[发明专利]一种探针组及其应用

说明书

本发明提供了一种检测先天性心脏病的致病和/或易感基因的试剂在制备诊断先天性心脏病的产品中的应用，所述试剂可捕获与先天性心脏病相关的多种基因，所述基因最多为138种。本发明所述的试剂可以通过研究先天性心脏病的病因及危险因素，对胎儿时期先天性心脏病的诊断提供参考，以期减少先天性心脏病的发病率。同时，本发明所述的试剂具有高效、检测位点多、准确、操作简便、特异性好、灵敏度高、快速、实用性强且成本低廉的优势。

技术领域

本发明涉及基因工程及分子遗传学领域，具体涉及一种用于检测先天性心脏病相关基因的个性化捕获、测序的探针组、及试剂盒。

背景技术

先天性心脏病(congenital heart disease，CHD)，简称先心病，是指出生时即存在的心脏、血管结构和功能上的异常，是常见的出生缺陷。其临床后果极为严重，通常导致流产、死胎、死产、新生儿死亡、以及儿童、青少年和成人残疾。出生缺陷已逐渐成为我国围生期、儿死亡的主要原因，而先心病几乎占据了主要出生缺陷疾病的1/3，是最常见的心肌病。先心病的内在因素主要与遗传有关，根据其致病和遗传方式的特点，可以将其细分为单基因遗传缺陷、多基因遗传缺陷、染色体畸变和先天性代谢紊乱。实验和临床资料显示，15％的先心病与单基因致病有关，但85％仍由多基因所致病。因此，寻找、发现先心病的致病基因或危险因素，对胎儿时期先心病的诊断至关重要。

先心病(CHD)占我国出生缺陷的首位，发病率约为2.5％-7.7％，其严重的临床后果可导致房间隔缺损、室间隔缺损、法洛四联症、房室间隔缺损、bardet-biedl综合征等先天性心脏病发生。目前的研究表明CHD的发生，是由环境因素、遗传因素等多种因素导致，与遗传机制密切相关，但其发病机制目前尚未明确。近年来，临床对CHD的诊断主要是通过胸部X射线、心脏彩色超声、心电图并参照临床症状和体征等对已发生的心脏畸形和功能异常进行诊断，但无法提供病因学方面的信息，也无法对人群中发生的风险进行评估。而且对于不同遗传学病因造成的同种类型先天性心脏畸形，预后具有很大差别，有遗传学异常的先天性心脏畸形预后通常较差，手术效果也较差。目前药物和手术干预先心病取得了较大进步，然而对危险因素的识别及公共健康预防策略的研究却远远落后。鉴于此，采用现代分子诊断技术可对先心病患者在分子水平上进行诊断，也可对再次妊娠的风险进行精确评估。目前对于已知CHD致病基因的检测，只能在确定目标检测基因后采用逐一设计引物、PCR扩增、Sanger法测序、与reference序列比对的方法进行，费时费力且检测费用不菲；而对于在已知致病基因没有发现严重突变的患儿，其分子遗传学诊断往往难以确立，这些都对遗传咨询及许多相关问题的解决造成了巨大的障碍。

过去十五年人类在分析单独个体基因组的课题上投入了大量精力，也取得了显著的成果。最初分析一个单独个体的若干目标基因需要耗时几个月，费用高达上万美元。CN103374625A公开了先天性心脏病相关基因DLC1及其应用，该专利检测先天性心脏病易感性的方法，包括检测个体的DLC1基因、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异。CN103374627A公开了先天性心脏病相关基因PKD1L1及其应用，该专利检测先天性心脏病易感性的方法，包括检测个体的PKD1L1基因、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异。CN103374628A公开了先天性心脏病相关基因FAM71A及其应用，该专利检测先天性心脏病易感性的方法，包括检测个体的FAM71A基因、转录本和/或蛋白与正常相比是否存在变异。