
发明(设计)人: 李洪兵;李勇其;周玉明;周秋华;宋毅 申请(专利权)人: 湖南鸿鹰生物科技有限公司
主分类号: C12P19/42 分类号: C12P19/42;C12R1/645
代理公司: 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 代理人: 栗华楠
地址: 415000 湖南省常德*** 国省代码: 湖南;43
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 本公开提供了一种从酶制剂废水中提取维生素B12的方法,属于微生物发酵技术领域,能够将酶制剂废水作为VB12源来提取VB12,降低了VB12的生产成本,实现了酶制剂废水的综合利用。本发明所述方法包括:获取好食脉孢菌发酵工艺的发酵液、将所得发酵液进行酶制剂的絮凝、酶制剂的压滤、酶制剂的提取、维生素B12的提取分离。该方法VB12的收率高,用于从酶制剂废水中提取VB12。
搜索关键词: 酶制剂 水中 提取 维生素 b12 方法
【主权项】:
1.一种从酶制剂废水中提取维生素B12的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)获取好食脉孢菌发酵工艺的发酵液;2)酶制剂絮凝工艺:将发酵液压入絮凝罐后,加入絮凝剂组合物,混合均匀,然后补加一定量的水,使预处理后的溶液总体积为发酵液体积的1~2倍,其中所述絮凝剂组合物的成分及重量比为苯甲酸钠0.1~0.12%、硅藻土2.5~3.0%、珍珠岩3.0~4.5%;3)酶制剂压滤工艺:用PH 1.5~1.8的稀H2SO4溶液调节PH在2.8~3.2,搅拌反应1.5~2小时后,进入板框压滤机过滤;4)酶制剂的提取:经膜截留分子量为10000的超滤膜过滤处理,被超滤膜截留的浓缩液为酶制剂,透过超滤膜的废水用于维生素B12的提取分离;5)维生素B12的提取分离第一吸附:将步骤4)酶制剂的提取中透过超滤膜的废水用弱酸性阳离子树脂50柱吸附,然后用15%氨水进行解析,得到第一解析液;解析液板框过滤:第一解析液调节pH值后,加黄血盐升温进行转化,再次调节PH值;然后过板框进行过滤,取滤液,记为第三滤液;浓缩:第三滤液经升膜蒸发器浓缩,浓缩液降温3~5℃;第二吸附:浓缩液用纯化水稀释至12000‑15000ug/ml经阴离子树脂脱色除杂后,用1:1冰醋酸调节pH值;第三吸附:经大孔树脂吸附,然后用45%丙酮解析。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于湖南鸿鹰生物科技有限公司,未经湖南鸿鹰生物科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201810103222.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种提升黏着剑菌发酵生产VB12-202310695359.4
  • 王泽建;赵杜娟;栗波;张悦;庄英萍 - 华东理工大学
  • 2023-06-13 - 2023-09-08 - C12P19/42
  • 本发明公开了一种提升黏着剑菌发酵生产VB12生物合成速率的方法,属于生物发酵领域。该方法包括在黏着剑菌发酵期间补加葡萄糖酸钠或者葡萄糖酸钠和葡萄糖的混合组分的步骤。本发明在黏着剑菌摇瓶分批发酵培养过程中,以5g/L补加模式分批多次补加累计总量为15g/L葡萄糖酸钠,能有效促进黏着剑菌合成维生素B12,糖转化率提高20.2%;在发酵罐连续补料分批发酵实验条件下,当补料碳源中葡萄糖和葡萄糖酸钠添加比例为16:1时效果最好,VB12生物合成量高达331.3±5.6mg/L,转化效率能达到1.53±0.13mg/g,该方法能够稳定产物的合成速率,大幅度降低生产成本。
  • 一种维生素B12-201911365295.1
  • 卢正东;陈情;雷华;夏炜铠;肖其磊 - 湖北广济药业股份有限公司
  • 2019-12-26 - 2023-04-07 - C12P19/42
