[发明专利]一种用于核酸适配体筛选的试剂盒及其使用、检测方法在审
申请号: | 201910221173.9 | 申请日: | 2019-03-22 |
公开(公告)号: | CN110029110A | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
发明(设计)人: | 罗昭锋;杨伟丽;方晓娜;王进军 | 申请(专利权)人: | 安徽省昂普拓迈生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/6851 |
代理公司: | 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙) 34119 | 代理人: | 段晓微 |
地址: | 230000 安徽省合肥市经济技*** | 国省代码: | 安徽;34 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明公开了用于核酸适配体筛选的试剂盒,其原料包括:磁铁、链霉亲和素修饰磁珠、核酸文库、短序列、PCR预混液、ePCR微液滴生成油、荧光定量PCR预混液、分子量标准样。本发明还公开了上述用于核酸适配体筛选的试剂盒的使用方法,包括如下步骤:S1、将核酸文库固定至磁珠上;S2、筛选;S3、PCR扩增;S4、制备ssDNA;S5、多轮筛选。本发明还公开了一种检测磁珠法筛选的核酸适配体与靶标结合率的方法。本发明缩短了筛选周期,节省了筛选时间,简化实验流程,重复性好,筛选效率高。 | ||
搜索关键词: | 筛选 核酸适配体 试剂盒 核酸文库 磁珠 荧光定量PCR 分子量标准 链霉亲和素 靶标结合 实验流程 磁珠法 短序列 生成油 微液滴 预混液 种检测 磁铁 多轮 修饰 制备 检测 | ||
【主权项】:
1.一种用于核酸适配体筛选的试剂盒,其特征在于,其原料包括:磁铁、链霉亲和素修饰磁珠、核酸文库、短序列、PCR预混液、ePCR微液滴生成油、荧光定量PCR预混液、分子量标准样;其中,核酸文库为碱基个数为60‑100个的单链DNA,由正向引物、随机序列和反向引物构成,其中,正向引物和反向引物的碱基个数均为18‑22个;短序列的3’端进行了生物素修饰,短序列与核酸文库的正向引物的碱基反向互补配对;PCR预混液的原料包括:100μM的荧光修饰的核酸文库正向引物5μL,100μM的polyA修饰的核酸文库反向引物5μL,10mM的dNTP20μL,5U/μL的DNA聚合酶4μL,10×DNA聚合酶缓冲液100μL,加重蒸水至1000μL;ePCR微液滴生成油包括:EM90 1.93g,Triton X‑100 36.5mg,矿物油35.32g;荧光定量PCR预混液的原料包括:100μM核酸文库的正向引物5μL,100μM核酸文库的反向引物5μL,10mM的dNTP20μL,5U/μL的DNA聚合酶4μL,10×DNA聚合酶缓冲液100μL,荧光染料,加重蒸水至1000μL。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽省昂普拓迈生物科技有限责任公司,未经安徽省昂普拓迈生物科技有限责任公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201910221173.9/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种利用微阵列微流控芯片筛选适配体的方法-201610894672.0
- 许丹科;李慧;陈竹;刘晓辉 - 南京大学
- 2016-10-13 - 2019-11-12 - C12N15/115
- 本发明公开了一种新型微阵列微流控芯片应用于适配体筛选的方法。该筛选芯片综合应用微阵列和微流控技术,将正负筛过程集合在一块微流控芯片上,筛选7轮后即获得高亲和力的适配体。同时本发明还公开了乳铁蛋白适配体筛选的具体步骤,包括芯片制备、正负筛过程、PCR扩增等详细过程。该方法筛选出的适配体对靶标蛋白的特异性好,亲和性高;且该适配体较抗体更容易获得,可以大量、快速的体外合成;制备方法更为简单快捷,因此该适配体在许多领域将有望成为抗体技术有益的补充。此外,该正负筛集合的芯片模式方便、快捷、高效,可以用于其它蛋白的适配体筛选,为其他适配体筛选工作者提供了很好的思路设计和参考。
