[发明专利]一种难溶多肽的合成‑分离纯化方法有效
| 申请号： | 201510466322.X | 申请日： | 2015-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN105001298B | 公开（公告）日： | 2018-01-02 |
| 发明（设计）人： | 周彬;查建生;潘奕;徐金荣;康武 | 申请（专利权）人： | 南京斯拜科生化实业有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/20 | 分类号： | C07K1/20;C07K1/12;C07K1/06;C07K1/04 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 210000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种难溶多肽的合成‑分离纯化方法，先通过固相合成将难溶多肽链和亲水多肽连偶联，实现难溶多肽在高效液相色谱中的溶解，再利用LiOH饱和溶液水解酯键断开难溶多肽链和亲水多肽链，使目标肽链直接析出，具有简易、高效的特点，用该方法获得的难溶多肽产品完全可以达到客户要求标准。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 多肽 合成 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种难溶多肽的合成‑分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）利用王氏树脂为起始树脂，采用固相合成法逐一偶联具有保护基团的亲水氨基酸，每当偶联一个被保护的亲水氨基酸后，加入DIC和HOBt进行缩合，反应完全后洗涤，再偶联下一个被保护的亲水氨基酸，获得王氏树脂‑亲水多肽链；（2）向步骤（1）获得的产物中加入连接臂至缩合反应完全；（3）逐一加入具有保护基团的难溶氨基酸，每当偶联一个具有保护基团的难溶氨基酸，加入DIC和HOBt进行缩合，反应完全后洗涤，再偶联下一个被保护的难溶氨基酸，直至偶联到最后一个难溶氨基酸；（4）加入切割剂裂解树脂，取过滤母液加入乙醚析出，离心沉淀获得亲水多肽‑连接臂‑疏水多肽粗品；（5）将上一步骤获得的粗品多肽溶解，利用高效液相色谱分离提纯；（6）将纯化后的粗品多肽用LiOH饱和溶液进行酯键水解，析出难溶多肽。
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