[发明专利]一种人的苯乙肼裂解酶突变蛋白及其应用在审
| 申请号： | 201711226536.5 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN109837264A | 公开（公告）日： | 2019-06-04 |
| 发明（设计）人： | 张耀洲;吴玉乾;冯建华;李冬梅;张树军;胖铁良;陈玉皎;王文雅 | 申请（专利权）人： | 天津市湖滨盘古基因科学发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;C12N15/57;C07K16/40;G01N33/574;G01N33/573 |
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| 地址： | 300300 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 突变蛋白 苯乙肼 裂解酶 癌症 单克隆抗体 基因检测 基因芯片 基因诊断 制备 应用 诊断 治疗 分析 发现 研究 | ||
1.一种人的苯乙肼裂解酶突变蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
3.一种基因芯片，其特征在于，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据所述人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的核苷酸序列，与人的苯乙肼裂解酶正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。
4.根据权利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。
5.一种特异性识别人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的单克隆抗体，其特征在于，其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。
6.一种用于检测人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述ELISA试剂盒包括：包被有权利要求5所述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的苯乙肼裂解酶蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。
7.根据权利要求6所述用于检测人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。
8.一种基于权利要求6或7所述ELISA试剂盒检测人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的抗体的方法，其特征在于，包括：
a、使用所述包被缓冲液对权利要求5所述单克隆抗体进行稀释，并将稀释后的所述单克隆抗体加样至ELISA酶标板的孔中，并室温孵育；
b、使用所述样品稀释液将检测对象的苯乙肼裂解酶蛋白稀释成不同浓度梯度，并将不同浓度梯度的苯乙肼裂解酶蛋白分别加样至ELISA酶标板的孔中，并室温孵育；
c、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；
d、加入所述酶标二抗，并室温孵育；
e、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；
f、加入所述显色液，室温避光孵育，并加入所述终止液终止反应；
g、在酶标仪上450nm测定OD值。
9.根据权利要求8所述ELISA试剂盒检测人的苯乙肼裂解酶突变蛋白的抗体的方法，其特征在于，进一步包括：空白对照实验。
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