- 与硼砂特异性结合的核酸适配体及利用SELEX筛选方法和应用-201910371702.3
- 韩芹芹;靖乐;夏雪山;宋玉竹;张金阳;王炳辉 - 昆明理工大学
- 2019-05-06 - 2019-11-08 - C12N15/115
- 本发明属于生物医学技术领域,公开了一种与硼砂特异性结合的核酸适配体及利用SELEX筛选方法和应用,所述的核酸适配体是单链DNA,由82个核苷酸组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;其二级结构含有突出的环和茎,其中Bor‑B02吉布斯自由能DG=‑11.90。基于酶联寡核苷酸吸附测定法进行核酸适配体特异性、亲和力和灵敏度等一系列性质评估,显示Bor‑B02解离常数Kd=21.64±2.732nM,且能特异性与硼砂结合,因此该核酸适配体具有高特异性、高亲和力的特点,可用于后续对硼砂的快速检测试剂盒的应用中。
- 一种纤维蛋白核酸适配子及其应用-201910581954.9
- 刘家云;龙铟;李晓东;李保玉;屈园利;刘莉 - 中国人民解放军第四军医大学
- 2019-06-30 - 2019-11-08 - C12N15/115
- 本发明涉及纤维蛋白适配子群的筛选、合成及其体内外的纤维蛋白靶向性应用,采用SELEX技术筛选出纤维蛋白配子群,以及上述适配子群各序列经截短、修饰等处理后的新适配子,以及所述的适配子在纤维蛋白靶向性应用,为后续抗凝、溶栓、示踪等药物用于血栓性疾病方面的研发奠定坚实基础。
- 用于检测氯霉素的试纸条及其制备方法-201810027812.3
- 董益阳;赵帅;万宇平;赵正苗;鲁亚辉;张珊 - 北京化工大学
- 2018-01-11 - 2019-10-15 - C12N15/115
- 本发明涉及一种用于检测氯霉素的试纸条及其制备方法,其中用于检测氯霉素的试纸条包括支撑板,支撑板上排布硝化纤维素膜,硝化纤维素膜的一端自硝化纤维素膜起自下而上排布结合垫和样品垫,硝化纤维素膜与结合垫相对的另一端上铺设吸水垫,硝化纤维素膜上划检测线和控制线,结合垫上添加纳米金‑氯霉素适配体复合物,检测线由结合了链霉亲和素的生物素修饰的互补探针A溶液制得;控制线由结合了链霉亲和素的探针B溶液划线制得;采用以上方法制得的试纸条具有较好的一致性、稳定性和敏感性。
- 一种双特异性核酸适体、衍生物、制备方法及其应用-201910596386.X
- 李娟;王丽萍;李婧影;杨黄浩 - 福州大学
- 2019-07-03 - 2019-09-27 - C12N15/115
- 本发明提供了一种双特异性核酸适体、衍生物、制备方法及其应用,该核酸适体包括第一核酸序列、第二核酸序列;第一核酸序列包括靶标受体特异性核酸适体和第一连接部分,第二核酸序列包括配对受体特异性核酸适体和第二连接部分;靶标受体特异性核酸适体可与靶标受体特异性结合,配对受体特异性核酸适体可与配对受体特异性识别;第一连接部分与第二连接部分形成连接结构。从而使两个核酸适体能够形成稳定的双特异性核酸适体结构。该双特异性核酸适体及其衍生物能够阻碍配体对靶标受体的结合与激活,从而进一步影响细胞功能。本发明的技术方案提高了核酸适体对受体及细胞功能的调控效率。
- 核酸适配体在识别并结合膀胱癌细胞中的应用-201910718644.7
- 李翀 - 谷雨中科(北京)医疗科技有限公司
- 2019-08-05 - 2019-09-24 - C12N15/115
- 本发明实施例公开了一种核酸适配体,所述核酸适配体的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明实施例通过合成随机单链DNA文库和引物,以EJ细胞,即人膀胱癌细胞系作为正筛选细胞,以HCV29细胞,即人膀胱正常细胞系作为反向选细胞。先进行阳性选择,所得的单链DNA库经阴性质控细胞筛选,除去非特异的单链DNA,经过多次cell‑SELEX循环。将最终所得膀胱癌细胞系特异的单链DNA与膀胱癌组织细胞阳性结合筛选,得到精确的结合EJ细胞的特异性核酸适配体文库。