  • 本发明涉及生物制药技术领域,特别是涉及一种B12发酵补料培养基及补料方法,提供可维持发酵中后期菌体生长繁殖并持续合成维生素B12的发酵补料培养基及补料方法。通过在不同发酵阶段进不同的补料,在不同阶段将总糖、甜菜碱、溶氧量、甘氨酸控制到到最适宜的含量,平衡发酵中后期菌体生和代谢关系,充分改善菌体老化发空现象,提高发酵单位;解除底物抑制、产物反馈抑制和分解代谢物的阻遏;避免一次投料过多造成细胞大量生长所引起的一切影响,改善发酵液流变学性质。
  • 一种利用豆腐黄浆水发酵生产维生素B12的方法-202210902182.6
  • 麻志刚 - 金菜地食品股份有限公司
  • 2022-07-29 - 2022-10-25 - C12P19/42
  • 本发明公开了一种利用豆腐黄浆水发酵生产维生素B12的方法,属于维生素B12生产技术领域,包括以下步骤:(1)黄浆水预处理;(2)培养基制备;(3)种子培养;(4)发酵生产。本发明通过利用豆腐黄浆水发酵生产维生素B12,是通过合理的工艺处理达到了工业生产的要求,进一步提高了大豆产业副产物的附加值,在充分利用黄浆水的同时也实现了节能减排,符合绿色环保的可持续发展的要求,通过对黄浆水的二次利用,大大减少了黄浆水的排放,具有很好的使用及推广价值。
  • 一种脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12-201911370243.3
  • 卢正东;陈情;夏炜铠;雷华;尹露露 - 湖北广济药业股份有限公司;湖北普信工业微生物应用技术开发有限公司
  • 2019-12-26 - 2020-06-09 - C12P19/42
  • 本发明涉及生物制药技术领域,特别是涉及一种脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12高产菌株的筛选方法和筛选培养基。本发明所提供的脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12高产菌株筛选培养基逐渐变化配方成分,使用该培养基可以使菌株的生命活性逐渐恢复,回复菌株生产活性,使菌株更能适应于发酵生产,避免了菌株活化不足,生产能力降低的问题,而且该筛选培养基中不含抗生素。避免造成抗生素污染的同时,又可以很好的筛选出高产维生素B12菌株,保证用于发酵生产的菌株能力不断趋于最高最强,提高了发酵生产水平,还避免了菌株突变,导致发酵生产单位突然降低,生产成本上升的问题。
  • 一种维生素B12的发酵法生产方法-201910746320.4
  • 金鹏 - 南京牧奇亚生物科技有限公司
  • 2019-08-13 - 2019-10-22 - C12P19/42
  • 本发明公开了一种维生素B12的发酵法生产方法,其包括如下步骤:步骤1)制备谢氏丙酸杆菌液;步骤2)制备悬浮发酵菌落;步骤3)制备发酵培养基;步骤4)混合悬浮发酵菌落与发酵培养基;步骤5)厌氧发酵生产维生素B12;步骤5)离心洗涤过滤悬浮载体;步骤6)提取和纯化;本发明创造性地使用悬浮生物填料技术,用于谢氏丙酸杆菌的附着,使其在发酵培养基中悬浮,与发酵培养基中的营养液充分接触,大大提高赖氨酸的生产效率,由于发酵温度相对较低,悬浮生物填料不会受温度影响而产生有害物质进入发酵液中,保证了维生素B12的生产安全性;2.本发明进一步利用超声处理和酶处理进一步提高发酵培养基均匀性和一致性,提高谢氏丙酸杆菌的生产效率。
  • 一种提高脱氮假单胞杆菌产维生素B12的方法-201910238608.0
  • 刘瑞艳;马杰希;刘伟;张彩霞;寇凤雨 - 山东泓达生物科技有限公司;山东昆达生物科技有限公司
  • 2019-03-27 - 2019-06-04 - C12P19/42
  • 本发明涉及生物发酵技术领域,尤其是一种提高脱氮假单胞杆菌产维生素B12的方法。本发明的一种提高脱氮假单胞杆菌产维生素B12的方法,通过经大量实验优化的母瓶培养基、摇瓶培养基和补料培养基,在最优发酵条件下培养维生素B12的生产菌株;发酵过程前期的0‑39h内控制温度在一个相对较低的水平,即26‑30℃,从而控制菌种处于合适的生长速率和保持良好的菌形;在发酵过程中后期提高并维持发酵体系温度在一个的相对较高的水平,即30‑34℃,以促进菌体生长、维生素B12合成的启动和积累,进而使发酵结束后,维生素B12发酵单位高达198mg/L,不仅提高了维生素B12的产量和生产效率,而且节约能耗、降低成本。
  • 一种促维生素B12发酵的组合物及其应用-201811232188.7
