[发明专利]一种用于单细胞核测序的棉花根部单细胞核悬液制备的方法

摘要

本发明涉及一种用于单细胞核测序的棉花根部单细胞核悬液制备的方法，该方法包括将棉花种子置于蛭石沙土纸杯中萌发生长，生长至种子第一片真叶展开时，去除侧根，取下胚轴以下的主根部分获得根部组织；取根部组织置于冰上的培养皿中，加入一定量切割缓冲液，用刀片多次切割根部组织释放细胞核，获得粗细胞核悬液；收集培养皿中的粗细胞核悬液，通过尼龙膜过滤，加入荧光染料进行标记，分选后离心，丢弃上清，收集沉淀使用细胞核保存液进行重悬。通过本发明的方法能够获得高质量的棉花根部单细胞核悬液，完全满足单细胞核测序的上机要求，一定程度上解决了棉花真叶期根部细胞核释放的困难，对于棉花的遗传发育研究和育种进程的加快至关重要。