- 识别肠癌血清标记物的核酸适配体及其筛选方法和用途-201910536200.1
- 栗坤;齐力轻;石明;李健;刘志伟 - 燕山大学
- 2019-06-20 - 2019-09-20 - C12N15/115
- 本发明涉及一种识别肠癌血清标记物的核酸适配体及其制备方法和应用,具体公开了四条核酸适配体的核苷酸序列及其筛选方法,首先收集首诊的肠癌患者及健康人血清样本,合成引物和初级文库ssDNA,以表面偶联羧基的磁性琼脂糖微球作为血清蛋白吸附载体,利用消减SELEX技术结合实时荧光PCR技术获取逐步富集的与肠癌血清蛋白特异性结合的核酸适配体序列。通过高通量测序、数据分析等方法筛选出四条特异性识别肠癌血清的核酸适配体。经验证本发明的四条核酸适配体对肠癌患者血清均具有亲和力高和特异性强的特点,在研究肠癌肿瘤标记物钓取、肠癌患者初筛和肠癌靶向性药物治疗方面有广阔的应用前景。
- 基于粒径选择法的胞外囊泡表面蛋白特异适配体筛选技术-201910520154.6
- 李智洋;何农跃;王素 - 南京鼓楼医院
- 2019-06-17 - 2019-09-13 - C12N15/115
- 本发明公开了一种基于粒径选择法的胞外囊泡表面蛋白特异适配体筛选技术,包括以下步骤:1)合成随机文库及上下游引物;2)目标细胞的培养与细胞培养上清的获取;3)粒径选择法提取胞外囊泡;4)正筛获取与靶标胞外囊泡结合的文库序列;5)正负交替筛选获得特异性目标核酸适配体;6)qPCR技术监测文库富集。本发明采用粒径选择法提取胞外囊泡,简单快速且胞外囊泡回收率高,正筛连续进行五至六轮,提高目标核酸适配体回收率,正负交替筛选,筛选中逐渐调整筛选条件,增大筛选压力,提高筛选效率,从而获得高特异性的核酸适配体,利用所获得的适配体,可以开展以胞外囊泡表面蛋白为靶标的疾病液体活检及治疗。
- 人胰多肽核酸适配体及其筛选方法和应用-201610646875.8
- 羊小海;覃诗雅;陈南迪;王青;王柯敏 - 湖南大学
- 2016-08-08 - 2019-08-30 - C12N15/115
- 本发明公开了一种人胰多肽核酸适配体及其筛选方法和应用,人胰多肽核酸适配体为以Q10、5’‑Q11‑FAM‑3’、5’‑Q12‑FAM‑3’、5’‑BHQ1‑Q13‑3’、5’‑Q14‑BHQ1‑3’、5’‑SH‑Q16‑3’、5’‑SH‑Q17‑3’中的任意一种。其筛选方法包括合成随机文库和引物、GO‑SELEX筛选、PCR扩增文库、制备DNA单链文库、重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤。本发明的人胰多肽核酸适配体可应用于制备检测人胰多肽的试剂盒,具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优势。
- 一种双酚A的检测方法及检测试剂盒-201710952837.X
- 陈俊华;潘家峰;周丹华;陈曼佳 - 广东省生态环境技术研究所
- 2017-10-13 - 2019-08-27 - C12N15/115
- 本发明公开了一种双酚A的检测方法及检测试剂盒,属于环境污染物快速检测领域。本发明以双酚A单抗以及双酚A核酸适体为分子识别元件实现双识别,从而提高检测特异性,降低检测交叉反应,进一步通过DNA支点介导的链置换反应,释放具有催化活性的G四聚体核酸序列,形成的G四聚体具有类似辣根过氧化物酶催化活性,可催化使无色底物变成蓝色,双酚A浓度与蓝色变化成正相关,从而可以判断检测体系中的双酚A浓度。本发明灵敏度高,特异性好,常见的其他干扰物对检测不产生影响。检测过程无需检测仪器,结果直接肉眼可见,具有操作简单,成本低廉,响应迅速等优点,可用于不同样品中双酚A含量的快速检测。
- 一种与人非小细胞肺癌细胞特异结合的核糖核酸适配体及其筛选方法-201510053718.1
- 王含璐;刘日河;蒋永平 - 苏州方舟生物医药有限公司
- 2015-02-02 - 2019-08-23 - C12N15/115