  • 陈凯庆;马杰希;张杰;阮国祥 - 山东泓达生物科技有限公司
  • 2018-10-22 - 2019-02-12 - C12P19/42
  • 本发明涉及维生素B12的制备领域,具体涉及一种促维生素B12发酵的组合物及其应用。该种促维生素B12发酵的组合物,主要由如下质量分数的原料组成:复合前体1‑1.55%、复合氨基有机酸2‑10%、复合菌体水解液30‑40%和自来水50‑70%。本发明的一种促维生素B12发酵的组合物及其应用,解决了发酵不稳、产量低问题,极大的提高了发酵产量,实现了能耗降低、清洁生产的目的,在将促维生素B12发酵组合物应用到维生素B12发酵过程中时,在发酵过程中不断补加促发酵组合物,保证了发酵过程中各种营养成分的供应,保证了发酵效果,有效提高了维生素B12的发酵产量。
  • 多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12-201810880607.1
  • 胡勇干;王鑫;刘延茂;李会 - 广济药业(孟州)有限公司
  • 2018-08-04 - 2018-12-07 - C12P19/42
  • 本发明属于生物发酵技术领域,公开了多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12,将脱氮假单胞杆菌菌株在发酵培养基中发酵培养,发酵培养基中含有:蔗糖70~85g/L、玉米浆40~55g/L、甜菜碱10~20g/L、生长素0.02~0.05g/L、色氨酸0.01~0.05g/L和谷氨酰胺0.05~0.1g/L等,发酵的0‑25h,搅拌转速为150‑280rpm,发酵的26‑90h,搅拌转速为300‑400rpm,发酵的91‑185h,搅拌转速为100‑200rpm;从发酵液中分离纯化出维生素B12。通过对搅拌转速和发酵培养基组分的控制,提高维生素B12的产量。
  • 一种基于溶氧调控的提高维生素B12产量的方法-201810848734.3
  • 张广勇;杨明玉;王鑫;李会 - 广济药业(孟州)有限公司
  • 2018-07-28 - 2018-11-30 - C12P19/42
  • 本发明属于生物发酵技术领域,公开一种基于溶氧调控的提高维生素B12产量的方法:1)在适合发酵的条件下,培养维生素B12的生产菌株,培养基为:蔗糖70~85g/L、玉米浆45~60g/L、磷酸二氢钾0.4~0.7g/L、氯化钴0.06~0.08g/L、甜菜碱10~20g/L、精氨酸0.0005~0.002g/L和硫胺素0.00005~0.0003g/L;发酵前期搅拌速率控制在250‑400rpm,通气速率1.2‑2LPM,发酵中后期搅拌速率控制在100‑200rpm,通气速率0.5‑1LPM;2)从发酵液中分离纯化出维生素B12。通过对溶氧量及发酵液中物料添加量的控制,提高维生素B12的产量。
  • 一种基于pH值控制的脱氮假单胞杆菌生产维生素B12的方法-201810880608.6
  • 张广勇;刘延茂;余菊;杨辉 - 广济药业(孟州)有限公司
  • 2018-08-04 - 2018-11-30 - C12P19/42
  • 本发明属于生物发酵技术领域,公开一种基于pH值控制的脱氮假单胞杆菌生产维生素B12的方法,包括:将维生素B12的生产菌株脱氮假单胞杆菌接种到发酵培养基中,在温度为25~30℃的条件下发酵,发酵培养基的组成:甘蔗糖蜜70~85g/L、酵母膏90~110g/L、5,6‑二甲基苯并咪唑0.05~0.2g/L、甘油磷酸0.1~1g/L、氯化钴0.05~2g/L、尿素0.05~0.2g/L、甜菜碱10~30g/L、精氨酸0.05~0.2g/L和硫胺素0.01~0.5g/L等;以甘蔗糖蜜和尿素控制发酵液的pH为7;从发酵液中分离纯化维生素B12。通过对发酵过程中的pH进行控制,提高维生素B12的产量。
  • 利用瘤胃液生产维生素B12的稻草发酵培养基及其方法和应用-201611181285.9
  • 王在贵;孙玲红;徐双贵 - 安徽省新康饲料有限公司
  • 2016-12-20 - 2018-06-01 - C12P19/42