- 本发明涉及一种与人非小细胞肺癌细胞特异结合的核糖核酸适配体(RNA aptamer)及其筛选方法。本发明人基于活体内in vivo‑SELEX筛选技术,获得了一条可以与人非小细胞肺癌细胞特异性结合的核糖核酸适配体(RNA aptamer)。该核糖核酸适配体可应用于与肺癌化疗药物、siRNA等结合,构成靶向性药物,以实现肺癌的靶向治疗。该核糖核酸适配体与荧光染料等结合,可以制备人非小细胞肺癌的诊断试剂。
- 一种核酸及其用途-201810153247.5
- 何军林;史卫国;杜闪闪;李阳;郭磊;李朋羽 - 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
- 2018-02-12 - 2019-08-20 - C12N15/115
- 本发明属于生物医药领域,涉及一种核酸及其用途。具体地,本发明涉及一种核酸,其由选自式Ⅰ至式Ⅲ所示的核苷酸残基及其盐中的至少一种修饰5’‑d(GGT TGG TGT GGT TGG)‑3’(SEQ ID NO:1)所形成。在此基础上,本发明还涉及该核酸的用途。本发明核酸可作为凝血酶适配体,其与凝血酶的亲和性强,具有抗凝血的效果。
- 一种与硼砂特异性结合的核酸适配体-201910371568.7
- 韩芹芹;靖乐;夏雪山;宋玉竹;张金阳;王炳辉 - 昆明理工大学
- 2019-05-06 - 2019-07-30 - C12N15/115
- 本发明属于生物医学技术领域,尤其涉及一种与硼砂特异性结合的核酸适配体,与硼砂特异性结合的核酸适配体核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;该核酸适配体为单链DNA,由82个核苷酸组成,拓扑学结构为直链状;预测的二级结构具有突出的环和茎,吉布斯自由能DG=‑15.21。本发明利用SELEX技术筛选出的核酸适配体Bor‑A01能够高亲和力高特异性的识别并结合硼砂;核酸适配体Bor‑A01的鉴别对于食品中残留的硼砂的检测,进而降低硼砂对人体的侵害具有重要意义。
- 一种牛传染性鼻气管炎病毒的核酸适配体及其用途-201611063897.8
- 李永清;许健;张喜喜;黄秀芬 - 北京市农林科学院
- 2016-11-28 - 2019-07-26 - C12N15/115
- 本发明提供了一种牛传染性鼻气管炎病毒的核酸适配体,该核酸适体结合力最高,特异性良好,能够一定程度抑制病毒对细胞的感染,并且在进行FAM标记后,能够进行间接免疫荧光试验(IFA)。该核酸适配体可以用于抑制病毒对细胞的感染,起到抗病毒作用,也可以作为抗IBRV的探针或靶点,用于制备抗牛传染性鼻气管炎病毒的药物或试剂。
- 一种用于核酸适配体筛选的试剂盒及其使用、检测方法-201910221173.9
- 罗昭锋;杨伟丽;方晓娜;王进军 - 安徽省昂普拓迈生物科技有限责任公司
- 2019-03-22 - 2019-07-19 - C12N15/115
- 本发明公开了用于核酸适配体筛选的试剂盒,其原料包括:磁铁、链霉亲和素修饰磁珠、核酸文库、短序列、PCR预混液、ePCR微液滴生成油、荧光定量PCR预混液、分子量标准样。本发明还公开了上述用于核酸适配体筛选的试剂盒的使用方法,包括如下步骤:S1、将核酸文库固定至磁珠上;S2、筛选;S3、PCR扩增;S4、制备ssDNA;S5、多轮筛选。本发明还公开了一种检测磁珠法筛选的核酸适配体与靶标结合率的方法。本发明缩短了筛选周期,节省了筛选时间,简化实验流程,重复性好,筛选效率高。
- 一种针对Her3ECD的ssDNA适配体及其在诊断治疗HER3相关疾病中的应用-201610928829.7
- 宋海峰;付洁;窦晓倩;高新;王芳;张晶;向慎思 - 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;军科正源(北京)药物研究有限责任公司
- 2016-10-31 - 2019-07-12 - C12N15/115
- 本发明公布了一种通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选得到的针对HER3胞外区蛋白(extracellular domain,ECD)高亲和力、高选择性的DNA适配体。本发明通过ELISA、细胞流式、激光共聚焦实验进一步证明该适配体无论是对游离Her3ECD还是对高表达Her3ECD蛋白的乳腺癌细胞都具有一定的特异性和亲和性,为HER3高表达的相关疾病的诊断治疗提供了新的思路。
- 伏马毒素B1核酸适配体链置换探针的筛选及应用-201610019729.2
- 刘继红;王红旗;李淑芳;尹海燕;马莹;李静;祁玉峰;张军锋 - 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
- 2016-01-11 - 2019-07-05 - C12N15/115
- 本发明属于生物技术领域,涉及核酸适配体的应用与开发,具体为伏马毒素B1核酸适配体链置换探针的筛选及应用。本发明公开了FB1核酸适配体链置换探针的筛选,为后续基于FB1核酸适配体链置换探针的信号放大传感技术研发奠定了基础。基于该链置换探针的FB1荧光偏振检测技术采用FB1核酸适配体作为分子识别元件,与基于抗体的免疫检测技术相比,具有成本低廉、特异性高的特点,且该技术为均相检测技术,重现性好,操作简单方便且可实现大量样品的平行检测,有助于建立适合我国国情的农产品伏马毒素监控技术体系,满足当前我国对农产品伏马毒素污染监控关键技术的迫切需要,对保障农产品消费安全和人民生命健康意义重大,应用前景广阔。
- 一种检测人肾透明细胞癌细胞的核酸适体及其在制备检测制剂中的应用-201710109063.4
- 叶茂;谭蔚泓;胡小晓;张慧 - 湖南大学
- 2017-02-27 - 2019-06-21 - C12N15/115
- 本发明公开了一种用于检测人肾透明细胞癌细胞(786‑O)的核酸适体其在制备检测制剂中的应用。同现有技术相比,本发明的核酸适体具有比相关蛋白抗体更高的亲和力与特异性;且无免疫原性,能够体外化学合成,分子量小。还可以对本发明的核酸适体的不同部位进行修饰和取代,同时序列稳定,便于保存;方便标记等优势。采用本发明的核酸适体进行人肾透明细胞癌细胞检测时,操作更为简单、迅速,并且本发明核酸适体的合成成本较抗体制备成本低,周期短,重现性好。
- 与吊白块特异结合的核酸适配体Sf-B09及其应用-201710578798.1
- 韩芹芹;李洁;夏雪山;宋玉竹;张金阳;陈强;王炳辉 - 昆明理工大学
- 2017-07-17 - 2019-06-11 - C12N15/115
- 本发明公开了与吊白块特异结合的核酸适配体Sf‑B09及其应用,所述核酸适配体是单链DNA,由82个核苷酸组成,其SEQ ID NO:2所示;其二级结构含有突出的环和茎,且存在G‑四链体结构,其中Sf‑B09吉布斯自由能DG=‑11.42;该核酸适配体通过酶联寡核苷酸吸附试验验证都能特异性检测到吊白块;具有简单、快速、灵敏等特点,10‑15分钟内即可出结果,无需使用抗体和仪器设备、操作简单、特异性好、结果容易判读、制作方便。
- 与吊白块特异结合的核酸适配体Sf-E07及其应用-201710578804.3
- 韩芹芹;李洁;夏雪山;宋玉竹;张金阳;陈强;王炳辉 - 昆明理工大学
- 2017-07-17 - 2019-06-11 - C12N15/115
- 本发明公开了一种与吊白块特异结合的核酸适配体Sf‑E07及其应用,所述核酸适配体是单链DNA,由82个核苷酸组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;其二级结构含有突出的环和茎,且存在G‑四链体结构,Sf‑E07吉布斯自由能DG=‑10.78;该核酸适配体通过酶联寡核苷酸吸附试验验证都能特异性检测到吊白块,具有简单、快速、灵敏等特点,10‑15分钟内即可出结果,无需使用抗体和仪器设备、操作简单、特异性好、结果容易判读、制作方便。
- 与吊白块特异结合的核酸适配体Sf-A09及其应用-201710578786.9
- 韩芹芹;李洁;夏雪山;宋玉竹;张金阳;陈强;王炳辉 - 昆明理工大学
- 2017-07-17 - 2019-06-11 - C12N15/115