  • 本发明公开了本发明提供了一种利用瘤胃液生产维生素B12的稻草发酵培养基及其方法和应用,所述稻草发酵培养基包括干稻草粉和特制的营养盐溶液,该发明利用反刍动物瘤胃的生理特点,利用瘤胃液中的微生物菌群,在特质的营养盐溶液下,来发酵稻草粉,获得富含维生素B12的发酵饲料。与维生素B12的传统生产相比,本发明生产的维生素B12不需要提纯,可以在发酵饲料中直接使用,简化了生产工艺。同时该发明将稻草秸秆转化为可被动物直接利用的营养物质,原料来源广泛,变废为宝,降低了生产成本,保护了环境。
  • 用于在浮萍中生产维生素B12的装置和方法-201680039338.5
  • 乌拉底米尔·格鲁克曼;埃胡德·艾利托夫 - 海诺曼有限公司
  • 2016-05-02 - 2018-04-17 - C12P19/42
  • 本发明涉及用于生产富含维生素B12的浮萍细菌培养物(DBC)组合物的系统和方法。上述方法包括以下步骤在一定体积的生长培养基中接种至少一种浮萍亚科(Lemnoideae)物种和至少一种产生维生素B12的细菌物种;在预定条件下孵育所述至少一种浮萍亚科物种和所述至少一种产生维生素B12的细菌物种以提供浮萍细菌培养物(DBC);确定图表中以具有最高维生素B12含量的DBC为特征的时间间隔;并以所述预先确定的时间间隔收获所述DBC,由此提供富含维生素B12的DBC组合物。本发明进一步公开包含富含维生素B12的浮萍细菌培养物(DBC)的组合物,其中所述组合物包含至少一种浮萍亚科物种和至少一种产生B12的细菌物种,并且其中所述组合物中的所述维生素B12含量在每100g所述DBC约0.01μg至约100μg之间的范围。
  • 维生素B12发酵过程优化与放大的方法与装置-201510176693.4
  • 庄英萍;张嗣良;李昆太;刘东洪;储炬;王永红;黄明志;杭海峰 - 华东理工大学
  • 2008-09-11 - 2015-07-22 - C12P19/42
  • 本发明提供一种维生素B12发酵过程优化与放大的方法与装置,具体包括对使用生物反应器装置的发酵过程进行优化放大的方法,所述方法包括步骤:(a)测定所述生物反应器装置的所述发酵过程中的生理代谢参数、生理代谢参数相关特性或其组合;其中所述生理代谢参数选自:溶氧、摄氧率、pH、二氧化碳释放率、呼吸商、活细胞量或细胞形态、测定的代谢产物或基质消耗、或其组合;(b)将步骤(a)测定的所述生理代谢参数、生理代谢参数相关特性与预定值的生理代谢参数、生理代谢参数相关特性或其组合进行比较;选出与所述预定值最为接近的生物反应器装置;确定优化的放大生物反应器装置;其中所述生理代谢参数如步骤(a)所述。
  • 一种维生素B12的制备方法-201310046879.9
  • 冯胜利;牛瑞昕 - 冯胜利
  • 2010-02-05 - 2013-05-15 - C12P19/42
  • 本发明涉及一种发酵法制备维生素B12的方法,包括发酵、水解、过滤、氰化物转化、结晶、干燥等过程,尤其是氰化物转化过程所用的氰基化合物为铁氰络合物,其反应浓度为200-4000ug/ml,且反应体系的PH值为3.0-8.0,反应温度为50-120℃,反应时间为0.5-6小时。本发明制备方法克服了目前普遍使用NaCN转化维生素B12所存在的环境污染、工艺复杂、生产成本高、转化收率低等一系列的缺点。
  • 一种维生素B12复合发酵助剂及其在维生素B12发酵中的应用方法-201210229843.X
  • 马兴群;吕丽娟;吴宝强;宋琦 - 潍坊祥维斯化学品有限公司
  • 2012-07-04 - 2012-10-10 - C12P19/42
  • 本发明公开了一种维生素B12复合发酵助剂及其在维生素B12发酵中的应用方法,包含以下质量百分比的组分:90~98%的甜菜碱、0.15~0.55%的复合维生素和1.45~9.85%的复合氨基酸;所述复合维生素包含质量百分比30~55%的硫胺素、10~25%的盐酸吡哆醇和40~55%的叶酸;所述复合氨基酸包含质量百分比5~10%的赖氨酸、10~15%的丝氨酸、10~15%的谷氨酸、30~35%的天冬酰胺和30~40%的天冬氨酸。将复合发酵助剂添加到发酵中的维生素B12中,保证了发酵过程中各种营养成分的供应,有效提高了维生素B12的发酵产量。
  • 一种使用素食材料生成维生素B12的方法-201110458021.4
  • 潘玉琼;慕容健昌;陈嘉欣 - 北京师范大学-香港浸会大学联合国际学院;潘玉琼