- 本发明公开了与吊白块特异结合的核酸适配体Sf‑A09及其应用,所述核酸适配体是单链DNA,由82个核苷酸组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;其二级结构含有突出的环和茎,且存在G‑四链体结构,其中:Sf‑A09吉布斯自由能DG=‑14.75。该核酸适配体通过酶联寡核苷酸吸附试验验证都能特异性检测到吊白块,具有简单、快速、灵敏等特点,10‑15分钟内即可出结果,无需使用抗体和仪器设备、操作简单、特异性好、结果容易判读、制作方便。
- 卵巢粘液性癌细胞3AO的核酸适配体WYZ-2及其筛选方法和应用-201611082744.8
- 吴冬;黄慧娟;何春妮;林朝雅 - 吴冬
- 2016-11-30 - 2019-06-07 - C12N15/115
- 本发明涉及一种卵巢粘液性癌细胞3AO的核酸适配体WYZ‑2及其筛选方法和应用,所述核酸适配体WYZ‑2的序列为:5’‑AGCTGCTATACTAGCTAAAGCGAGTCAGTCAGAATGCCAGTAAGTCTAGTCAAGCCTTGACCGTAGCGATAGCTAGCTT‑3’,它的筛选方法为,基于SELEX筛选技术,以卵巢浆液性癌细胞SKOV3和正常卵巢上皮细胞IOSE作为反筛细胞,以卵巢粘液性癌细胞3AO为正筛细胞,筛选出与卵巢粘液性癌细胞3AO特异性结合的核酸适配体,它具有高特异性、高亲和力、可体外合成及修饰、化学性质稳定、药代动力学性质佳、无免疫原性等特点。
- 用于术前和术中组织定位和可视化的组织特异性标志物-201780062879.4
- D·达尔马-魏斯豪茨;A·韦塞尔;J·布雷登坎普 - 因维蒂有限公司
- 2017-08-11 - 2019-05-24 - C12N15/115
- 外科医生可能面临难以在术前选择进行切口的位置并在术中识别和区分靶组织以去除或识别,以使其不会与邻近或非靶组织一起去除或因此邻近或非靶组织是没有被划到、伤害或意外去除。组织特异性标志物可包括配置为结合预先选择的靶组织的适体或亲和体和与所述适体或所述亲和体偶联的一个或多个指示物元件。所述一个或多个指示物元件产生信号,从而允许以术前方式和操作方式识别所述靶组织。
- 与靶蛋白质结合的核酸片段-201510795064.X
- 平尾一郎;平尾路子;山重里恵;横山茂之 - 塔古西库斯生物株式会社
- 2012-11-15 - 2019-05-21 - C12N15/115
- 本发明的目的是开发并提供用于有效制备核酸适体、特别是DNA适体的方法,所述核酸适体相比通过常规方法获得的核酸适体具有对靶物质的更高的特异性和结合活性。本发明提供了包含天然核苷酸和具有人工碱基可配对的人工碱基的非天然核苷酸的可转录或可复制的核酸适体。本发明还提供了用于对选自单链核酸文库的含有非天然核苷酸的单链核酸分子进行测序的方法。
- 与靶蛋白质结合的核酸片段-201510796236.5
- 平尾一郎;平尾路子;山重里恵;横山茂之 - 塔古西库斯生物株式会社
- 2012-11-15 - 2019-05-21 - C12N15/115
- 本发明的目的是开发并提供用于有效制备核酸适体、特别是DNA适体的方法,所述核酸适体相比通过常规方法获得的核酸适体具有对靶物质的更高的特异性和结合活性。本发明提供了包含天然核苷酸和具有人工碱基可配对的人工碱基的非天然核苷酸的可转录或可复制的核酸适体。本发明还提供了用于对选自单链核酸文库的含有非天然核苷酸的单链核酸分子进行测序的方法。
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C204及其筛选方法和应用-201611170854.X
- 王开宇;兰小鹏;廖剑;洪笑迁;闫慧慧;杨湘越 - 中国人民解放军南京军区福州总医院
- 2016-12-16 - 2019-05-21 - C12N15/115