  • 2011-12-31 - 2012-07-04 - C12P19/42
  • 本发明涉及一种使用素食材料生成维生素B12的方法,其包括以下步骤:将能代谢淀粉或多糖为单糖的食用发酵真菌的菌株接种到大豆混合物的凝结物的表面,并在室温有氧条件下发酵培养至长满菌丝;将费氏丙酸杆菌的菌株接种到所述大豆混合物的凝结物的表面,并在室温低氧的环境条件下,发酵培养至产生维生素B12。利用多种微生物在全素食材料中发酵制造维生素B12,可为长期素食者,无论其素食的原因是宗教信仰,还是潮流推动,带来的是全素及纯天然含维生素B12的食品。
  • 脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12的培养基及发酵方法-201110419838.0
  • 任勇;冷晓红;王友善;奇乃;董媛 - 宁夏多维药业有限公司
  • 2011-12-15 - 2012-05-16 - C12P19/42
  • 本发明涉及一种脱氮假单胞菌发酵生产维生素B12的培养基及发酵方法及利用其生产维生素B12的方法,该培养基包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基,其特征在于上述一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基中均含有人工糖蜜,该人工糖蜜是由麦芽糖、硫胺素、核黄素和生物素组成。本发明通过采用由麦芽糖、硫胺素、核黄素和生物素组成的人工糖蜜替代甜菜糖蜜,优化其培养基配方,从而解决了因甜菜糖蜜质量不稳定导致发酵效价波动范围大的问题,并获得了一种稳定、有效地生产维生素B12的方法。本发明节约了原辅料用量,降低综合成本,减少废水排放。
  • 基于氧消耗速率的维生素B12发酵生产控制工艺-200910196035.6
  • 张嗣良;王泽建;王慧媛;储炬;庄英萍 - 华东理工大学
  • 2009-09-22 - 2011-04-20 - C12P19/42
  • 本发明提供了一种基于氧消耗速率的维生素B12发酵生产控制工艺。具体地,本发明提供了一种生产维生素B12的发酵方法,包括步骤:(a)在发酵过程前期维持发酵体系的高水平的氧消耗速率,从而促进菌体生长和维生素B12合成的启动;(b)在发酵过程的中后期降低并维持发酵体系的低水平的氧消耗速度;和(c)从发酵液中分离纯化出维生素B12。本发明方法可明显提高维生素B12产率,降低底物消耗,同时降低单位能耗,可大幅降低生产成本,具有工艺控制简单、可操作性强、节约能源等特点。
  • 维生素B12发酵过程优化与放大的方法与装置-200810042761.8
  • 庄英萍;张嗣良;李昆太;刘东洪;储炬;王永红;黄明志;杭海峰 - 华东理工大学
  • 2008-09-11 - 2010-07-14 - C12P19/42
  • 本发明提供一种对使用生物反应器装置的发酵过程进行优化放大的方法,所述方法包括步骤:(a)测定所述生物反应器装置的所述发酵过程中的生理代谢参数、生理代谢参数相关特性或其组合;其中所述生理代谢参数选自:溶氧、摄氧率、pH、二氧化碳释放率、呼吸商、活细胞量或细胞形态、测定的代谢产物或基质消耗、或其组合;(b)将步骤(a)测定的所述生理代谢参数、生理代谢参数相关特性与预定值的生理代谢参数、生理代谢参数相关特性或其组合进行比较;选出与所述预定值最为接近的生物反应器装置;确定优化的放大生物反应器装置;其中所述生理代谢参数如步骤(a)所述。
  • 一种维生素B12的制备方法-201010106076.4
  • 冯胜利;牛瑞昕 - 冯胜利
  • 2010-02-05 - 2010-06-16 - C12P19/42
  • 本发明涉及一种发酵法制备维生素B12的方法,包括发酵、水解、过滤、氰化物转化、结晶、干燥等过程,尤其是氰化物转化过程所用的氰基化合物为铁氰络合物,其反应浓度为200-4000ug/ml,且反应体系的pH值为3.0-8.0,反应温度为50-120℃,反应时间为0.5-6小时。本发明制备方法克服了目前普遍使用NaCN转化维生素B12所存在的环境污染、工艺复杂、生产成本高、转化收率低等一系列的缺点。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top