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C204及其筛选方法和应用,所述核酸适配体C204的序列为:AGGGCCGAGCTCACTTGTCTTAGTCCGACATGGTGCCTCCCTGCCCCAGAGCTCCGCCGGCACAATTGTGC;它的筛选方法为:基于核酸适配体的体外SELEX筛选技术,利用羧基磁珠作为固相介质,以金黄色葡萄球菌肠毒素C2为靶标,通过金黄色葡萄球菌肠毒素C2磁珠从ssDNA文库中筛选得到与金黄色葡萄球菌肠毒素C2特异性结合的核酸适配体;本发明的核酸适配体C204能高亲和力、高特异性地与金黄色葡萄球菌肠毒素C2结合。
- 一种分离甲胎蛋白的适配体功能化纳米磁珠的制备方法-201910037678.X
- 林振坤;苏宇;刘雨欣;陈永辉;刘畅;金嘉乐;戴露瑶;包佳丽 - 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院
- 2019-01-15 - 2019-05-17 - C12N15/115
- 本发明提供一种分离甲胎蛋白的适配体功能化纳米磁珠的制备方法,如下:(1)纳米磁珠表面修饰亲和素:20mg的纳米四氧化三铁均匀分散在适量乙醇中,先后依次加入氨水和正硅酸乙酯,室温下充分搅拌;上述反应产物经磁分离后分散于甲苯中并搅拌,逐滴加入3‑氨丙基三乙氧基硅烷,在高温氮气保护下充分搅拌;上述反应产物经磁分离后分散于PBS溶液,加入戊二醛,室温充分混合,加入亲和素振荡继续充分孵育,获得表面修饰亲和素的纳米磁珠。(2)纳米磁珠表面嫁接适配体。取上述表面修饰亲和素的磁珠溶于适量TE溶液,加入5’端修饰生物素的AFP适配体,室温充分孵育,通过亲和素和生物素的特异性结合,适配体嫁接于纳米磁珠表面,获得AFP适配体纳米磁珠。
- 一种糖化血红蛋白的核酸适配子及其应用和检测糖化血红蛋白的试剂盒-201611226633.X
- 刘振华 - 三诺生物传感股份有限公司
- 2016-12-27 - 2019-05-10 - C12N15/115
- 本发明涉及生化检测技术领域,公开了一种糖化血红蛋白的核酸适配子及其应用和检测糖化血红蛋白的试剂盒。本发明所述核酸适配子具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示核苷酸序列;或为在SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2任意一个所示核苷酸序列基础上发生取代碱基、缺失碱基和添加碱基三种情形中的一种或两种以上情形的核苷酸序列。本发明提供了两个新型的糖化血红蛋白核酸适配子,其和糖化血红蛋白的结合常数能够达到nM级,并且与血红蛋白的结合较少,具备较高的特异性和灵敏度,在检测实际样本时信号梯度较为明显,与阴性对照形成显著区别,可以用于糖化血红蛋白含量检测研究中。
- 一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒-201711454761.4
- 李娟;王丽萍;李佩佩;陈杰;杨黄浩 - 福州大学
- 2017-12-28 - 2019-05-10 - C12N15/115
- 本发明提供一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,该试剂盒包括a)抗原修复液,b)清洗液,c)核酸适配体稀释液,d)封闭液,采用标记Cy5的核酸适配体作为荧光探针,标记石蜡包埋的肺转移性骨肉瘤组织。本发明所提供的核酸适配体能够特异性结合肺转移性骨肉瘤细胞,而不结合其他细胞,其作为一种特异性识别肺转移性骨肉瘤的新型分子探针,对于易出现肺转移的骨肉瘤的早期诊断和治疗具有重要的研究意义。本发明所用的石蜡切片免疫荧光染色无需低温保存即能用于肺转移性骨肉瘤组织的病理的诊断检查,特异性强,敏感性高,操作简单,设备要求简单,定位性能好,于国内推广具有现实意义。
- 针对IL-17的适体及其用途-201480017486.8
- 石黑亮;中村义一;春田和彦;大泷菜月 - 国立大学法人东京大学;全药工业株式会社
- 2014-03-20 - 2019-05-10 - C12N15/115
- 本发明提供了与IL‑17结合以抑制IL‑17和IL‑17受体的结合的适体;含有适体和功能物质(例如亲和性物质、标记物质、酶、药物递送介质或药物)的复合物;含有适体或含有适体和功能物质的复合物的药剂、诊断剂、标记剂等。
- 专利分类